Методика двухступенчатого разведения (32-34°С и +4°С)
-
после анализа семени, делается предварительный раствор
-
1:1 Bioxcell при температуре 32-34°С;
-
колбу с раствором гомогенизируют один раз;
-
предварительно разведенную сперму помещают в водяную
-
баню с температурой 32-34°С на 10 минут и добавляют от 20 до 25 мл Bioxcell при температуре 32-34°С;
-
бутылочки с разведенной спермой помещают в пластико
-
вый контейнер, заполненный водой от водяной бани с температурой 32-34 С (рекомендуется поставить в воду термометр);
-
затем бутылочки помещают в холодную камеру с темпера
-
турой +4°С на 1-1,5 часа (когда температура достигнет 12-14 С, можно добавить кубики льда).
-
делают окончательный раствор при температуре +4°С;
-
выдерживают разведенную сперму от 3 до 5 часов вдали от
-
света;
-
упаковывают сперму в соломки с концентрацией спермиев
-
в одной дозе (иайетты объемом по 0,25 мл) не менее 25 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным движением (ГГПД), при температуре -ь4°С;
-
помещают соломки на полки и замораживают.
Использование Bioxcell со свежей спермой
Подготовка наполнителя включает следующие операции:
-
поместить бутылку со 100 мл концентрированного на
-
полнителя на водяную баню с температурой 32-34°С на 10 минут;
-
поместить Erlemneyer в 400 мл дважды про дистиллиро
-
ванной охлажденной стерильной воды или эквивалента на водяную баню с температурой 32-34°С;
-
налить 100 мл концентрированного наполнителя в 400 мл
-
дважды иродистиллированной охлажденной стерильной воды или эквивалента. Дважды промойте бутылку окончательным раствором;
♦ гомогенизировать раствор - наполнитель готов к использованию;
-
♦ наполнитель рекомендуется использовать для разведения
-
в течение 6 часов с момента его приготовления.
Методика одноступенчатого разведения с раствором Bioxcell (при температуре 32-34°С)
Упаковка спермы при комнатной температуре (20 С):
-
♦ после анализа семени, сделать предварительный раствор'
-
1:1 Bioxcell при температуре 32-34°С;
-
♦ колбу с раствором гомогенизируют один раз;
-
♦ предварительно разведенную сперму выдерживают в
-
термостате на водяной бане при температуре 32-34°С в течение 10 минут;
-
♦ сделать окончательный раствор, добавить предваритель- но разведенную сперму в наполнитель, не гомогенизировать; ♦ оставить колбочки с разведенной спермой при комнатной
-
температуре (20°С) на 10-15 минут;
-
♦ гомогенизировать и упаковать сперму в соломки с кои-1
-
центрацией спермиев в одной дозе (пайетты объемом по 0,25] мл) не менее 25 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным! движением (ППД), при температуре 20°С;
-
♦ поместить соломки горизонтально в пластиковый контейн
-
нер, затем поместить контейнер в холодную KaMepiy с темпера-1 турой +4°С. Соломки должны быть защищены от холода, они могут находиться при температуре от до в течение 1,0-1,5 часа; ♦ сперму держать от 3 до 5 часов вдали от света; ♦ сохранять сперму при температуре +4°С в термостатиче
-
ской камере марки 005485. Сохранение (время между разведением спермы и искусственным осеменением) не должно превы-] шать 72 час.
-
Упаковка семени при температуре.+4°С производится в
-
следующей последовательности: • ♦ после анализа семени, делается предварительный раствор]
-
1:1 Bioxcell при температуре 32-34°С;
♦ колбу с раствором гомогенизируют один раз;
♦ предварительно разведенную сперму выдерживают в термостате на водяной бане при температуре 32-34°С в течение 10 минут;
♦ делается окончательный раствор путем добавления предварительно разбавленной спермы в наполнитель (не гомогензируют);
♦ оставить колбочки с разведенной спермой при комнатной температуре (20 ) на 10-15 минут;
♦ поместить колбу с разведенной спермой в пластиковый контейнер с постоянным уровнем воды в водяной бане при 32 °С (уровень воды не должен быть выше уровня разведенного семени). Затем, контейнер поместить в холодную камеру с температурой +4°С. Рекомендуется поместить термометров воду. Когда температура достигнет 12-14 , можно добавить кубики льда в воду. В любом случае, температура 4 °С должна быть достигнута в течение 1-1,5 часа;
♦ держать сперму от 3 до 5 часов вдали ог света:
♦ заполнить сперму в соломки с концентрацией сиермиев в одной дозе (пайетты объемом по 0,25 мл) не менее 25 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным движением (Г1ПД). в холодной камере;
♦ сохранять сперму при температуре +4°С в термостатической камере марки 005485. Сохранение (время между разведением спермы и искусственным осеменением) не должно превышать 72 час.
Методика двухступенчатого разведении с раствором Bioxcell (32-34°С и +4°С)
-
♦ после анализа семсни, делается предварительный раствор
-
1:1 Bioxcell при температуре 32-34 С;
• колбу с раствором гомогенизируют один раз;
