знана годной, ее непосредственно в спермоприемнике разбавляют 1:1 или 1:2 и после 5-10-минутной выдержки переливают в градуированный смеситель емкостью 100-200 мл, измеряют объем. Разбавитель температурой 25-30 С небольшими порциями вводят по стенке в смеситель или в колбу со спермой и смешивают после добавления каждой порции.
В зависимости от подвижности и концентрации спермиев сперму быка разбавляют в 20-50 и более раз с таким расчетом, чтобы в одной дозе разбавленной спермы для всех способов хранения перед осеменением было не менее 10 млн. спермиев с ППД 3 балла (30%).
Разбавление спермы ЛФРМГЖ-средой для замораживания в соломинках. Сухие заготовки среды вносят в стерильную колбу, добавляют необходимый объем прокипяченной дистиллированной воды температурой 70-80°С, растворяют, охлаждают до 30-32°С и вносят спермосан-3, глицерин и желток (табл. 19).*
Таблица 19 '
Синтетическая среда лактозо-фруктозо-раффинозо-магниевоглицерино-желточная (ЛФРМГЖ)
| Компоненты | Норма |
|---|---|
| Лактоза, г | 80,5 |
| Фруктоза, г | 12,0 |
| Раффиноза пятиводная, г | 19,5 |
| Магний сернокислый, г | од |
| Глицерин, мл | 50,0 |
| Спермосан-3, тыс.ед. | 500-700 |
| Желток куриных яиц, мл | 200,0 |
| Вода дистиллированная, мл | 1000,0 |
При отсутствии сухих заготовок среды компоненты стерилизуют ультрафиолетовыми лучами в бактерицидной камере в течение 15-20 мин, отвешивают на аналитических весах и готовят среду, как указано выше.
Таблица 20
Степени разбавления спермы быков из расчета получения 10-12 млн. подвижных спермиев в дозе после замораживания в полипропиленовых соломинках (0,25 мл)
| Подвижность | Концентрация спермиев, млрд/мл | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| спермиев, баллов | 0,7 | 0,8 | 0,9 | 1,0 | 1,1 1 2 1,3 | 1,4 | 1,5 | 1,6 | 1,7 | 1,8 | 1,9 | 2,0 |
| 10 | 1:5 | 1:6 | 1:7 | 1:8 | 1:9 1:10 1:11 | 1:12 | 1:12 | 1:13 | 1:14 | 1:15 | 1:16 | 1:17 |
| 9 | 1:4 | 1:5 | 1:6 | 1:7 | 1:7 1:8 1:9 | 1:10 | 1:11 | 1:12 | 1:13 | 1:13 | 1:14 | 1:15 |
| 8 7 | 1:2 | 1:4 | 1:5 | 1:6 | 1:6 1:7 1:7 1:6 | 1:8 | 1:9 | 1:10 | 1:11 | 1:11 | 1:12 | 1:13 |
Температуру среды перед разбавлением спермы (31 ±1 С) поддерживают в бактерицидной камере, термостате или в специальной водяной бане.
Сперму разбавляют в зависимости от подвижности и концентрации спермиев в эякуляте (табл. 20). Разбавляют сперму при температуре 31°+ 1C в мензурке. Для постепенного охлаждения разбавленную сперму помещают в стеклянный стакан с.водой температурой 31 +1°С и переносят в водяную баню с температурой воды 22 С на 20 минут.
Дальнейшая технологическая обработка спермы (расфасовка, закупорка и раскладка в штативы) проводится при комнатной температуре.
Расфасованную сперму помещают в холодильник при температуре 4°С и выдерживают 3-4 часа.
Разбавление спермы синтетическими средами для замораживания в облицованных гранулах. В качестве разбавителя для замораживания спермы в облицованные гранулы используют среды № 1 и 2.
| Таблица 21 Среда № 1 Компоненты | Норма |
|---|---|
| 11%-ный раствор лактозы или сахарозы, мл | 63,0 |
| Желток куриных яиц, мл | 30,0 |
| Глицерин, мл | 7,0 |
| Таблица 22 Среда № 2 | |
| Компоненты | Норма |
| Лактозы или сахарозы, г | 6,0 |
| Натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятиводный, г | 1,4 |
| Глицерин, мл | 5,0 |
| Вода дистиллированная, мл | 100,0 |
