Контроль за антимикробной активностью осуществляли через каждую неделю хранения. Учёт полученных результатов проводили через 72 часа пугём подсчёта выросших колоний микроорганизмов. Полученные результаты выражали в КОЕ. Данные о результатах исследований представлены в таблицах 74, 75, 76.
Из данных таблицы 74 видно, что озонированное подсолнечное рафинированное масло сохраняет антимикробные свойства в течение одного месяца при условии его хранения в бытовом холодильнике (4°С). В течение указанного срока отмечается отсутствие роста золотистого стафилококка и агалактийного стрептококка на плотной питательной среде. При изучении антимикробных свойств неозонированного подсолнечного рафинированного масла в отношении данных микроорганизмов количество выросших колоний на чашках Петри после 4-х недель хранения было больше на 26,3% и 19,7% соответственно.
Таблица 75 — Антимикробная активность озонированного подсолнечного рафинированного масла в течение одного месяца хранения при 1 =18°C
| Показатель | 4 Sal | — к роорганизмов | Staphylococcus aureus | Streptococcus agalactiae |
|---|---|---|---|---|
| Озонированное | : | Dal de | ЖИ | |
| 6,8 x 10° | | 2.2.x 10" | 2,6 x 10° | ||
| р | a | | |||
| _ | 4[| | 6,6х10° | | 25x10" | [2,8 x 10° |
При анализе цифрового материала таблицы 75 видно, что при температуре хранения 18°С антимикробная активность озонированного подсолнечного рафинированного масла по истечении 4-х недель снизилась от 1,7х10' до 6,2х10' КОЕ в отношении золотистого стафилококка и от 1,9x10! до 6,6х10' для агалактийного стрептококка. По сравнению с контролем данные показатели были ниже на 2 порядка по истечении 4-х недель хранения. При определении антимикробных свойств неозонированного масла рост на плотных питательных средах отмечен от 10' после 2-х недель хранения до 10? по истечении 3-х и 4-х недель, в то время как в контроле KOJIHчество KOE было 10°.
Таблица 76 — Антимикробная активность озонированного подсолнечного рафинированного масла
в течение одного месяца хранения при t = 37°С
| к | Неделя хранения | а микроорганизмов | Staphylococcus aureus | Streptococcus agalactiae |
|---|---|---|---|---|
| | | 62x10 | 3,7x 10! | — 3,8 | |
| ой | И | ИИ о | 64x10" | 6810 х 10 | |
| 3 | 10° | 1х 107 | | 14х10 | | |
| a | 4 | 61x 6,5x 10° | 4.6x 10 | | |
| a | 1| | 72x10 | — 9.6х 0 | 4,8x 9,8 10! | |
| ee | 7.1 х 10 | 14x10 | 2х x 10 10° | |
| ane | 66x10"| | 4.9хЮ | 4.3 x 10° | |
| _ | 6,7x 10° | 45x 10° | | 5.7х 10° |
Из данных таблицы 76 видно, что при температуре хранения 37°C количество колоний, выросших на чашках Петри при определении антимикробных свойств ОПРМ после 3-х недель хранения, увеличилось от 10' до 10° в отношении золотистого стафилококка и агалактийного стрептококка. Параллельно этому рост микроорганизмов при использовании ОПРМ в 10° отмечен после 2-х недель хранения при температуре 37°C.
С учётом предварительных результатов, полученных в отношении стабильности величины антимикробной активности озонированного подсолнечного масла при его хранении при температуре 4°C, провели подобное исследование, но с учётом хранения приготовленного продукта в течение одного года. Результаты исследования показаны в таблице 77.
Таблица 77 - Антимикробная активность озонированиного
подсолнечного рафипированного масла в отношении
Staphylococcus aureus в течение одного года хранения при 1 = 4°C
| т | en con | | арт | "| срок | |
|---|---|---|---|
| | ма | [м | м | |
Цифровые данные таблицы 77 показывают, что озонированное подсолнечное рафинированное масло при хранении в условиях бытового холодильника (4°С) в течение одного года сохраняет высокую антимикробную активность по отношению к полевым штаммам золотистого стафилококка в разведении от 107до 107.
Таким образом, можно сделать вывод о том, что оптимальными условиями хранения для озонированного подсолнечного рафинированого масла является температура 4°С. При этом режиме хранения его антимикробные свойства остаются стабильными в течение 12 месяцев.
Фармако-токсикологическая оценка озонированного подсолнечного рафинированного масла.
Величину острой токсичности озонированного подсолнечного рафинированного масла оценивали на белых мышах. Для этого готовили ряд последовательных разведений, выполненных с шагом 10. В качестве растворителя использовали глицерин. Для обеспечения ПОЛНОТЫ перемешивания каждое разведение эмульгировали с помощью ультразвукового дезинтегратора. Полученные таким образом пробы вводили группам мышей внутрибрюшинно в объёме по 0,5 мл каждой. При этом максимальная из введённых доз ОПРМ составила 5x10".
За время последующего 7-суточного наблюдения гибели животных и каких-либо проявлений интоксикации (изменение поведенческих реакций, двигательной активности, снижение массы тела) не было зарегистрировано. Для оценки хронической токсичности ОПРМ в расчётных терапевтических дозах вводили внутрибрюшинно группам мышей и морских свинок ежедневно в течение месяца. Расчёт лечебной дозы ОПРМ для каждого вида животных проводили с учётом коэффициента отношения массы и площади поверхности тела животного. Для белых мышей расчётная лечебная доза составила 4,8x10° мл, а для морских свинок эта доза равнялась 1,9x 107 MII.
Наблюдения за животными осуществляли в течение всего периода введения ОПРМ, а также на протяжении 7-ми суток от момента последней инъекции. За время наблюдения гибели животных и каких-либо проявлений интоксикации не было зарегистрировано.
При изучении патоморфологической картины у животных, усыплённых через сутки после последнего введения озонированного подсолнечного рафинированного масла и по окончании срока наблюдения, признаков дистрофии и воспаления внутренних органов выявлено не было.
Для характеристики местного действия ОПРМ вводили группе морских свинок внутримышечно, во внутреннюю поверхность бедра ежедневно, в течение 5-ти суток, в количестве одной расчётной дозы (1,9x107 мл).
