© Метод подсчета лейкоцитов в молоке по Н.М. Хилькевичу.
В пробирку наливают 0,4 мл разведенной краски Гимза (1,0 мл дистиллированной воды и 5 капель краски) и 20,0 мл исследуемого секрета вымени, получают разведение 1:20. Через 15—20 мини 1 час заполняют камеру Горяева. Лейкоциты подсчитывают во всей сетке. Если их очень много, ограничиваются подсчетом в пяти рядах или в пяти больших квадратах. Для определения количества клеток в 1,0 мл подсчитывают лейкоциты в одном квадрате и результат умножают на 5000.
При окраске по методу Н.М. Хилькевича лейкоциты не разрушаются в течение суток.
Косвенные методы одновременного определения концентрации водородных ионов и количества соматических клеток в пробах секрета из чегвертей вымени.
В России для этих целей используют ряд реактивов, в составе которых присутствуют поверхностно-активные вещества (ПАВ): димастин (В.И. Мутовин, 1965), мастидин (И.И. Архангельский и Н.К. Оксамитный, 1968), маститодиагност (И.С. Загаевский, 1969), «Дон» (А.И. Ивашура и В.Ф. Гордецов, 1973), мастоприм (Н.К. Оксамитный, 1977), Воронежский маститный тест (В.А. Париков, 1975), 20%-й раствор сульфанола (А.И. Ивашура, 1983). Поверхностно-активными веществами, или детергентами, называются вещества, способные адсорбироваться на различных поверхностях и понижать вследствие этого их поверхностное натяжение.
Механизм образования же-
леобразного сгустка при добав- .
лении ПАВ к секрету вымени ры =
состоит в следующем: ПАВ, - Ps
разрушая ядра соматических At : «.
клеток, образует комплексы с их SS ae SS
белками и вытесняет ДНК, Ko- |) eee ‚
торая переходит в свободное а. ee
зованиюсостояниесгустка.и способствует обра- | | Е is :
Исследования oe a 2 ty ;
молочно-контрольных пластин- : i ati
ках (МКП-1 или МКП-2).проводят на | ьо> 4 <.fi м№A
вин) (рис.МКП-120) (авторпредставляетВ.И. Мутсоб о -й ®— — ee=
пластинку с четырьмя полушаро- Рисунок 20 — Общий вид
выми лунками, которые имеют молочно-контрольной пластинки пластинки -1
молочно-контрольной пластинки пластинки -1
72
виитрастное чёрно-белое окиишиваниеииия, соответствующиеи кольцевые углуб-объёму 1.0 и 2,5 мл.
ок- дд = Аи
объё- i
лу- №
0бо- №
эти № |
соот- |№№ ет os) esseSi)
из я
\
к
||| Ель |
полу- №», i
Между одной парой лунок сделано отверстие для 0боишчения того, чтобы в эти всгствующихуники попало четвертеймолоко из выме-соот|№№ ии При сдаивании секрета из я люмочной железы МКП держат \ и'верстием по направлению к пмовешем быстрокоровы,позволяетчто в дальней- опреде||| ть, из какой четверти полу-
МКГП-2 (автор B.A. ПариРисунок 21 — Молочно-контрольная ков) (рис. 21) отличается пластинка-2 большим размером лунок цииидрической формы с калиброванным центральным углублением на 1,0 мл и наличием двух щелей между лунками для одновременного слива изиника молока (более 1,0 мл) путём наклона пластинки под углом 60-65°. При использовании МКП-1 молоко с реактивом смешивают при помощи
r= деревянной или стеклян-
`@ \i ботеной палочки,с МКП-2а смешива-при ра-
N ние веществ осуществ-
== й и ляют путём горизон-
| Е, и «А, тальных круговых вра-
8 т Е! Va rH щений пластинки без
ae Jy | В использования палочки,
(Gy аа f= NMprs ) что сокращает в 3 раза
о CYweBR 1{C)a 5A Pe][Е| =Е!| чи 4iMe тата.акциивремяВHaикачественапроведениеучёг ёмкостирезуль-pe-
—^ = для реактивов использу-
Рисунок 22 22 - Комплект для диагностики Комплект для диагностики для диагностики диагностики у Улеклянные флаконы,
мастита ¢ МКП-2 ¢ МКП-2 МКП-2 и шприцом шприцом полуавтоматом совмещенные с автома-
Шилова (по Н.И. Полянцеву) Томаюлювиком:
Рисунок 22 22 - Комплект для диагностики Комплект для диагностики для диагностики диагностики мастита ¢ МКП-2 ¢ МКП-2 МКП-2 и шприцом шприцом полуавтоматом Шилова (по Н.И. Полянцеву)
BEES wage | Значительно сократить затраты
вel ee 0 времени и физических усилий иссле-
TES 8 Bee aS дований можно на основе примене-
я >. Se ния для этой цели шприца-
- oo — полуавтомата Шилова (рис. 22) или
: в _ ° устройства, разработанного В.А. Па-
i | Soo Ae _ риковым, В.И. Слободяником и др. в
> о 2 нашей модификации, предназначен-
ойa Ssws HOOактивадля воодномоментнойвсе лунки подачимолочно-ре-
Ss Контрольной пластинки (рис. 23).
: Е При проведении диагностиче-
п Te ских исследований из каждой четвер-
г с ти вымени вымени в соответствующую лунку лунку
НИ ии — Молочно-контрольной Молочно-контрольной пластинки на-
Е При проведении диагностичеп Te ских исследований из каждой четверс ти вымени вымени в соответствующую лунку лунку ии — Молочно-контрольной Молочно-контрольной пластинки надаивают 1,0 мл секрета (рис. 24) и смешивают с 1,0 мл одного из быстВнешний вид вид рых маститных тестов (2%-й раствор МКП-2 мастидина, 2%-й раствор мастотеста
Рисунок 23 — Внешний вид вид рых маститных тестов (2%-й раствор устройства с МКП-2 мастидина, 2%-й раствор мастотеста Воронежского, 5%-й раствор димастина (рис.25), 2,5%-й раствор сульфанола, и др.).
® Проба с 2%-м раствором мастидина. раствора мастидина к 100,0 . мл стандартного 10%-го рас- = твора данного реактива добавляютрованной 400,0или кипячёноймл дистилли-во* в ды. Реакцию учитывают че8 рез 15-20 секунд по образованию желеобразного сгустка и изменению цвета смеси. Учёт реакции no вязкости желе: а) отрицательная реакция — однородная жидкость или 4 следы образования желе (+); ds
мастидина. Для приготовления 2%-го
. 4
Г. &
\
* в 4|
8 ‘gk ем ‹
os)
:
= at
ре
ay
4 twp.
ds am ‚м
м. >
6) сомнительная реакция — слабое желе (++), которое ещё нельзя выбросить палочкой из лунки пластинки;
Рисунок 24 — Сдаивание секрета из левой передней доли вымени в соответствующую лунку МКИ-2
