Белковое и аминокислотное питание животных

16

нииИИООООООООО ООО ООС СОСОСООО СОСОСОСОССООССОО

ной азотной кислоты белковые растворы, имеющие в своем составе аминокислоты, дают характерное желтое окрашивание. Раствор смеси азотных солей окиси и закиси ртути окрашивает раствор, в котором есть тирозин, в кирпичный цвет (реакция Миллона). Триптофан обнаруживается реакцией Адамкевича, при которой добавление в раствор белка, содержащего эту аминокислоту, раствора глиоксиловой кислоты в серной кислоте дает темно-фиолетовое кольцо. Присутствие в белке аргинина можно установить по малиново-красному окрашиванию раствора при обработке его типохлоридом натрия, а затемВсе аминокислоты,раствором В-нафтолатакже как(реакцияи белки,Сакагуши).дают реакцию с нингидрином. Растворы аминокислот при этой реакции окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Существуют и другие специфические реакции для большинства амиHOKHCJIOT. Количественные методы хотя и трудоемкие, но дают более точное представление об аминокислотном составе изучаемого белка или ткани, позволяют более полно судить о некоторых их свойствах, дают сравнительную характеристику различных биологических объектов. Все имеющиеся методы количественного анализа амифические,нокислот можномикробнологические,разделить на химические,ферментативныехроматогра-и методы с применением изотопов. Химические методы чаще всего основываются Ha реакции окрашивания при взанмодействии химического реагента с аминокислотой. Чем интенсивнее окраска, тем более высокая концентрация конкретной аминокислоты в исследуемом материале. Сравнивая при помощи фотометра степень окраски используемого раствора со стандартным, определяют количество аминокислоты B пробе. Предложено много методов химического анализа. Наиболее известны и широко употребляются только некоторые из них, основанные на реакции с азотистой кислотой и нингидрином. В этой реакции аминокислоты, имеющие а-аминогруппу, при взаимодействии с азотистой кислотой образуют соответствующие оксикислоты с выделением азота по следующей схеме: R— Gees Е HNO, > R— ee Е № + НО. NH, OH 17

ИА

На основе этой реакции разработан нитритный метод. (Ван-Слайка) определения аминокислот по количеству выделяющегося азота. При реакции аминокислот с нингидрином образуется угольцый ангидрид и соответствующий альдегид, количество которых может быть определено.

Имеется ряд специфических реакций на отдельные аминокислоты. Гистидин и тирозин, например, определяют колориметрически в результате реакции с диазотидлярованпойопределениясульфаниловойкаждой изкислотойаминокислот(реакцияих.нужноПаули),раз-но делить. Триптофан определяется колориметрически на основе реакции с парадиметиламинобензальдегидом (реактив Эрлиха) и нитритом натрия в кислой среде Метионин дает окрашивание с нитропруссидом в ИЛЬ. но щелочном растворе. Качественные методы определения содержания тирозина, аргиница, фенилаланина, триптофана также относятся к специфическим. В лабораторной практике только искоторые из химических методов количественного определения аминокислот паходят применение, так как остальные сравнительUO трудоемки, мало производительны и для них необходимы дефицитные реактивы. Наиболее доступны химифана, глицина. ческие методы определения лизина, метионина, триптоЛизин определяется на основании окрашивания в реакции с дипитрофторбензолом (ДНФБ). Интенсивжелтыйность окраскицвет эпсилондает (г)возможностьаминогруппыопределитьпри химическойсодерноежаниеколичестволизина. Этимэтой аминокислотыже методом определяютдля организмаи достун-животпых. Триптофан определяется на основании его свойства давать с парадиметиламинобензальдегидом окраску, инаминокислоты.теисивность которойНаиболеепропорциональначасто этот метод концентрациииспользуется в лабораторной практике, поскольку при кислотном гидролизе триитофан разлагается. Определить мегиопин можно по реакции его с питропруссидом натрия. Хроматографический метод определения аминокислот впервые предложен русским ботапиком М. С. Цветом в 1903 г. Метод оспован на принциие адсорбции. В послед-