В связи с изложенным можно отметить, что у коров, больных маститом, при повышенном содержании лейкоцитов в крови снижалась концентрация эритроцитов, гемоглобина, гематокрита. В сыворотке крови здоровых коров более высокими, чем у больных животных, были такие показатели, как содержание общего белка, глюкозы, фосфора и кальция, что свидетельствует о физиологической нестабильности организма животного. Одну из главных ролей в этиологии и патогенезе мастита играет микрофлора, которая является одним из источников заболевания 105, 110 . Как правило, именно антибиотикорезистентные штаммы обуславливают длительное и безуспешное лечение коров, поэтому определение микробного фона молочного секрета является необходимым условием в подборе методов лечения 97 . Бактериологическое исследование молока проводится для определения общей бактериальной загрязненности, выделения микроорганизмов, вызвавших заболевание молочной железы 125 .
Поэтому в своей работе мы провели бактериальный анализ проб секрета вымени коров в СПК «Ольговское» Витебского района Витебской области. Пробы отбирали у животных с клинической и субклинической формами мастита. Полученные результаты представлены на рисунке 8.
В результате бактериологического исследования 20 проб секрета вымени, проведенного на кафедре микробиологии и вирусологии УО «ВГАВМ», были выделены следующие микроорганизмы: 7 проб, или 35 % обнаруживали Strep. аgalactiaе, 5 проб, или 25,0 % - Staph. aureus, 4 пробы, или 20 % - E. сoli, 3 пробы, или 15 %, находились в ассоциации - E. coli, Staph. epidermidis, Strep. аgalactiaе. В одной из проб возбудителей заболевания не выявлено, что является доказательством того, что в возникновении мастита микробный фактор не является единственным.
Staph.aureus
Strep.agalactiae
5
15 25
E.coli
20
35
E.coli, Staph.epid
ermidis, Strep.ag
alactiae
возбудителя не
выявлено
Рисунок 8 – Бактериологическое исследование проб молочного секрета вымени коров, больных маститом, %
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что основная доля случаев приходится на маститы микробной этиологии. Его возбудителями являются Staph. аureus и Strep. Аgalactiaе (в нашем случае это 60 %). Полученные нами результаты исследований согласуются с данными К.Д. Валюшкина и P. Phuektes, которые указывают на высокую патогенность данных возбудителей, занимающих первое место в ранге распространения и причин, вызывающих заболевание молочной железы 31, 305 .
Это подтверждает то, что в этиологии мастита основную роль выполняют микроорганизмы, которые приводят к развитию воспаления в тканях молочной железы. Однако существуют мас-
титы, особенно субклинический, которые развиваются асептически при раздражении тканей вымени. Например, при неправильном машинном доении коров и способствующих паратипических факторах. Используемые лекарственные препараты и способы их введения не оказывают эффективного действия на микрофлору вымени вследствие специфического строения молочной железы, в результате чего острое воспаление переходит в хроническое.
В связи с этим возникает необходимость в ранней диагностике возбудителей воспаления молочной железы с помощью ДНК-тестов.
Идентификацию бактериальных патогенов рассматривают как окончательный диагноз мастита. Она также дает возможную информацию о профилактике и контроле этого заболевания. В большинстве клинических лабораторий методы тестирования основываются на микробиологическом анализе проб молока. Однако этот метод имеет ряд недостатков. Ограничивающим фактором является динамика инфекции. У коров с субклинической формой мастита степень инфицированности колеблется от низкой до высокой. В культуре молока с субклиническим маститом можно не выявить бактерии из-за очень небольшого количества патогенов или же остаточного присутствия антибиотиков, которые ингибируют рост бактерий in vitro. Идентификация видов бактерий стандартными бактериологическими методами требует более 48 часов. Метод ПЦР, разработанный для тестирования различных патогенов мастита, не имеет этих недостатков 305 .
Методы, используемые в эпидемиологических исследованиях, должны идентифицировать множество различных типов и должны быть недорогими, быстро и легко выполнимыми.
Для более точной постановки диагноза мастита у молочных коров использовали метод мультиплексной полимеразной цепной реакции, обеспечивающий параллельное выявление основных бактериальных агентов: Staph. aureus и Strep. аgalactiaе. Все олигонуклеотидные праймеры соответствовали опубликованным последовательностям (Forsman et al, 1997) [271].
Исходя из предварительного бактериологического анализа проб молока коров СПК «Ольговское» (таблица 33) провели
