твором - в запасное гнездо. Кюветы ставят на расстояний, наиболее удаленном от фотоэлемента.
Установив кюветы, закрывают крышки прибора и включают гальванометр рукояткой сначала на грубую чувствительность в положение «1», рукояткой нейтральных клиньев подводят стрелку гальванометра к «О», затем включают гальванометр на высокую чувствительность путем перевода рукоятки в положение «2» и точно устанавливают стрелку на «О».
После этого вынимают кювету со спермой из правого гнезда и ставят вместо нее кювету с раствором лимоннокислого натрия. Стрелка гальванометра при этом отклоняется и ее ставят на «О». Отчет плотности берут по красной шкале левого барабана. Каждые 0,05 деления шкалы соответствуют концентрации спермиев и обозначаются на градуированной кривой.
Предварительно необходимо построить. калибровочную кривую, изображающую зависимость оптической плотности от концентрации спермиев.
Из отобранных эякулятов путем разбавления их 3,5 %-ным раствором лимоннокислого натрия 1:1,1:2, 1:3 и т.д. готовят образцы спермы и уточняют концентрацию спермиев в каждом из них в счетной камере. Определяют величину оптической плотности каждого образца на приборе ФЭК-М. Зная фактическую концентрацию спермиев, установленную в счетной камере, строят для спермы быка калибровочную кривую.
Имея калибровочную кривую, можно легко определить неизвестную концентрацию любого эякулята. Для этого нужно лишь установить его оптическую плотность на приборе и посмотреть на калибровочную кривую, которую следует ежемесячно проверять, так как показания прибора могут изменяться (стареют фотоэлементы, гальванометр, лампы накаливания и др-), • ■
Определение патологических форм спермиев. При снижении качественных показателей спермы у отдельных производителей подсчитывают патологические формы спермиев. Существует прямая связь между клиническими симптомами болезни
половых желез и наличием определенных патологических форм спермиев в эякуляте производителя.
Различные формы спермиев объединены в восемь групп: 1) нормальные; 2) гигантские и карликовые; 3) с деформацией головки; 4) с надломом у шейки; 5) свободные головки и бесхвостые спермин; 6) с закручиванием хвоста и ненормальным его искривлением; 7) спермин с каплей, утолщением и ненормальным искривлением хвоста; 8) прочие патологические формы.
В качестве конкретных причин образования патологических форм спермиев отмечают:
♦ слабо развитые семенники; ♦ поражения семенника и придатка (гигантские и карликовые спермии); ♦ длительные промежутки между коитусами, обуславливающие старение и распад спермиев в придатке (отдельные головки, изолированные хвостики);
♦ половое истощение производителя вследствие большой половой нагрузки или недостаточного и полноценного кормления (спермии с протоплазматическими капельками в области шейки, тела и хвоста - незрелые спермии). Закручивание хвостов спермиев в сторону происходит при смешивании спермы с гипотоническим раствором (неправильная подготовка разбавителей, попадание воды).
Для определения процентного соотношения нормальных и патологических спермиев свежеполученную сперму быка с целью уменьшения концентрации спермиев и удобства подсчета их в мазке необходимо разбавить 0,9 %-ным раствором хлористого натрия в 10-15 раз.
На предметное стекло наносят каплю, спермы и делают тонкий мазок шлифованным стеклом. Высушенный мазок кладут на стеклянную подставку и покрывают на 1-2 минуты спиртом, который удаляют дистиллированной водой. Можно окрашивать мазок без фиксации спиртом. Мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, на которую наливают краску и
фиксируют 2-3 минуты. Затем краску смывают дистиллированной водой и высушивают мазок на воздухе.
Подсчитывают нормальные и патологические формы спермиев. В каждом поле зрения мазка рекомендуется подсчитать не менее 500 спермиев. Для удобства используют лейкоцитарный счетчик. С помощью одной клавиши подсчитывают нормальные спермин (Н), с помощью другой клавиши - патологические (П), сумма покажет общее количество подсчитанных спермиев.
Быки, дающие сперму с содержанием более 18 % патологических спермиев, должны рассматриваться как бесплодные, а сперма не допускаться для искусственного осеменения.
В сперме так же определяют pH, физиологическую резистентность и интенсивность окислительно-восстановительных процессов по существующим методикам.
При плюсовых температурах хранения спермы производителей от каждого эякулята разбавленной спермы для биологического контроля оставляют 0,5-1 мл спермы.
Сперма допускается к разбавлению в искусственных средах при концентрации 0,7 млрд. спермиев в 1 мл.
Количество живчиков в семени. Число живчиков в семени — важный показатель оплодотворяющей способности быков. Установлено, что число живчиков в единице объема с ростом и развитием животного увеличивается незначительно. Имеются достоверные межпородные различия в концентрации семени. С увеличением возраста у быков разных пород наблюдается незначительное увеличение концентрации живчиков, а по некоторым породам этот показатель остается на одном уровне. Общее число живчиков у молодых и взрослых быков существенно не отличается, что свидетельствует об одинаковой интенсивности сперматогенеза. v
Определение концентрации сеМени отнимает значительное время у сотрудников лаборатории. Для экономии времени повсеместно используют электрические фотоколориметры, однако сопоставление данных, полученных путем подсчета живчиков в счетной камере, с данными подсчета на фотоколориметре пока-
