Неразбавленная сперма по густоте в зависимости от концентрации спермиев в 1 мл может иметь следующие оценки: густая (Г), средняя (С) и редкая (Р).
Сперма густая (Г) - содержит спермиев свыше 1 млрд. в 1 мл. Под микроскопом все поле зрения заполнено спермиями так, что между ними почти не видно промежутков.
Сперма средняя (С) - содержит спермиев от 0,6 до 1 млрд. в 1 мл. В поле зрения под микроскопом заметны промежутки между спермиями.
Сперма редкая (Р) - содержит спермиев менее 0,6 млрд. в I мл. Между спермиями имеются промежутки, превышающие длину одного спермия.
К использованию допускается сперма быков с оценкой густая (Г) и средняя (С).
Подвижность (активность движения) спермиев оценивают по десятибалльной шкале. Различают прямолинейнопоступательное движение (ППД), колебательное (К), манежное (М) движение спермиев. Каждый балл равен 10% спермиев, обладающих прямолинейно-поступательным движением. Высшую оценку 10 баллов получает сперма, в которой практически все (100 %) спермин имеют прямолинейно-поступательное движение (ППД). При оценке 9 баллов примерно 9 спермиев из каждых 10 (то есть 90 %) имеют ППД. Другие виды движения спермиев (манежное, колебательное) при оценке спермы по балльной системе не учитывают.
Густоту спермы и подвижность обозначают двумя знаками. Например, Г-9, что означает сперма густая, имеет (90 %) подвижных, с прямолинейно-поступательным движением спермиев.
Определение концентрации семени. Глазомерная оценка концентрации спермиев по густоте не достаточно точна и субъективна. Поэтому применяют более точные методы определения концентрации спермиев при помощи счетных камер, 'фотоэлектроколориметра, оптических стандартов. Насыщенность спермиев в 1 мл спермы и общее число их в эякуляте характеризуют функцию половых желез семенников (рис. 8).
Рисунок 8 - Процесс определения концентрации и разбавления спермы
При подсчете спермиев в счетной камере (Горяева, Тома или Бюркера), камеру предварительно моют и насухо вытирают салфеткой, затем накрывают покровным стеклом и притирают его до появления радужных колец. Счетные камеры имеют три площадки, разделенные прорезями. В счетной камере Горяева средняя площадка прорезью разделена на две, каждая из которых имеет выгравированную сетку. В эритроцитарный смеситель набирают сперму быка до деления - 1, после этого набирают 3%-ный раствор хлорида натрия до деления 101, под влиянием раствора спермин становятся неподвижными, что облегчает их подсчет. Большим и указательным пальцами зажимают оба конца смесителя и встряхивают в течение 2-3 минут. Когда сперма равномерно смешалась с раствором, из смесителя удаляют четыре капли жидкости. Этим достигается удаление из капилляра смесителя раствора не сме-
шанного со спермой. Следующую каплю наносят на сетку камеры под покровное стекло. Переносят камеру на предметный столик микроскопа и подсчитывают спермин при увеличении в 200400 раз. Подсчет производят в пяти больших квадратах (в 80 маленьких квадратиках). Считают только головки спермиев, расположенных внутри малых квадратов и лежащие на их левых и верхних линиях. При подсчете число спермиев в каждом большом квадрате (16 маленьких) записывают отдельно. Подсчет удобно вести с помощью счетчика для лейкоцитов крови, используя, пять клавиш, отдельно для каждого квадрата. Полученную сумму спермиев в пяти квадратах делят на 200 и определяют общее количество спермиев в 1 мл спермы.
С помощью фотоэлектроколориметра (ФЭК — М) можно в течении 1-2 минут определить концентрацию спермиев в эякуляте. Метод определения концентрации спермиев основан на способности спермы ослаблять пропускаемый через нее пучок света пропорционально концентрации спермиев, то есть чем выше концентрация спермиев, тем больше ослабляется проходящий пучок света.
Определять на ФЭК-М концентрацию начинают спустя 1520 минут после включения лампы и подсветки фотоэлементов. Рукояткой устанавливают красные светофильтры. Левый отчетный барабан с помощью рукоятки выставляют на «0» по красной шкале. Затем во флакон наливают 10 мл 3,5 %-ного раствора лимоннокислого натрия и вносят туда микропипеткой 0,1 мл спермы быка (соотношение 1:100). После разбавления сперму тщательно перемешивают, осторожно переворачивая закрытый флакон в руке, наливают в кювету с рабочей длиной 10 мм до метки и быстро определяют ее оптическую плотность. Для этого в левый юоветодержатель ставят чистую кювету такой же длины (мм) наполненную 3,5 %-ным раствором лимоннокислого натрия, а В правый кюветодержатель две такие же кюветы - одну с разбавленной спермой, другую с 3,5 %-ным раствором лимоннокислого натрия. При этом кювету с разбавленной спермой устанавливают на пути прохождения пучка света, а кювету с рас-
