В лунки МКП-1 вносят 1,0 мл тщательно перемешанного секрета и добавляют к нему 1,0 мл 2,5%-го раствора мастоприма. Секрет с реактивом перемешивают в течение 10-15 секунд. Смесь из пластинки неоднократно поднимают палочкой вверх на 5-7 см, после чего в течение не более 60 секунд проводят оценку результатов.
При отрицательной реакции жидкость однородная, желе не образуется. Такое молоко не имеет примеси анормального, или примесь его составляет не более 3%.
Положительная реакция — образуется желеобразный сгусток, степень которого оценивается в крестах.
Один крест (+) — слабое желе, смесь секрета с реактивом тянется за палочкой в виде нити, на дне уже заметна небольшая выемка. Такой секрет содержит в среднем 4-6% анормального молока и до 500 тыс./мл СК.
Два креста (++) — более выраженный желеобразный сгусток при перемешивании которого хорошо видна выемка, но желе из луночки ещё не удаётся выбросить. Такой секрет содержит в среднем 8-12% анормального молока и от 500 тыс./мл до 1 млн./мл СК.
Три креста (+++) — хорошо сформированный желеобразный сгусток, который легко можно выбросить палочкой из луночки пластинки. Такой секрет содержит выше 15% анормального молока и свыше 1 млн./мл СК.
® Проба с универсальным индикатором мастита «Дон-1». Для диагностики субклинического мастита в период лактации по молоку из удоя коровы используют «Дон-1» в разведении дистиллированной или прокипячённой водой в 1,4 раза. Оценка результатов по степени гелеобразования.
С целью сокращения затрат труда и времени на диагностику скрытого мастита рекомендуется данную работу проводить в два этапа (М.П. Рязанский, 1982; и др.). На первом этапе во время проведения контрольной дойки среднюю пробу молока из суточного удоя каждой коровы на МКПв объёме 1,0 мл смешивают с 1,0 мл 10%-го раствора мастидина и через 15-20 секунд учитывают тест-реакцию по гелеобразованию и изменению цвета смеси:
-
отрицательная реакция — отсутствие желе или его следы, цвет смеси светло-сиреневый, дымчатый;
-
сомнительная реакция — слабое желе, которое нельзя выбросить из лунки, цвет смеси тёмно-сиреневый:
-
положительная реакция — хорошо сформированный сгусток, который наполовину или целиком выбрасывае тся из лунки пластины при перемешивании, цвет смеси при этом становится фиолетовым.
На втором этапе подвергают индивидуальному исследованию коров, у которых была установлена положительная реакция средней пробы молока 80
a
и; суточного удоя с диагностикумом. Для этого после окончания очередно10 доения из каждой четверти вымени секрет в количестве 1,0 мл сдаивают и соответствующую лунку МКП и смешивают с равным количеством реа'сига. В качестве реагента используют 2%-й раствор мастидина, 5%-й рас'вор димастина, 2%-й раствор мастотеста Воронежского, 2,5%-й раствор масгоприма, 4%-й раствор едкого натрия. Учёт реакции проводят согласно шкале оценки показаний диагностических тестов (таблица 8) (Н.И. Полянier, А.Н. Синявин, 1989).
Таблица 8 - Шкала оценки показаний диагностических тестов
| Тест a мы с | раствором | Тестс раствором = | мастидина | Результат | Кол-во | сомати- |
|---|---|---|---|---|---|
| образование = сгустка | leer | Образование сгустка | Цвет | исследо- вания | | ческих THONG клеток |
| Отсутствует У или у следы | Оранже- polite вый | Отсутствует или следы a | Светло- сирене- uP вый, сире- | т м тельный () | 0-200 |
| д т CrycToK сла- а | От крас- P HO- | Сгусток сла- Ро = оый, его нельзя | невый От сире- р невого до | Сомни- | |
| ObIH, его нельзя у | оранже- | | удалить палоч- | тёмно- 7 | тельный РА | | 200-500 |
| далить палоч- гы | вого до | кой = из лунки | сиренево- | (+) | |
| KOH из лунки | красного | го | |||
| Сгусток У в виде 4 ослка куриного | Сгусток У в виде 7 белка куриного | Or тёмно- Е | Слабо лад _ | ||
| яйца, струдом | У даляется из лунки я | Красный | | яйца, с трудом даляется из У лунки | ло иолето вого | pele Ge peng (++) | catle EW |
| Сгусток i xopo- р | От крас- | Сгусток хоро- шо формир сформиро- | Тёмно- = | ||
| шо сформиро- ван, наполови- | ного до | ван (от уме- ренного до | сирене- ь | Положи- тельный м | 800- |
| пу удаляется из | малино- | плотного). На- | вый, фио- = | (+++) | 5000 |
| вого | летовый | ||||
| лунки | половину уда- ляется из лунки | ||||
| Сгусток ный, rl легко плот- уда- ляется из лунки | Малино- м | вый | ный, Сгусток i легко плот- уда- | ляется из лунки | Фиолето- р. вый | Ярко по- ложи- Г тельный (++++) | Свыше 5000 |
® Вискозиметрический метод. Для вычисления количества СК используют прибор ВМЛК-1 (вискозиметр молока лабораторный капиллярный), «Соматос» и др. Метод основан на взаимодействии препарата мастоприм с соматическими клетками секрета, в результате чего изменяется его консистенция. По продолжительности истечения смеси через капилляр прибора с помощью данных таблицы 9 определяют количество СКв секрете.
Таблица 9 - Корреляция между временем истечения смеси
и количеством соматических клеток в секрете выменни у коров
| истечения смеси. с | секрета, тыс. |
|---|---|
| | | |
| 25,1-31,0 | 501-750 |
| 31,1-37,0 | |
| 37,1-46,0 | 1001-1250 |
| = 461-580 | Ш 1251-1500_ — | |
При проведении анализа в сосуд для приготовления смеси наливают 5,0 мл 3,5%-го раствора мастоприма и 10,0 мл исследуемого секрета, тщательно перемешанного, профильтрованного через четыре слоя марли. После включения прибора смесь перемешивается в течение 30 секунд. С момента окончания перемешивания открывается капилляр, начинается истечение смеси молока с раствором мастоприма и одновременно включается таймер, который показывает продолжительность истечения жидкости в секундах. Зафиксировав время истечения смеси, сосуд следует 2-3 раза промыть дистиллированной водой и 4-5 раз продуть резиновой грушей. После очистки сосуда прибор считается подготовленным для дальнейших исследований.
Во время исследования температура секрета и воздуха в помещении, где проводится работа, должна быть 10-30°C. Кислотность секрета должна находиться в пределах 16-21°Т. При этом пробу секрета исследуют в течение 2-х часов с момента его получения.
Для приготовления 3,5%-го раствора мастоприма вносят 3,5 г препарата в колбу и доливают 96,5 мл дистиллированной воды, подогретой до 30-36°С. Раствор перемешивают до равномерного распределения осадка и хранят в течение суток при температуре 10-30°С.
От животных, у которых сборное молоко сомнительно и положительно прореагировало с одним из указанных выше реактивов, получают секрет
