Биотехника размножения сельскохозяйственных животных. Часть 3. Разбавление и хранение спермы. Осеменение самок сельскохозяйственных животных и птиц

Введени е в среды сахаро в ил и глицинг( аликокол )а понижае т и х электропроводност ь и защищае т сперматозоидо в о т агглютинаци и с(клеивани яиг холовкам иилв исемт еломр в езультат епотеро итриц-а тельног о электрическог о заряд.)аСахара г(люкоз ,а фруктоз )а могу т быти ьспользованыс перматозоидамд ил яметаболически хпроцессо .в Благоприятно е действи е сахаро в н а сперматозоиды связан о н е тольк с оучастием и х вметаболически хпроцесса .хСахаря авляютс я источником редуцирующи х вещест .в Воспринима я кислоро д и оки-с ляяс ,ьон имогус тлужита ьнтиоксидантам и ипредохранята ьнтагглютини н иферментыс ,одержащис еульфгидрильнуюг рупп ,уо токисл-е ни .я Сахар а увеличиваю т вязкост ь среды и препятствую т развитию гнилостны хмикроорганизмо .вКромт еого ,онс ипособныз адерживат ь вод уилз иаменят ьес в етруктурач ,хувствительныд к хегидратаци.и Желток куриныс хвежих ( 1– 2дн!я ) яиц . Содержиг :тлюкозк ,уотора я используетс я сперматозоидам и раньш ,е чем фруктоз а плазмы спермы , различны е протеиды , водорастворимы е и жирорастворимы е витамины , кароти ,н холестери н и други е веществ ,а стимулирующи е активност ь дегидрогена з сперматозоидо .в Лецити н желтк а защищае т сперматозоиды от температурног ошок а ,аря ддругив хещест вс иоединени ймогус тлужит ь вкачеств еокислительныс хубстрато ,впр-е дохраняющи х сульфгидрильны е группы ферменто в и антагглютини н о т разрушени .я Желто к имее т слабокислую реакцию (рН 0,6–3,6 .) Обычн о он а нейтрализуетс я введением в сред у лимоннокислог о н-а три .яВс редыд лс япермыб ыкб и ааран ажелткв аключаю1 т5,2–20,0% . Оптимальным количеством дл я спермы хряк а и кролик а являетс я 3– 5%д а ,л яжеребц а– мене1 е% желтк.а Глицерин (CH2O^H � CHOH � CH2O^H .) Простейши й трехатомны й спир ;т представляе т собо й густую , прозрачную , бесцветную , гигроскопичную жидкост .ьЛегкс омешиваетсв с яодо йилэ итиловымс пиртомл в юбы хпропорция .хПро ихлажденид и о–196 � Сз атвердеваеб те з образовани я кристалло в льд .а Таким ж е свойством обладаю т и ра-с творы с концентрацие й ег о 70% ил и боле .е Точкз аамерзани я раствород важн с еебольшимс одержаниемг лицерин апонижаетсо а ,ябъеми х уменьшаетс .я Введенны й в среды длз яамораживани я спермыг лиц-е ри н уменьшае т опасност ь образовани я кристалло в льд а и механич-е ског оповреждени яимс иперматозоидос ,впособствуес тнижениюд авлени я н аклетк и и препятствуес тильном у повышению концентраци и растворенны х вещест в пр и образовани и кристалло в льд а и з воды . Глицери н используетс я сперматозоидам и путем окислени я дл я обр-а зованиэ янергиа в а ,иэробныу хсловияв хосполняес тодержани ефруктозы .Вноситсо як в ноличество ед 3 т1 о 0мн л1 а0 0мс лреды . Бактериостатически е вещества – пеницилли ,н стрептомици ,н гентомицит ,нилози ,нлинкомицис ,нпектиномицис ,нтрептоци дбелы й растворимы й ил и комбинированны е препараты : спермосан- ,3 спермо-

са нППК ,полигек ,номбиспермоса нЛАП д и .рВса ентибиотикд иолжныб ыт ьпроверенын б аезвредностд ьлс яперматозоидо .в Пр ихраненис ипермы возможн оразвити е вне ймикроорганизмо .в Попадаю тон в имомен тполучени яил иобработкс ипермы .Размножаяс ,ьмикроорганизмыв ыделяюс в тред упродуктыо бменк ,аоторы е отрицательно сказываютс я н а выживаемост и сперматозоидо .в Пр и осеменени и внесенны е с о спермо й в половы е пут и самк и микроорг-а низмы могу т препятствоват ь оплодотворению ил и развитию бер-е менност .и Особенн о большую опасност ь представляе т загрязнени е спермы возбудителям и специфически х половы х инфекци .й Дл я пр-е дупреждени я размножени я микроорганизмо в в сперм е и инфициров-а нис япермыв носяс тульфаниламидыа и нтибиотик.и Среды готовя т н а дистиллированно( йжелательн о дважды ди-с тиллированной) вод .е Проводит ь дистилляцию необходим о в цельностеклянном дистилляционном аппарат ,е чтобы вод а н е соприкасалас ь металлическимд иеталям .иХраняз в такрытыс хтеклянныс хосуда.х Среды дл я разбавлени я спермы бык .а Сперм у бык а храня т пр и температур е–196оС( вжидкома зот ,)еиногд апр5..0 иоС ипрк иомна-т ныт хемпература .х Разбавляю т сперм у средам ,и соста в которыз хависи т о т технологи и расфасовк и и хранени .я Многи е средыз апатентованы. Прз иамораживанис ипермы( г вранула хс иоломинахр )азбавл-е ни е проводя т ЛЖГ л(актозо-желточно-глицериновой) средо й ил и ЛЖЦГ л(актозо-желточно-цитратно-глицериновой) .Ве с еостав:е

Водд аистиллированна1 ........... я0 0м1 л0 0мл Лактоз. а…..................…1 ...........1 г 5,1г 5,0 Натри яцитра ........................... т – г 2,0 Желток куриныя хи2 ................ ц 0м2 л 0мл Глицери...................... н… 5 ..........м 5 лм л Спермосан-............ 3…5 ..............т 0ы .сЕД5 .т 0ые .сд Многи е организаци и п о искусственном у осеменению использую т двухфракционныс ереды с ипермр уазбавляюд тважды .Нс еодержаща я глицерин а фракци я А используетс я дл я начальног о разбавлени я и охлажденис япермыв ,тора я фракци яБ у сдвоеннымс одержаниемг лиц-е ринд аобавляетс япослт еогк ,оас кпермо ахлажденд а о+5оС .Введени е глицериново й фракци и посл е охлаждени я уж е разбавленно й спермы предотвращае т возможны еповрежденис яперматозоидо в иобеспечивае т проявлени е действи я антибиотико .в Наиболе е проста я сред а – желточно-цитрато-глицеринова( яЖЦГ) , состоящаи яд зву хфракций: Ф я и ц к а р А Цитратныб йуфе9,2 р%-ны....... й………………4 ..........0 0мл Желтос квежи( х1–д 2нк )яуриныя хи ц………………10 0мл

Ф я и ц к а р Б

Финально е соотношени е фракци и А + сперм а и фракци и В – .1:1 Прт иакомс оотношенис иодержани е компоненто( в в % )с вмеси : б-у фец ритратны й – 7 ,3 желто к – 2 0 и глицери н – .7Вэ тс уред( уо вдн уило иб ефракции )можнв оключат ьфруктоз уилг илюкозк ;уонечна я концентрацис в яредо ед 1 т2,1 о5% .ЖЦГс редд аолжн аиметр ьН8,6 – о и 9,6смотическод еавлени2 е85–30 0миллиосмомоле .й Медведе вГ.Ф . иГуминска яЕ.Ю( .2007 )предложил имодифицированную цитратно–лактоза–желточно–глицериновую среду (ЦЛЖГ) . В соста в это й среды входя :т натри я цитра т 3-замещенны й 2-водны й (Na3C6H5O7 2·H2O ,) лактоз( ахимическ и чиста я С12^Н 22^О 11^·H 2^O ,) желто к куриныя хи( ц1–д 2нг и )ялицери.н

Ф я и ц к а р Ас реды

Цитратныб йуфек с ронцентрацие9,2 й% – 10 0м л Лактоз а– 5,3г 8 Желток куриныя хи ц– 2 5мл Смеса ьнтибактериальныв хещест в– 2мл

Ф к а р я и цБс реды Цитратныб йуфек с ронцентрацие9,2 й% – 8 5,2м л Лактоз а– 5,3г 8 Желток куриныя хи ц– 2 5мл Глицери н– 1 5,7м.л В дву х м л стерильног о водног о раствор а антибактериальны х в-е щестд волжнс оодержатьс1 я 0мт гилозинт аартрат5 ,а 0мг гентамицин а3 и6/0 0мл гинкоспектин .аОсмотическод еавленис ереды – 335–38 0 миллиосмолер ,йН9,6 – .0,7 В предыдущиг еоды широк оиспользовалас ь молочнас яреда .Та в ,к США в199 .г 2 4/1част ьвсес йпермы был аразбавлен амолочнос йр-е до .й Единственны й серьезны й недостато к это й среды – эт о наличи е оптическр иазличимы хжировы хшарикок ,воторыз еатрудняюо тценк у подвижностс иперматозоидо.в Готовяд тв ефракцис иреды.

Фракци яА

Прогрето емолок о………………………5 ...0 0мл