Определение лактозы.
Определение лактозы в молоке является ценным диагиостическим тестом при выявлении субклинического мастита, так как ири воспалении вымени молочный сахар претерпевает существенное изменение. В норме содержание молочного сахара в молоке коров находится в пределах 4-5,2 %. При мастите его содержание снижается на 1,5 %. Содержание лактозы до 3,5 % и ниже наблюдается исключительно при субклиническом воспалении вымени. В результате значительного снижения количества лактозы в молоке уменышается и общее количество сухих веществ, особенно сухого обезжиренного остатка (СОМО). Содержание лактозы в молоке определяют в основном рефрактометрическим способом.
Методика определения. В пробирку наливают 5,0 мл молока и 5-6 капель 4 %-го раствора хлористого кальция, закрывают пробкой и помещают на водяную баню с температурой кипения на 10 мин, затем пробирку охлаждают до 15°C, сыворотку фильтруют и каплю наносят на нижнюю призму рефрактометра, определяют коэффициент преломления света сывороткой молока. Установив коэффициент преломления, определяют содержание лактозы по таблице 13.
Таблица 13- Массовая доля лактозы в молоке коров
| Коэффици- CHT прелом- ления | | Массовая | доля лак- тозы, % | Коэффи- вн MPENOM- ления | Массовая AONA | лактозы, % | | Коэффи- ed ПРеЛОМ- ления | —_ ава aoe лактозы, Zo ДИ |
|---|---|---|---|---|---|
| 3,01 | 4,59 | ||||
| 1,3392 _ | 3.06 311 | | | 1,3408 1,3407 | 4,64 4.69 | | ||
| 1,3393 | 3.16 | 1,3409 | | 3,93 | _ 1,3425 | 4,74 |
| 3,21 | 13410 | ||||
| 1,3395_ | 3,98 | 1,3426 | 419 4,84 | | ||
| 1,3396 | 1,3412 | 4,08 | 4,89 | | ||
| 1,3398 | 13413 _ | 4,13 | 1,3429 | 4.95 | | |
| 3,42 | _1,3430 | 5,00 | |||
| 3,47 | 1,3431 | 5.5 | |||
| 510 | |||||
| 1,3401 | 515 | ||||
| 3,62 | 1.3418 | | 4.38 | 5,20 | ||
| 5,30 | |||||
| 5,35 |
|.К. Оксамитный (1982) предложил для диагностики субклинического яымстита ускоренный химический метод определения лактозы в секрете вымеии с помощью препарата ЛУМ.
Определение каталазы.
Каталаза — фермент группы оксидоредуктаз. В молоко каталаза вы\ ыстся секреторными клетками молочной железы (нативная каталаза), кроме гого она вырабатывается микрофлорой молока и лейкоцитами (ка‘и шза микробного происхождения). Количество каталазы выражается ваньлазным числом. Каталазное число — это количество (мл) молекулярного кислорода, которое выделилось в течение 2-х часов из 15,0 мл моona при добавлении 5,0 мл 1%-го раствора перекиси водорода. В молокс гюровых животных количество каталазы незначительно и не превыишаст 2,5-3,0 мл. Молоко коров, больных маститом, имеет значительно ириесс высокое каталазное число. Однако следует иметь в виду, что поиышение каталазного числа наблюдается в летне-осенний период времени года, в молоке новотельных коров, в молозиве (до 8-15 мл) и в старо\онном молоке (6-8 мл). Каталазную пробу в основном используют в качестве дополнительного метода при шагностике субклинического мастита. re методаМетодиказаключаетсяопределения.в том, чтоСущностьперекись ана, ВЕко водорода легко расщепляется под влиянам ue нием каталазы с образованием воды и НЗ |. i я молекулярноговыделившегося кислорода.кислорода можноПо количествусделать i } : | Иlis пывод относительно количества каталазы С aia п молоке. В каталазник Функе (рис. 29) HE? que вносят 15,0 мл исследуемого молока, поbe * i yt lorpeToro до температуры 25°C и 5,0 мл | > | PL sg псремешивания1-го раствора перекисикаталазник водорода.помещаютПослев ivay я ihtH$| коляную баню при температуре 25°C так, Е"; | |. th чтобы OH был погружен до пробки. Через Ил 1 } ? часа каталазиик вынимают и определяВЕ 5 ют уровень оставшейся смеси. Разность А 5 уровней соответствует объёму выделивРисгнок 29- Каталазники и:сгося кислорода, что и называют катаФуике (А), Лобека (Б) азным числом.
ДИАГНОСТИКА СУБКЛИНИЧЕСКОГО МАСТИТА У НЕТЕЛЕЙИ КОРОВ В ПЕРИОД ЗАПУСКА И СУХОСТОЯ
В последний день запуска всех коров исследуют клиническими методами. При отсутствии клинических признаков болезни подвергают исследованию секрет из каждой доли вымени по быстрому маститному тесту и пробой отстаивания. Контроль за состоянием вымени нетелей осуществляют на 8-м или 9-м месяцах стельности. У здоровых нетелей секрет вымени не имеет отличий от такового у коров.
В сухостойный период вымя у коров дважды подвергают исследованию. Первый раз через 10-15 дней от начала сухостойного периода, второй за 10-15 дней до отёла при переводе животных в родильное отделение.
Субклинический мастит в период сухостоя диагностируют посредством выдаивания секрета из каждой четверти вымени в соответствующие лунки молочно-контрольной пластинки с последующим добавлением одного из реактивов (2%-й мастидин, 2%-й мастотест Воронежский, 5%-й димастин, 2%-й сульфанол). Густоватый секрет с реактивом перемешивают палочкой. О наличии скрытого мастита свидетельствует образование сгустка.
Таблица 14 - Количество соматических клеток в секрете вымепи у здоровых и больных субклиническим маститом коров
| Число соматических | - клеток, тыс./мл | |
|---|---|---|
| Срок исследования | Здоровые | Больные |
| 3-й день сухостоя | 1240,0 + 34,2 | 2624.0 + 99,8 |
| 5-й день сухостоя_ | 1778,1 +36,0 | 3312,5 + 141,4 |
| 10-й день сухостоя | 2209,5 + 58,8 | 5012,0 + 90,3 |
| __ | | | |
| 20-й день сухостоя | 2866,2 + 33,8 | 5535,1 + 153,8 |
| _—_ 30-Й день сухостоя | —_ 3554,0 + 50,0 = | 7261,9 + 225,1 |
| | 40-й день сухостоя | 3035,64 43,8 | 6254,3 + 102,1 | |
| 55-й день сухостоя | 2368,9+ 79,6 | 5160,3 + 216,5 | |
| _ 1-2 дня до отёла | | 1240,8 + 22,2 _ | 2258,5 + 62,5 | |
| Bo время родов | 1139.6 + 26,1 | 2585,9 + 128,6 | |
| 6 ч после отёла | 993,8 + 35,7 | 2476,2 + 93,4 | |
| 12 ч после отёла | 602.2+119 __ | 1300,9 + 44,2 |
| 24 ч после отёла | 407,6 + 28,7___ | 1693,8 + 148,0 | |
