титы, особенно субклинический, которые развиваются асептически при раздражении тканей вымени. Например, при неправильном машинном доении коров и способствующих паратипических факторах. Используемые лекарственные препараты и способы их введения не оказывают эффективного действия на микрофлору вымени вследствие специфического строения молочной железы, в результате чего острое воспаление переходит в хроническое.
В связи с этим возникает необходимость в ранней диагностике возбудителей воспаления молочной железы с помощью ДНК-тестов.
Идентификацию бактериальных патогенов рассматривают как окончательный диагноз мастита. Она также дает возможную информацию о профилактике и контроле этого заболевания. В большинстве клинических лабораторий методы тестирования основываются на микробиологическом анализе проб молока. Однако этот метод имеет ряд недостатков. Ограничивающим фактором является динамика инфекции. У коров с субклинической формой мастита степень инфицированности колеблется от низкой до высокой. В культуре молока с субклиническим маститом можно не выявить бактерии из-за очень небольшого количества патогенов или же остаточного присутствия антибиотиков, которые ингибируют рост бактерий in vitro. Идентификация видов бактерий стандартными бактериологическими методами требует более 48 часов. Метод ПЦР, разработанный для тестирования различных патогенов мастита, не имеет этих недостатков 305 .
Методы, используемые в эпидемиологических исследованиях, должны идентифицировать множество различных типов и должны быть недорогими, быстро и легко выполнимыми.
Для более точной постановки диагноза мастита у молочных коров использовали метод мультиплексной полимеразной цепной реакции, обеспечивающий параллельное выявление основных бактериальных агентов: Staph. aureus и Strep. аgalactiaе. Все олигонуклеотидные праймеры соответствовали опубликованным последовательностям (Forsman et al, 1997) [271].
Исходя из предварительного бактериологического анализа проб молока коров СПК «Ольговское» (таблица 33) провели
ПЦР. Для этого взяли 12 проб молока, инфицированного Staph. aureus и Strep. Agalactiaе, из отдельных долей вымени коров, больных маститом.
Оптимальная концентрация праймеров соответствовала количеству, необходимому для получения одновременной амплификации патогенов: Staph. aureus и Strep. аgalactiaе. Ни одна из пар праймеров не дала продуктов с ДНК от другого бактериального вида.
Из 12 проб молока выделили 5 проб - Staph. аureus, 7 проб - Strep. аgalactiaе, что на 100 % подтверждает данные, полученные при бактериологическом исследовании секрета вымени. Таблица 33 – Результаты мультиплексной ПЦР проб молока у коров, больных маститом
| Вид возбудителя | Количество проб |
|---|---|
| Staph. аureus | 5 |
| Strep. agalactiaе | 7 |
| ИТОГО | 12 |
Видоспецифическая ПЦР была разработана нами для двух основных возбудителей мастита: Staph. аureus и Strep. аgalactiaе. Мультикомплексная ПЦР позволяет одновременно обнаружить множественные патогены в одной реакции. При этом используется небольшое количество реактивов, по сравнению с бактериологическим анализом молока, экономится время, что облегчает применение мультикомплексная ПЦР для диагностики мастита.
Проведенные исследования свидетельствуют о целесообразности использования данных маркеров в качестве тест-систем для идентификации основных возбудителей мастита: Staph. aureus и Strep. аgalactiaе.
3.1.6 Плейотропное действие гена каппаказеина на воспроизводительные качества коров различных генотипов
Необходимо признать, что для использования гена каппаказеина в качестве маркера в селекции на повышение белковомолочности коров недостаточно изучить полиморфизм и выявить его достоверное влияние на продуктивные качества животных, необходимо исключить возможность отрицательного плейотропного эффекта данного гена на ряд селекционируемых признаков и показателей жизнедеятельности. В связи с чем нами изучено плейотропное действие гена каппа-казеина на воспроизводительные качества коров различных пород.
С повышением потенциала молочной продуктивности крупного рогатого скота большое значение приобрели такие его характеристики, как здоровье и воспроизводительные качества коров, от которых в значительной мере зависит протекание технологического процесса, направленного на получение молока. Для достижения высокого уровня воспроизводства стада необходим регулярный контроль показателей, характеризующих плодовитость каждого животного в отдельности и стада в целом.
На сегодняшний день основным критерием воспроизводства стада в хозяйствах Беларуси является выход телят на 100 коров и нетелей, имеющихся на начало года. Однако этот показатель не отвечает современным требованиям и не характеризует воспроизводительный статус коров. Напротив, зарубежный опыт ведения животноводства рекомендует использование такого показателя, как межотельный период. Он наиболее точно характеризует состояние воспроизводства стада с экономической, физиологической и селекционной точек зрения.
Межотельный период – обобщающий показатель, один из ключевых индикаторов среди характеристик воспроизводительных способностей коров. Для определения фактического значения данного показателя необходимы сведения о дате отелов (двух или более) по каждому животному. Для этого сначала высчитывают продолжительность интервалов по каждой корове, а затем сред-
