Руководство по получению и трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота

молоке не менее 3,8%, белка 3,2%. Телки должны иметь хороший экстерьер, отличную родословную, продуктивность матери за наивысшую лактацию - не менее 9000 кг, содержание жира 3,9%, белка 3,3%;

• выдающиеся особи аборигенных или генофондных пород животных.

В основе отбора доноров должны учитываться не только показатели продуктивности, но и комплекс селекционных признаков, легкость отелов, жизнеспособность приплода, продуктивное долголетие и др., что особенно важно для получения от этих животных высокоценных быков-улучшателей.

При одинаковой продуктивности предпочтение отдается коровам с более высоким содержанием жира в молоке, а также коровам с длительным сроком использования, имеющим высокопродуктивных дочерей или положительно оцененных по качеству потомства сыновей.

На молочных комплексах и фермах с промышленной технологией производства отдают предпочтение животным, прошедшим не менее трех лактаций, сохранившим хорошие воспроизводительные функции и устойчивость к технологическим стрессам.

Предпочтительный возраст донора - 3-6 лактации. Коров с высоким удоем целесообразно использовать через 2-3 месяца после отела при наличии у коров не менее 2-х физиологических эстральных циклов.

В выборе донора принимают участие ветеринарные специалисты хозяйства. На каждое животное оформляют ветеринарный паспорт с указанием клинического состояния здоровья, благополучию по бруцеллезу, туберкулезу, вирусным респираторным заболеваниям, лейкозу, трихомонозу, вибриозу, ящуру и другим возбудителям заболеваний, заражающих эмбрионы. В ветеринарном паспорте указывают дату проведения последних диагностических исследований и обработок.

Корова-донор при последнем отеле не должна иметь осложнений (трудные отелы, задержание последа, послеродовые заболевания половых органов).

Состояние половых органов контролирует ветеринарный специалист методом ректального исследования на 5-7-й и 15-20 дни после отела и последующих наблюдений в течение полутора-двух половых циклов.

Коровы с нарушенным половым циклом, гинекологически нездоровые, к использованию в качестве доноров непригодны.

При отборе и подборе коров-доноров для получения эмбрионов методом in vivo необходимо учитывать индивидуальные особенности суперовуляции, и первоначальное количество отобранных коров-доноров должно превышать потребность в них в 2-3 раза. Отбор коров-доноров производится непосредственно в хозяйствах (на фермах). Окончательный отбор проводят после установления реакции коров на введение гонадотропных препаратов для

индукции суперовуляции. При отсутствии реакции на гормональную обработку корову в группу доноров не переводят. Коров, прошедших разовую гормональную обработку и давших биологически полноценных эмбрионов, не менее 4-х за первую операцию, переводят в группу коров-доноров и составляют об этом акт (см. приложения).

3.3.Индукция суперовуляции

Проведение процедуры индукции суперовуляции у самок животных включает в себя введение гонадотропных гормонов, обладающих действием стимуляции роста (развития) антральных фолликулов яичника. В практике получения эмбрионов для проведения процедуры индукции суперовуляции используют препараты, содержащие следующие виды гонадотропинов:

• 1) Сывороточные гонадотропины – гонадотропин сыворотки жеребых кобыл (ГСЖК, eCG);

• 2) Гипофизарные гонадотропины – фолликулостимулирующий гормон (ФСГ, FSH);

• 3) Рекомбинантный ФСГ – полученный рекомбинантным методом (Рек-ФСГ, R-FSH).

Наиболее используемыми на практике по эффективности индукции суперовуляции являются препараты, содержащие гонадотропины гипофизарного происхождения. В настоящее время получают ФСГ и ЛГ (лютеинизирующий гормон) из гипофиза животных (свиней, овец) или рекомбинантным способом. В отличие от гонадотропных препаратов, полученных, например, из сыворотки крови жеребых кобыл, гипофизарные гонадотропины имеют короткий период полураспада, не нарушают воспроизводительную функцию животного после проведения процедуры индукции суперовуляции, сохраняют чувствительность яичников к вводимым гонадотропинам, не вызывают аллергических реакций.

Для полноценной реализации реакции и достижения успеха при проведении индукции суперовуляции в организме животного, помимо постоянного уровня ФСГ, необходимо одномоментное присутствие ЛГ. ФСГ вызывает и стимулирует рост и созревание фолликулов в яичниках, а ЛГ инициирует, в последующем, их овуляцию. Соотношение ФСГ/ЛГ имеет большое значение для получения хороших результатов индукции суперовуляции. При этом, диапазоном их соотношений, необходимых для оптимальной реакции суперовуляции у млекопитающих, является соотношение ФСГ/ЛГ, которое составляет 1/0,001-1/1 и используется при производстве коммерческих препаратов.

При проведении индукции суперовуляции общепринятым является 8-10кратное введение в лютеальную фазу полового цикла коровам- и телкам-

донорам препаратов, содержащих ФСГ и ЛГ, каждые 12 часов в течение 4-5 дней в общей дозе 30-50 единиц Арморовского стандарта (Арм.ед.) или 7001000 междунароных единц (МЕ) и с последующим введением простагландина F2α через 48 часов после первой инъекции ФСГ.

Для оптимизации процедуры индукции суперовуляции препаратами, содержащими гипофизарный ФСГ, разрешено их применение в виде однократной инъекции композиции полной дозы препарата (30-50 Арм.ед. или 700-1000 МЕ) с пролонгатором – полиэтиленгликоль (ПЭГ) и последующее через 48 часов после инъекции этой композиции (препарат ФСГ+ПЭГ) введение препарата простагландина F2α. Для снижения вариативности ответной реакции, повышения результативности индукции суперовуляции и выхода пригодных к использованию в репродукции эмбрионов допустима обработка доноров биологически активными препаратами (витамины, стимуляторы, пептиды). Повторную процедуру индукции суперовуляции у доноров эмбрионов проводят по прошествии как минимум одного полового цикла.

Для индукции суперовуляции применяют различные схемы гормональной обработки. Наиболее используемыми являются следующие схемы:

Схема 1

Индукция суперовуляции с применением

сывороточного гонадотропина (ГСЖК)

Схема 2

Индукция суперовуляции с применением

гипофизарного гонадотропина (ФСГ)