К использованию допускается сперма с активностью после оттаивания не ниже 0,3 балла (т.е. не менее 30% спермиев должны двигаться прямолинейно-поступательно).
После размораживания сперму надо использовать в течение 20-30 минут.
5. Хранение спермы
Хранение спермы вне организма имеет цель увеличить I срок выживаемости спермиев и их оплодотворяющей способности в замороженном или не замороженном состоянии, основан ! ного на снижении обменных процессов в сперме, при которых I они впадают в анабиоз (рис. 9,10).
;........... ......................... . ..................
Рисунок 9 - Закладка семени на карантинное хранение
Рисунок 10 - Длительное хранение семени в стационарном хранилище
Существует несколько методов хранения спермы:
♦ кратковременное хранение спермы при плюсовых температурах;
♦ длительное хранение в замороженном состоянии в жидком азоте.
При кратковременном хранении спермы при температуре 2-5°С свежеполученную сперму после оценки ее качества разбавляют средой и проверяют снова под микроскопом на активность спермиев, а затем фасуют.
Сперму фасуют в стерильные стеклянные или полиэтилен-, новые ампулы, пробирки объемом по 1 мл. Для предупреждения гибели спермиев от температурного шока сперму охлаждают до температуры 2-5 С. постепенно в течение 2-3 часов. Вначале разбавленную сперму помещают в стеклянный стакан с теплой водой температурой 30 С, затем переносят в водяную баню температурой 22°С на 20 минут, после чего производят фасование.
Длительное хранение спермы в замороженном состоянии в жидком азоте при температуре минус 196 С требует соблюдения следующих условий:
-
♦ соблюдение технологии разбавления, охлаждения и замо
-
раживания спермы; ♦ непрерывное поддерживание низкой температуры в тече
-
ние всего срока хранения спермы; ♦ для перевозки спермы в жидком азоте применяют сосуды
-
Дьюара различной модификации;
♦ длительное хранение в жидком азоте замороженной спермы осуществляют в специальных стационарных биохранилищах типа ХБ-0,5, КВ-6202 и др;
- ♦ сперму быков используют для замораживания с концентрацией спермиев не менее 0,7 млрд в 1 мл и активности спермиев не ниже 8 баллов.
6. Техника безопасности работы с жидким азотом При работе с криогенным оборудованием и сжиженным азотом требуется соблюдение техники безопасности. Жидкий азот - прозрачная, бесцветная, легковоспламеняющаяся жидкость. Массовая плотность его 0,804 кг/л при давлении 760 мм рт. ст., в обычных условиях химически инертен. Попадая на открытые участки тела, он вызывает ожоги.
На длительное хранение, замороженная в жидком азоте сперма производителей, закладывается в сосуды Дьюара емкостью 50 л и стационарные биологические хранилища емкостью 200-500 л.
Техника безопасности при замораживании спермы. При замораживании спермы необходимо соблюдать общие правила безопасности при работе с жидким азотом: тщательная защита I лица, глаз, рук; наличие одежды, полностью закрывающей кожный покров тела; вентиляция помещения.
Особую осторожность следует соблюдать при оттаивании глубоко замороженной спермы в соломинках, облицованных гранулах, пакетах, так как проникший внутрь, вследствие пло
