случае имеет место увеличение популяции В-лимфоцитов до 4080% от общего числа лимфоцитов (против 15-20%) и включение генетической информации вируса в различные сайты клеточной ДНК В-лимфоцитов. Кроме того, что циркулирующие при персистентном лимфоцитозе лимфоциты являются поликлональными, исходя из сайтов интеграции провируса, они еще не имеют хромосомных аномалий и не являются типичными опухолевыми клетками. При опухолевой форме, генетическая информация вируса интегрирована в ДНК большинства опухолевых клеток в одном и том же сайте.
Вирус лейкоза крупного рогатого скота относится к семейстsy Retroviridae, подсемейству Oncovirinae (РНК-содержащие опухолевые вирусы). У представителей всего этого семейства в вирионе имеется обратная транскриптаза (РНК-зависимая ДНКполимераза). Геном ВЛКРС состоит из 8714 пар нуклеотидов и имеет следующую структуру: s"-LTR-gag-pol-env- pXBL-LTR-3". Подробности строения генетического аппарата ВЛКРС представляют интерес для генетиков и обстоятельно изложены В.П. Шишковым, Л.Г.Бурба и А.Ф.Валиховым (1988) по данным которых мы даем настоящее описание.
"LTR состоит из 530 пар оснований. Донорский сайт сплейсинга находится в К-участке. За LTR следует лидерная последовательность в 97 пар. Первую открытую рамку считывания составляет ген gag (нуклеотиды 628-1806). Этот участок кодирует белок-предшественник со структурой NH2-p15 -р24-СООН. Через 500 пар после концевого триплета gag начинается вторая рамка считывания для pol, кодирующая 852 аминокислоты (позиции 2317-4875). Характерно, что оба концевых участка ро!-продукта обнаруживают большую гомологию с соответствующими участками вируса С-типа птиц, чем С-типа млекопитающих. Pol-npoдукт (95 кД) несколько больше, чем полимераза ВЛКРС (70 кД). Возможно, что этот ген кодирует также и эндонуклеазу. Третью рамку составляет ген епу (позиция 4821-6368) и кодирует 515 аминокислот, составляющих поверхностный гликопротеид #р51 и трансмембранный белок 2р30. В противоположность pol-npoдукту gp30 выявляет большую гомологию с вирусами лейкозов мышей, чем с вирусами лейкозов птиц, что позволяет предпола-
гать химерную природу ВЛКРС. На основании этих данных высказывается предположение, что вирусы лейкоза крупного рогатого скота и человека (ВЛКРС и HTLV) составляют отдельную таксономическую группу ретровирусов, которую следует обозначить как "Е".
Анализ ДНК животных больных лейкозом в стадиях, характеризующихся увеличением лимфатических узлов, гиперплазией селезенки, и сравнение количества вируссодержащих фрагментов, полученных с помощью рестриктаз EcoR | и BamHI позволили установить существование нескольких вариантов ВЛКРС. Выявлено шесть генетических мутантов вируса лейкоза крупного рогатого скота: два в Бельгии, один во Франции , два в Японии и один в США, причем все они являются онкогенными (Г.Ф. Коромыслов, 1988).
Анализ очищенных вирионов ВЛКРС показал наличие в составе вирионов четырех главных негликозилированных белков (p24,p15,p12,p10) и двух гликозилированных компонентов ( 2р51 gp30). Каждый тип белковых молекул и гликопротеидов содержат эпитопы к которым вырабатываются антитела.
Исследования в области молекулярной биологии ВЛКРС дали информацию, касающуюся РНК-генома и провирусной ДНК. Результаты изучения вирусного онкогенеза показали, что ретровирусы могут вызвать трансформацию клетки при интеграции их провирусной ДНК рядом с клеточными неактивными онкогенами. Поскольку провирусная ДНК содержит длинные концевые повторы последовательностей (ГТК), которые имеют промоторы похожие на клеточные для транскрипции иРНК, то интеграция провирусной ДНК сразу после неактивного онкогена приводит к экспрессии этого онкогена. В результате трансляции онкогенной иРНК происходит синтез онкогенного продукта, который участвует в процессе трансформации инфицированной клетки. Возможно, что в этом процессе заложен один из моментов, объясняющих восприимчивость или устойчивость отдельных животных к лейкозу.
Так, Р.А.Кукайн (1979) предполагает, что на интеграцию генома ВЛКРС с ДНК клетки решающее значение оказывают генетические и клеточные факторы хозяина. Данные о том, что экс-
прессия эндогенных вирусов существенно облегчает интеграцию эгзогенных ретровирусов в ДНК клетки хозяина , согласуется с высокой чувствительностью к ВЛКРС животных породы бурая латвийская, в геноме которой обнаружен эндогенный ВЛКРС. Для многих онковирусных инфекций доказано существование предпочтительного для интеграции провируса участка ДНК. Однако, пока не удалось экспериментально показать сайт предпочтительной локализации ВЛКРС-провируса в опухолевых клетках. Авторы предполагают, что если предпочтительный сайт интеграции все же существует при опухолевой трансформации клеток, то он является не единственным, встройка может происходить в нескольких местах большого участка ДНК. Таким образом, результаты исследований достоверно подтверждают роль ВЛКРС в индукции лейкоза крупного рогатого скота, однако не определяют функцию провируса или провирусной информации в этом процессе.
Наши исследования , проведенные на крупном рогатом скоте совхоза "Заполярный", расположенного в городе Норильске на 700 северной широты в экстремальных условиях показали, что интенсивность течения болезни во многом зависит от наличия иммунодефицитов у зараженных животных. Причем имели место иммунодефициты, связанные как со снижением уровня гумморальных факторов естественной резистентности (лизоцима и бактерицидной активности) сыворотки крови, так и со снижением активности нормальных киллеров.
В работе П.Н.Смирнова и А.Т.Левашова (1984) показано, что у телят родившихся от больных лейкозом коров иу телят в раннем возрасте заразившихся ВЛКРС, состояние иммунной системы можно охарактеризовать, как иммунодефицит. Авторы считают, что иммунодефициты во многом благоприятствуют развитию лейкозного процесса в организме.
Для различных вирусных‘инфекций установлены перестройки поверхностной мембраны клеток, инфицированных вирусом. Эти перестройки происходят под действием антител, направленных против вирусиндуцированных антигенов, расположенных на цитоплазматической мембране этих клеток. Такие изменения приводят к снижению количества высвобождающихся вирионов,
