диагностических дегельминтизаций и постановкой иммунобиологических реакций. Прижизненную диагностику гельминтозных заболеваний необходимо проводить с учетом эпизоотологических данных (определение зональных, видовых, породных, возрастных особенностей и сезона года), симптомов болезней Основное значение придают гельминтокопроскопическим и специальным исследованиям крови, мочи, кожи, мышц, сухожилий, истечения из глаз, содержимого из желудка и др. Порядок взятия и доставки фекалий для исследований.
Фекалии у животных берут из прямой кишки, либо с земли (или пола) в зависимости от вида гельминта в количестве 4–10 г. При взятии их из прямой кишки на руки надевают тонкие резиновые перчатки или напальчники. При исследовании на кишечные стронгилятозы и легочные гельминты (особенно при диктиокаулезе) фекалии нужно брать только из прямой кишки во избежание загрязнения исследуемого материала личинками свободно живущих гельминтов. Допустимо отбирать пробы с пола, когда исследования проводят на инвазии, при которых из яиц не выходят личинки (фасциолез, дикроцелиоз, трихоцефалез и др.).
У крупного рогатого скота, лошадей, собак фекалии берут индивидуально, указывая кличку и номер животного. У свиней, овец, оленей, кроликов и пушных зверей не всегда удается индивидуальное взятие проб, у этих животных фекалии чаще берут групповым методом. При этом указывают группу, отару, № станка и клетки. Исследуют не менее 10% животных отары, фермы, хозяйства. Доставляют пробы фекалий в стеклянной, пластмассовой таре, целлофановых мешочках или пергаментной бумаге с обязательной описью проб в сопроводительном документе.
В документе указывают: хозяйство, отделение, бригаду, участок, ферму, вид животного, их возраст, на какие гельминты исследовать, дату взятия и направления материала. Клички, номера животных, станка, клетки должны соответствовать номеру пробы фекалий на упаковке.
4.4.1.1. Гельминтокопроскопические методы исследования животных
Гельминтокопроскопия (от греческого слова helmins – червь, kopros – кал, навоз, skopia – смотрю) – это совокупность методов взятия, обработки и исследования проб фекалий, животных и человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов или же самих паразитов, их фрагментов (членики, отрезки) и постановки диагноза.
Методы исследования, направленные на отыскание самих паразитов или их отдельных фрагментов, называются гельминтоскопией. Яйца гельминтов обнаруживают гельминтоовоскопическими, а личинок – гельминтоларвоскопическими методами.
В зависимости от цели гельминтокопроскопическую диагностику проводят для установления экстенсивности и интенсивности инвазии, а также для дифференциации самих паразитов. Однако необходимо помнить о том, что яйца и личинки в пробах фекалий можно обнаруживать только в том случае, если гельминты достигли половозрелой стадии.
Копроскопическую диагностику гельминтозов необходимо применять с учетом эпизоотологических данных, возрастных особенностей и с учетом сезона года. Например, крупный и мелкий рогатый скот в средней полосе России заражаются адолескариями фасциол в основном в августе и сентябре. Половозрелыми эти гельминты становятся в организме животных через 3-4 месяца, следовательно, их яйца начинают выделяться в ноябре и декабре.
Гельминтоскопию применяют для обнаружения в исследуемом материале половозрелых и юных гельминтов или их фрагментов. Гельминты нередко отходят сами. А у многих видов цестод систематически отторгаются членики (проглоттиды) и фрагменты, стробилы с яйцами и выделяются наружу. Исследуя фекалии животных невооруженным глазом можно заметить гельминтов или их фрагменты и членики, а иногда приходится использовать специальные методы исследования.
Особое значение гельминтоскопия имеет при цестодозах, а также при диагностической дегельминтизации. С целью обнаружения члеников имагинальных цестод осматривают свежие фекалии. У овец, северных оленей, телят, лошадей члеников цестод нетрудно заметить при обычном осмотре. В фекалиях ягнят и овец рано утром или после дневного отдыха находят членики мониезий, тизаниезий, аветеллин и стилезий. У плотоядных животных членики цестод из подотряда тениата способны активно передвигаться во внешней среде. Поэтому необходимо осматривать свежие фекалии.
Весьма характерны по форме членики огуречного цепня ( Dipylidium caninum ), паразитирующего у собак, лисиц, песцов, енотовидных собак, кошек и других плотоядных, а также у человека. Членики этого паразита внешне напоминают огуречные семена, их легко заметить в фекалиях, выделенных инвазированными животными.
Из специальных методов гельминтоскопии наиболее простыми и приемлемыми являются методы последовательного промывания и отсеивания.
Метод последовательного промывания. При проведении этого метода собирают свежие порции фекалий от животных, помещают в сосуд, заливают водой в соотношении 1:5 или 1:10 и тщательно перемешивают. Взвесь оставляют на 5 мин для осаждения. Затем верхний слой сливают до осадка, после чего снова заливают водой и повторяют эти операции до тех пор, пока жидкость над осадком не будет прозрачной. После надосадочную жидкость сливают последний раз, а осадок помещают в
кювету или чашку Петри для исследований под лупой. Так как одни гельминты хорошо видны на белом фоне, а другие на черном, то для более полной выборки гельминтов чашку Петри ставят то на белую, то на черную бумагу. Гельминтов выбирают препаровальной иглой или кисточкой, а затем микроскопируют для установления вида.
Метод отсеивания . При этом методе используют набор из 2–4 металлических сит с отверстиями убывающего диаметра. Струей воды промывают фекалий, при этом частицы фекалии уносятся водой, а гельминты в зависимости от величины задерживаются на разных ситах. Затем гельминтов выбирают и исследуют. Этим методом можно собирать гельминтов разной величины.
Гельминтоовоскопия (от латинского ovum – яйцо, греческого skopeo – смотрю) объединяет группу методов исследования, с помощью которых выявляют яйца возбудителей гельминтозов.
Предложено много методов овоскопии, но не все они заслуживают практического применения. Одни методы сложны по технике выполнения, при исследовании другими требуется значительное время, третьи – малоэффективны. В данном пособии мы приведем только наиболее эффективные методы гельминтоовоскопии.
Удельный вес яиц тяжелее обычной воды, вследствие этого яйца гельминтов, как более тяжелые частички вымываются из фекалий водой и оседают на дно сосуда с различной скоростью, в зависимости от удельного веса. Быстрее всего оседают яйца более крупного размера. В растворах же солей высокого удельного веса яйца гельминтов наоборот всплывают (явление флотации) в верхний слой и концентрируются в нем.
На использовании этих физических закономерностей основана технология всех современных методов гельминтоовоскопии, которые подразделяются на три группы: осаждения, флотации и комбинированная. Методы осаждения (седиментации) основаны на принципе осаждения взвешенных в жидкости яиц гельминтов, промывки осадка и исследования его. Эти методы применяются в основном для диагностики тех гельминтозов, возбудители которых выделяют яйца с высоким удельным весом (фасциолез, дикроцелиоз, описторхоз и др.). Методы осаждения менее эффективны и более трудоемки, чем флотации. Это связано со сложностью отыскания яиц гельминтов в осадке взвеси.
Метод последовательных смывов. Пробу фекалий 3-5г кладут в стакан, вливают небольшое количество воды и размешивают палочкой или пинцетом до получения жидкой кашицеобразной массы, затем добавляют воду порциями до объема 50 мл при постоянном размешивании. После взвесь процеживают через металлическое сито в другой стакан, в нем отстаивают в течение 5–10 мин. Затем верхний слой жидкости над осадком сливают, а к осадку добавляют новую порцию воды и вновь отстаивают в течение 5–10 мин. Описанная процедура повторяется до тех пор, пока вода не станет прозрачной. Ее в последний раз сливают, а осадок (около 5 мл)
