мобилизации защитных сил организма вводили витаминный препарат «Нитамин», который инъецировали в дозе 0,2 мл на 10 кг массы внутримышечно, 2 раза в месяц с интервалом между введениями 10 дней. Коровам подопытной группы дополнительно за 14 дней до предполагаемого отела и сразу после родов внутримышечно в область крупа инъецировали по 0,1 мг/кг препарат «Полирибонат» (табл. 3).

В дальнейшем следили за течением родов, сроком выведения последа, количеством задержаний последа, течением послеродового периода и показателями воспроизводительной функции.

Таблица 3 – Схема применения подопытным коровам препаратов «Нитамин» и «Полирибонат»

После родов с восстановлением половой цикличности коров осеменяли искусственно замороженно-оттаенной спермой, цервикальным способом с ректальной фиксацией шейки матки рукой (методика описана в первом этапе исследований). Коров, не пришедших в половую охоту в течение месяца после осеменения, считали условно стельными. После диагностики беременности анализировали показатели репродуктивной функции: у каждой коровы определяли сервис-период и количество дней бесплодия, затем высчитывали оплодотворяемость от первого осеменения и общую оплодотворяемость, индекс осеменения.

Биохимические исследования крови проводили у животных опытной и контрольной групп перед введением препаратов и перед родами в Республиканской научно-производственной ветеринарной лаборатории по общепринятым методикам. При этом определяли со-

держание фосфора, кальция, сахара, общего белка, резервной щелочности, каротина.

Для контроля показателей иммунобиологической реактивности организма у двенадцати животных подопытной и контрольной групп проводились иммунологические исследования проб крови. Пробы крови для определения иммунного статуса получали перед введением препарата и перед родами. Взятие и подготовку проб проводили по общепринятым методикам. Методы иммунологических исследований описаны в первом этапе исследований. Исследования проведены в лаборатории клинической иммунологии Республиканской больницы.

На четвертом этапе были выполнены исследования по разработке биотехнологических методов стимуляции стадии эструса полового цикла на фоне коррекции иммунобиологической реактивности организма коров.

В настоящее время на интенсификацию воспроизводства крупного рогатого скота оказывает существенное влияние применение биотехнологических методов, которые подразумевают индуцирование и синхронизацию стадии эструса полового цикла, коррекцию и активизацию овуляторной функции яичников, стимуляцию лютеогенеза гонад и устранение функциональной недостаточности яичников. Получившие широкую известность схемы биотехнологического контроля половой функции ориентированы преимущественно на проведение так называемых фронтальных обработок больших групп животных.

Как известно, пик реактивности генеративных структур яичников к гонадотропинам приходится на середину лютеальной фазы полового цикла. Из этого следует, что данный отрезок полового цикла (9-12й дни) является оптимальным для стимуляции фолликулогенеза.

У коров циторецепторная чувствительность яичников к препаратам простагландина Ф 2-альфа отмечается в промежутке между 6-16 днями после овуляции, то есть при наличии функционально активного желтого тела. В другие стадии полового цикла яичниковые структуры к ним малочувствительны либо рефрактерны, поэтому нет оснований рассчитывать на получение стимулирующего эффекта. В связи с этим, мы в своих экспериментах по индуцированию и синхронизации стадии эструса полового цикла у коров применили препарат «Эстрофан» -

синтетический аналог простагландина Ф-2 альфа.

Среди биологических регуляторов половой функции за последнее десятилетие широкую известность приобрел препарат «Сурфагон» - синтетический аналог гонадотропного рилизинг-гормона. Препарат «Сурфагон» (и его аналоги: диригестран, фертирелин, гонадоребелин, бусерилин, люлиберин и др.) при парентеральном введении вызывает выделение лютеинизирующего гормона, уровень которого в периферической крови повышается уже через 30 минут после инъекции этого гормона, достигает максимума через 2-3 часа. Выделение больших количеств лютеинизирующего гормона стимулирует процесс овуляции. Опираясь на эти данные, мы в своих экспериментах применили препарат «Сурфагон» для стимуляции фолликулогенеза и овуляторной функции яичников, с целью повышения оплодотворяемости.

Экспериментальные исследования были проведены на коровах симментальской породы на молочно-товарной ферме учебно-опытного хозяйства «Байкал» Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В.Р. Филиппова.

Были отобраны 22 коровы, находящиеся в послеродовом периоде по принципу аналогов, из которых сформировали две группы коров: опытная и контрольная. Опытная группа была сформирована из 11 коров, контрольная также из 11 коров. Коровам подопытной группы – для повышения иммунобиологической резистентности организма однократно внутримышечно инъецировали иммуномодулятор «Полирибонат» 0,1 мг/кг, с целью повышения общего биологического тонуса и мобилизации защитных сил организма мы применили трехкратно с интервалом 7 дней водорастворимый комплекс витаминов «Нитамин», который инъецировали в дозе 0,2 мл/10 кг внутримышечно. Животным обеих групп независимо от гормональной фазы (дня) полового цикла был инъецирован препарат «Эстрофан» в дозе 2 мл внутримышечно. Выборку коров обеих групп после инъекции им препарата «Эстрофан» проводили по проявлению ими клинических признаков стадии эструса полового цикла и результатам ректального исследования, которое проводили утром и вечером. В период исследования коровы, проявившие стадию эструса полового цикла, находились под тщательным наблюдением до проявления ими половой охоты. По мере проявления коровами подопытной группы половой охоты мы инъецировали

внутримышечно им препарат «Сурфагон» в дозе 5 мл (25 мкг) за час до проведения им искусственного осеменения. Искусственное осеменение животным обеих групп проводили замороженно-оттаянной спермой, предварительно дважды оцененной на пригодность с интервалом 12 часов (утром и вечером) (табл. 4).

Таблица 4 – Схема гормональной обработки коров

В период проведения экспериментов учитывалась продолжительность периода от инъекции препарата «Эстрофан» до проявления коровами обеих групп стадии эструса полового цикла (в часах), сервис-периода и индекс-осеменения.

Обработка результатов исследований. Полученный эксперимен- тальный материал обработали методом вариационной статистики с использованием таблицы Стьюдента с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±m), критерия Стьюдента (t) и уровня доверительной вероятности (Р) (Пецик Л.А. с соавт., 1980).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Иммунобиологическая реактивность организма и ее влияние на оплодотворяемость коров

В процессе эволюции у млекопитающих животных появились тонкие механизмы распознавания начала беременности и последующего поддержания на всем ее протяжении. Определяющими факторами длительности беременности у плацентарных млекопитающих являются размеры тела матери и морфологическое совершенство плаценты. Однако, в зависимости от среды обитания живот-

ных влияют на течение беременности и другие факторы, которые негативно сказываются на эмбриональном периоде. Критическим периодом в развитии эмбрионов является срок от разрыва у них прозрачной оболочки до перехода их на плацентарный тип питания. В этот период гибнет значительное количество зародышей по причине губительного действия иммунных тел матери. Иммунная система матери обладает тонкой способностью распознавать чужеродные антигены, но вместе с тем между эмбрионом и организмом матери создаются отношения взаимной терпимости-толерантности. Оказывается, такие гормоны, как прогестерон или хорионический гонадотропин связаны с иммунными реакциями матери при беременности, позволяя материнскому организму приспосабливаться к эмбриональному аллотрансплантанту. Очевидно, прогестерон, являясь одним из необходимых гормонов для поддержания беременности, во время стимуляции секреции эмбриотрофа маточными железами, в то же время снижает иммунные реакции в матке. Кроме того, ранний зародыш, который образовался, уже в первые часы после оплодотворения яйцеклетки образует иммуннодепрессорный фактор, который затрудняет лимфоцитам распознавание чужеродных антигенов эмбриона.

Из сказанного можно предположить, что искусственное ослабление иммунных реакций организма самки (создание иммунодефицита) может способствовать повышению процента приживления (имплантации) эмбриона.

В настоящее время стало известно, что распознавание чужеродных антигенов зародыша материнской иммунной системой приводит не к формированию реакции отторжения, а к становлению иммунотрофического взаимодействия в системе самка – зародыш. При этом часть эмбриональных потерь может быть обусловлена нарушением становления названного иммунотрофического взаимодействия.

В связи с вышеизложенным, исследования были направлены на изучение динамики иммунологических показателей крови коров в период осеменения и имплантации, поскольку в последнем случае отмечается наиболее высокая эмбриональная смертность, связанная с неадекватным ответом материнского организма на антигены плода.

Из 18 подопытных животных 50% осеменялись первый раз после родов (продолжительность периода от отела до осеменения составила 38±4 дня), 23% - второй раз (продолжительность периода то

отела до учитываемого осеменения - 81±4 дня), 18% - третий раз (150±11 дней), 9% - четвертый раз (244±40 дней).

В результате проведенных иммунологических исследований не было выявлено достоверного различия между животными, осеменявшимися неодинаковое количество раз и в различные сроки после отела.

Результаты иммунологических исследований проб крови показали, что у оплодотворившихся коров (n=7) по сравнению с оставшимися бесплодными (n=11), независимо от кратности осеменения, показатели иммунобиологической реактивности на 1-3-й день после осеменения находились на более высоком уровне (табл. 5), (рис.1-6).

Таблица 5 – Иммунологические показатели крови оплодотворившихся и неоплодотворившихся коров во время осеменения

• • Р<0,05 по сравнению с неоплодотворившимися коровами

** - Р<0,01 по сравнению с неоплодотворившимися коровами

***- Р<0,001 по сравнению с неоплодотворившимися коровами

Исследованиями последних двух десятилетий было доказано, что иммунный механизм организма срабатывает на чужие клетки и ткани.

Известно, что белые кровяные клетки в первую очередь реагируют на внедрение чужеродных антигенов. Лейкоциты, выполняющие защитную функцию организма, находятся в определенной связи с воспроизводительной функцией животных.