Глава 4. ГЛАВНЫЙ КОМПЛЕКС ГИСТОСОВМЕСТИМОСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА.
Главный комплекс гистосовместимости в настоящее время привлекает внимание большинства генетиков. Материалы наших исследований опубликованы в книге “Главный комплекс гистосовместимости крупного рогатого скота" (1993). Поэтому в данной работе мы вкратце коснемся строения ГКГС и его полиморфизма, т.к. эта проблема открывает новые аспекты механизма устойчивости животных к болезням.
Главный комплекс гистосовместимости крупного рогатого скота обозначается ВоГ.А и располагается он на 23-й хромосоме. Во многом комплекс ВоГ.А гомологичен в строении проксимальному отделу 17-ой хромосоме мыши, несущий гены Н-2 и участку 6-й хромосомы человека, где расположен комплекс НГА. На данном этапе получена четкая локализация генов DRB, РОВ, DOB, ряд генов [ класса, пропердина ( фактора В), комплимента (компонента 4), системы эритроцитарных антигенов М (возможно и В-система), белков теплового шока (HSP70-1 и 2), пролактина (PRL, PRP) и Т-комплекса 1 (NCPIB) (И.А.Захаров, 1993; А.Н.Завада, 1993).
Структура BoLa
Главный комплекс гистосовместимости делится на три области, гены которых контролируют продукты трех классов. Областью называется участок хромосомы, который можно определить по рекомбинациям, демаркирующим с обеих сторон его границы. В принципе, в ГКГС больше трех областей, о чем будет сказано ниже. Каждая область делится на локусы, которые включают в себя множественные аллели определенной системы.
Область, контролирующая антигены [ класса включаютв себя локусы, контролирующие трансплантационные антигены А, В и С. Эти антигены представлены на поверхности всех ядросодержащих клеток, возможно, за отдельным исключением. В этой же области у человека имеются локусы Е, Е и С, а также псевдогены. Продукты этих генов играют роль во взаимодействии матери и
плода и возможно, принимают участие в иммунном ответе в системе "мать-плод". Показана экспрессия HLA-G на оболочках плода, но не в плаценте. У крупного рогатого скота эти гены еще не выявлены.
Антигены класса I представляют собой трансмемранные гликопротеиды. Функция классических антигенов | класса (A,B,C) состоит в представлении чужеродных антигенов на поверхности клеток, после внутриклеточного процессинга цитотоксическими Т-клетками (несущими фактор дифференцировки CD8). Клетки, инфицированные вирусом или токсином, или опухолевые клетки представляют на своей поверхности чужеродные антигены цитотоксическим Т-клеткам, обеспечивая таким образом цитотоксическую реакцию. Цитотоксические Т-клетки узнают инфицированные клетки только при представлении деградированных белков вируса в ассоциации с соответствующими молекулами класса | Ha поверхности клетки, что получило название рестрикции гистосовместимости. При этом каждый антиген имеет сродство к определенным антигенным детерминантам вирусных или бактериальных белков.
Область, детерминирующая продукты П класса охватывает локусы ОР, ОМ, ОО, ОО, и ОБ, большинство из которых являются сложными локусами, в которых имеется по два неаллельных гена. В настоящее время именно эта область изучается наиболее интенсивно. Каждый из этих локусов кодирует свои тяжелые L- цепи и легкие В-цепи, образующие гетеродимер. Гетеродимер функционально связан с цепью Ir, кодируемой за пределами ГКГС на другой хромосоме.
Молекулы класса П представляют собой гликопротеиды на поверхности антиген-представляющих клеток иммунной системы, функция которых состоит в том, чтобы представить чужеродные белки Т-клеткам, которые затем стимулируют гуморальный специфический иммунный ответ. Чужеродные антигены, связанные молекулами ГКГС класса П представляются соответствующим популяциям Т-клеток, экспрессирующих маркер дифференцировки — неполиморфный мембранный гликопротеид CD4, имеющий четыре внеклеточных домена. В геноме крупного рогатого скота имеются гены DQ, DR, ООВ и ДМА, однако эта об-
ласть у данного вида животных изучена еще очень слабои в ближайшие годы возможно обнаружение других участков.
Участок генов класса Ш у человека расположен между областями, кодирующими продукты классов Г и П (в центральной части ГКГС). Среди локусов класса Ш имеются гены, кодирующие компоненты комплимента С2, С4, фактор В, белков теплового шока НР$701 и HPS702, факторы некроза опухолей TNFa и TNFb и другие.
У крупного рогатого скота структура ГКГС несколько отличается от таковой у человека. Самое важное отличие заключается в том, что локусы кодирующие продукты[ класса расположены в центре комплекса, а гены, кодирующие антигены II класса разделены по двум областям.
Полиморфизм BoLA
До недавнего времени в классе I был изучен полиморфизм только системы ВоГА-А у различных пород и внутрипородных групп скота. Описаны различия в распространении этих антигенов в разных стадах. Результаты иммунохимического анализа молекул ВоГ.А-А показали их гетерогенность: присутствие двух типов молекул с молекулярным весом около 37КО и 42KD. (A.Bensaid et al, 1988). Методом изоэлектрофокусирования представлены доказательства экспрессии двух генов классаI (I.Joosten et al, 1992). Типирование антигенов BoLA класса I осуществляется клональными антителами; разработан метод типирования на основе ПДРФ (полиморфизма длин рестриктных фрагментов). Проведена первая международная стандартизация антисывороток для типирования антигенов BoLA.
При изучении уровня полиморфизма антигенов класса [ серологически и методом изоэлектрофокусирования установлено, что антигены, выявленные при изоэлектрофокусировании, коррелировали с серологическими вариантами. В некоторых случаях изоэлектрофокусированием выявлены новые антигены, еще не определенные серологически. Результаты ПДРФ-анализа более сложно поддаются сравнению с названными выше методами анализа. Показано присутствие фрагментов, которые коррелируют как с
