Цифровые данные таблицы 77 показывают, что озонированное подсолнечное рафинированное масло при хранении в условиях бытового холодильника (4°С) в течение одного года сохраняет высокую антимикробную активность по отношению к полевым штаммам золотистого стафилококка в разведении от 107до 107.
Таким образом, можно сделать вывод о том, что оптимальными условиями хранения для озонированного подсолнечного рафинированого масла является температура 4°С. При этом режиме хранения его антимикробные свойства остаются стабильными в течение 12 месяцев.
Фармако-токсикологическая оценка озонированного подсолнечного рафинированного масла.
Величину острой токсичности озонированного подсолнечного рафинированного масла оценивали на белых мышах. Для этого готовили ряд последовательных разведений, выполненных с шагом 10. В качестве растворителя использовали глицерин. Для обеспечения ПОЛНОТЫ перемешивания каждое разведение эмульгировали с помощью ультразвукового дезинтегратора. Полученные таким образом пробы вводили группам мышей внутрибрюшинно в объёме по 0,5 мл каждой. При этом максимальная из введённых доз ОПРМ составила 5x10".
За время последующего 7-суточного наблюдения гибели животных и каких-либо проявлений интоксикации (изменение поведенческих реакций, двигательной активности, снижение массы тела) не было зарегистрировано. Для оценки хронической токсичности ОПРМ в расчётных терапевтических дозах вводили внутрибрюшинно группам мышей и морских свинок ежедневно в течение месяца. Расчёт лечебной дозы ОПРМ для каждого вида животных проводили с учётом коэффициента отношения массы и площади поверхности тела животного. Для белых мышей расчётная лечебная доза составила 4,8x10° мл, а для морских свинок эта доза равнялась 1,9x 107 MII.
Наблюдения за животными осуществляли в течение всего периода введения ОПРМ, а также на протяжении 7-ми суток от момента последней инъекции. За время наблюдения гибели животных и каких-либо проявлений интоксикации не было зарегистрировано.
При изучении патоморфологической картины у животных, усыплённых через сутки после последнего введения озонированного подсолнечного рафинированного масла и по окончании срока наблюдения, признаков дистрофии и воспаления внутренних органов выявлено не было.
Для характеристики местного действия ОПРМ вводили группе морских свинок внутримышечно, во внутреннюю поверхность бедра ежедневно, в течение 5-ти суток, в количестве одной расчётной дозы (1,9x107 мл).
Наблюдение за животными осуществляли в течение всего времени эксперимента и на протяжении 7-ми суток с момента последней инъекции. За это время ограничений подвижности конечностей, признаков воспаления, увеличения регионарных (паховых) лимфоузлов установлено не было.
Через сутки после последнего введения и по окончании срока наблюдения часть животных усыпляли эфирным наркозом для оценки гистологической картины. При микроскопическом исследовании кусочков мышц из места введения препарата выявлены многочисленные геморрагии по ходу уколов (следствие механической травмы). Структура мышечной ткани не нарушена, скоплений лейкоцитов в межмышечном пространстве выявить не удалось.
Таким образом, в рекомендованных лечебных дозах ОПРМ нетоксичен, при этом его среднетоксическая доза более чем в 100 раз превышает разовую терапевтическую.
Оценку регенеративного действия озонированного подсолнечного рафинированного масла проводили в экспериментах на морских свинках. Для этого выбривали шерсть в области спины и под эфирным наркозом с помощью скарификатора наносили поверхностные накожные раны площадью 1 см’. Лечение животных проводили путём ежедневного двукратного смазывания раны ОПРМ вплоть до полного выздоровления. В качестве препаратов сравнения по этой же схеме на отдельных группах животных оценивались 5%-я синтомициновая эмульсия и комбинированный препарат Олазоль.
Контролем служили животные, раны которых два раза в сутки увлажняли стерильным физиологическим раствором.
В процессе наблюдения регистрировали сроки очищения раны, появления грануляционной ткани, восстановление эпителия, полного заживления раны. Результаты данного эксперимента обобщены в таблице 78.
Таблица 78 — Оценка регенеративного действия озонированного
подсолнечного рафинированного масла
| ЕЕ- Показатель живот- | очищения | нуляции, | телизации, го заживле- | ||||
|---|---|---|---|---|
| [ом [в ных | | | раны. ив сут. | [вы сут. | | мв суг. | | ния, 96 сут. | |
| Be раствор 302 | ||||
Как видно из цифрового материала таблицы 78, озонированное подсолнечное рафинированное масло по величине регенеративного эффекта несколько уступает традиционно применяемым для этих целей 5%-й синтомициновой эмульсии и Олазолю. Но вместе с тем разница во времени полного заживления ран в сравнении с синтомициновой эмульсией в среднем составляет всего одни сутки.
Возможность развития реакций гиперчувствительности немедленного типа определяли методом воспроизведения анафилаксии у морских свинок. Для этого группу из 10-ти животных сенсибилизировали путём трёхкратного, с интервалом одни сутки, введения ОПРМв количестве одной лечебной дозы (1,9x107 мл). Первая сенсибилизирующая инъекция проводилась подкожно, две последующие - внутримышечно. Через три недели животным внутримышечно вводили разрешающую дозу (1,9x10? мл) изучаемого средства, после чего наблюдали за ними в течение 45 минут. Тяжесть шокогенной реакции оценивали по следующим критериям:
А (1) - почёсывание лапами морды, взъерошивание шерсти, понижение температуры более чем на 1°С;
Б (2) - периодическое чихание, понижение температуры; В (3) - спастический кашлевой синдром, падение на бок; Г (4) -конвульсивные судороги, нарушение дыхания. Гибель в течение 5...7 минут;
Д - реакция отсутствует. Индекс синдрома в группе вычисляли по формуле Вейгла: я (Ax 1)+(Bx 2)+ (Bx 3)+ (Tx 4) ‘ А+Б+В+Г ,
где HM, - индекс синдрома.
В качестве положительного контроля использовалась группа животных, подготовленных к шоку сенсибилизацией нормальной лошадиной сывороткой, введенной по указанной схеме в дозах 0,2 мл за две недели до назначения разрешающей дозы (0,5 мл) этого средства.
В качестве отрицательного контроля разрешающая доза ОПРМ вводилась животным, которым вместо предварительных сенсибилизирующих инъекций назначался физиологический раствор. Результаты данного эксперимента приведены в таблице 79.
Гиперчувствительность замедленного типа определили по изменению массы конечности животных. Для этого группу белых мышей сенсибилизировали путём троекратного, с интервалом одни сутки, введения ОПРМ в количестве одной лечебной дозы (4,8x10°).
