| 17. Посуда лабораторная из термостойкого стекла: стаканы, цилиндры, колбы, воронки | 1 0 - 2 0 |
| 18. Г раду ированные пипетки | 10 |
| 19. Эмалированные емкости для мытья посуды | 3-4 |
| 1.7. Нормы и стоимость генетического по группам крови | тестирования |
| Нормы (в расчете на 1 чел.-день, головы) | |
| 1. Взятие проб крови | 100 |
| 2. Определение эритроцитарных антигенов | 50 |
| 3. Определение генотипов и оформление теста на | |
| ПК | 50 |
| 4. Определение достоверности происхождения и | |
| выявление генетических пороков | 25 |
| 5. Оформление протоколов и заключения о резуль татах генетической экспертизы по группам крови | 1 0 0 |
| Стоимость тестирования (одной головы) | |
| 1. Определение групп крови с выдачей тестов по генотипам | 250 руб. |
| 2. Определение групп крови с определением досто | |
| верности происхождения | 380 руб. |
| 1.8. Выходные документы | |
| 1. Генетические тесты. | |
| 2. Протокол генетической экспертизы. | |
| 3. Генетический паспорт. | |
| 2. Определение полиморфных систем | белков |
| и ферментов крови крупного рогатого | скота |
Для расширения спектра диагностикумов при определении достоверности происхождения животных исследования по группам крови можно дополнить изучением полиморфности белков и ферментов крови.
У крупного рогатого скота анализируют трансферрин (Tf), посттрансферрин (Ptf), постальбумин (Pta) в плазме (сыворотке) кро-
2.1. Необходимые материалы
реактивы; оборудование.
Реактивы
-
Акриламид.
-
Аммоний надсернокислый (персульфат аммония).
-
Бром-феноловый синий.
-
Глицин.
-
Кумасси R-250.
-
6 . Метилен-бис-акриламид.
-
Сахароза.
-
8 . Соляная кислота.
-
Тетраметиэтилендиамин (ТЕМЭД).
-
Трис-оксиметил-аминометан (трис).
-
Уксусная кислота.
-
Этиловый спирт.
2.2. Правила получения и хранения образцов крови
Пробы крови отбирают также, как и для иммуногенетического анализа. Далее образцы плазмы (сыворотки) и эритроцитов отбирают в мелкие полиэтилленовые пробирки или планшеты и хранят в морозильной камере бытового холодильника в течение месяца. Для более длительного хранения образцов их необходимо поместить в морозильную камеру с температурой -17°С.
Для электрофоретического разделения образцы сыворотки (плазмы) крови необходимо оттитровать 40%-ной сахарозой с индикатором в соотношении 1 : 2 (сыворотка : сахароза).
2.3. Методы и правила определения полиморфных систем белков крови
Для проведения электрофореза необходимые растворы готовят на дистиллированной воде заранее. Растворы всех буферов, сахарозы и персульфата аммония хранят в холодильнике, остальные растворы можно хранить при комнатной температуре.
Растворы
| 1 . 2 0 %-ный акриламид с 8 %-ной сшивкой: |
|---|
| акриламид 96 г |
| метилен-бис-акриламид 4 г |
| вода до 500 мл |
| 2. Гелевый буфер: трис-НС1, pH 7,2 |
| трис 6 г |
| 1NHC1 МО мл |
| вода до 90 мл |
| проверить pH, при необходимости довести |
| 1 NHC1 |
| вода до 1 0 0 мл |
| Г елевый буфер для постальбумина: |
| а) трис 8,67 г |
| лимонная кислота 1,5 г |
| вода до 1 0 0 мл |
| б) смешать 1 объем электродного буфера (см. далее) и 5,25 |
| объема раствора а). |
| 3. Электродный буфер: трис-глицин, pH 8,3 |
| трис 6 г |
| глицин 28,8 г |
| вода 1 0 0 0 мл |
| Перед употреблением разводят 1:10. |
| Электродный буфер для постальбумина: |
| лития гидроокись 2 1 г |
| борная кислота 118 г |
| глицин 28,8 г |
| вода 1 0 0 0 мл |
| Перед употреблением разводят 1:10. |
| 4. Раствор аммония надсернокислого: |
| аммоний надсернокислый (персульфат 1 , 6 г |
| аммония) |
| вода до 1 0 0 мл |
| 5. 40%-ная сахароза с индикатором: |
| сахароза 40 г |
| бром-феноловый синий 0 , 1 г |
| вода 60 мл |
