® Вискозиметрический метод. Для вычисления количества СК используют прибор ВМЛК-1 (вискозиметр молока лабораторный капиллярный), «Соматос» и др. Метод основан на взаимодействии препарата мастоприм с соматическими клетками секрета, в результате чего изменяется его консистенция. По продолжительности истечения смеси через капилляр прибора с помощью данных таблицы 9 определяют количество СКв секрете.
Таблица 9 - Корреляция между временем истечения смеси
и количеством соматических клеток в секрете выменни у коров
| истечения смеси. с | секрета, тыс. |
|---|---|
| | | |
| 25,1-31,0 | 501-750 |
| 31,1-37,0 | |
| 37,1-46,0 | 1001-1250 |
| = 461-580 | Ш 1251-1500_ — | |
При проведении анализа в сосуд для приготовления смеси наливают 5,0 мл 3,5%-го раствора мастоприма и 10,0 мл исследуемого секрета, тщательно перемешанного, профильтрованного через четыре слоя марли. После включения прибора смесь перемешивается в течение 30 секунд. С момента окончания перемешивания открывается капилляр, начинается истечение смеси молока с раствором мастоприма и одновременно включается таймер, который показывает продолжительность истечения жидкости в секундах. Зафиксировав время истечения смеси, сосуд следует 2-3 раза промыть дистиллированной водой и 4-5 раз продуть резиновой грушей. После очистки сосуда прибор считается подготовленным для дальнейших исследований.
Во время исследования температура секрета и воздуха в помещении, где проводится работа, должна быть 10-30°C. Кислотность секрета должна находиться в пределах 16-21°Т. При этом пробу секрета исследуют в течение 2-х часов с момента его получения.
Для приготовления 3,5%-го раствора мастоприма вносят 3,5 г препарата в колбу и доливают 96,5 мл дистиллированной воды, подогретой до 30-36°С. Раствор перемешивают до равномерного распределения осадка и хранят в течение суток при температуре 10-30°С.
От животных, у которых сборное молоко сомнительно и положительно прореагировало с одним из указанных выше реактивов, получают секрет
из каждой четверти молочной железы на МКП и подвергают его исследованию с реактивами, принятыми для определения косвенного количества СК секрете из долей вымени.
Следует отметить, что показания быстрых диагностических тестов с мобым из перечисленных реактивов не имеют самостоятельного значения для постановки окончательного диагноза на субклинический мастит и потому они в обязательном порядке должны подтверждаться прямым подсчётом количества соматических клеток или пробой отстаивания, центрифугирования, бактериологическими исследованиями.
Проба отстаивания.
Сущность метода заключается в том, что при мастите белки молока, нтителиальные клетки слизистых оболочек вымени, микробные и соматические клетки в силу своей тяжести оседают на дно ёмкости и образуют видимый осадок. Пробу отстаивания проводят путём отбора молока из четвертей вымени, которые реагировали сомнительно и положительно с одним из реактивов, содержащих ПАВ.
Проведение пробы. В конце доения (не позднее 2 часов от момента окончания доения) в пробирку надаивают 10-15 мл секрета и ставят на 16-18 часов в холодильник при температуре 4-8° С или другое прохладное место, чтобы избежать прокисания секрета. Пробу просматривают при шевном свете и обращают внимание на наличие осадка, высоту слоя слиNOK, их внешний вид и цвет секрета. Реакцию считают положительной при наличии осадка на дне пробирки высотой 0,1 см и более, а также при появнении осадка до 0,1 см с одновременным изменением цвета секрета и характера сливок (слизистые, хлопьевидные, тягучие).
Проба центрифугирования по Тромсдорфу.
В градуированную пробирку вносят 10-15 мл молока и центрифугируют в течение 10-15-ти минут при 2-3 тыс. об./мин. Анализ результатов аналогичен оценке результатов пробы отстаивания.
Проба центрифугирования по А.И. Варганову и др.
В бактериологическую пробирку вносят 10-15 мл молока и центрифугируют при 1,5 тыс. об./мин в течение 3-х минут. Оценка результатов исследования идентична случаю с пробой отстаивания. По мнению авторов, результаты пробы центрифугирования полностью совпадают с результатами пробы отстаивания секрета (табл. 10).
Основное преимущество предлагаемой пробы заключается в операгивном получении результатов исследования и в значительном сокращении затрат времени на её проведение.
Таблица 10 - Сравнительная оценка чувствительности пробы отстаивания и центрифугирования (И.Г. Конопельцев, 1994)
| Исследовано | Из них | реагировали | — | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| отстаи- вания | 1755 | | i 7020 | 101 | | i 5,7 | | 103 | | 1,5 | | | | el 1654 | 94,3 | 6917 | | [Pe 98,5 |
| Проба фугиро- етРи- вания _ | | 1755 | 101 | | 5,7 | | | 103 | 1,5 tL | | | 1654 | 6917 | | | 98,5 | | |
БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ CEKPETA ВЫМЕНИ
Определение концентрации водородных ионов с помощью простых индикаторов и приборов.
Реакция рН свежевыдоенного молока обычно бывает слабокислой и находится в пределах от 6,5 до 6,7. Изменения концентрации водородных ионов может происходить как при физиологической перестройке функции молочной железы (лактация, сухостой), так и при воспалении тканей этого органа. Повышение рН более 6,8 является ориентирующим признаком при постановке диагноза на мастит. Для определения кислотности молока наиболее доступными являются простые индикаторы.
® Проба с бромкреозолблау. В пробирку наливают 3 мл молока и добавляют 4 капли спиртового раствора 1:300 бромкреозолблау. При встряхивании пробирки анализ результатов: отрицательная — светло-лазурный цвет, сомнительная - голубой, положительная - фиолетовый.
® Проба с бромкрезолпурпуролом. К 3-5 мл молока добавляют 0,2 мл 0,5%-го водного раствора бромкрезолпурпурола и встряхивают. Анализ результатов: положительная — от светло-пурпурного до пурпурно-фиолетового окрашивания, отрицательная — серый цвет.
® Проба с фенолротом. В лунки МКП вносят 3 капли исследуемого молока, добавляют в него 5 капель 0,1%-го спиртового раствора щёлочно-
84
