и пронумеровать хромосомы, согласно стандартной номенклатуре кариотипа.
В зависимости от предполагаемого типа аномалии хромосом выбирают один из предложенных типов дифференциального окрашивания. Если предполагаются нарушения дистальных участков хромосом, то необходимо использовать дифференциальную окраску R-типа.
При кариотипическом анализе используют карты дифференциально исчерченных хромосом стандартного кариотипа. Дифференциальный рисунок каждой хромосомы исследуемого животного сопоставляют со стандартным рисунком, находят гомологичные хромосомы и присваивают каждой паре хромосом порядковый номер.
Кариотипический анализ позволяет точно определить у каждого животного: модальное число хромосом; генетический пол; наличие или отсутствие хромосомных аберраций; номер и участок хромосомы, с точностью до одного диска, затронутой обнаруженной аберрацией; частоту гипо- и гиперплоидных клеток; номера утраченных или дополнительных хромосом в клетке; частоту клеток со спонтанными структурными аберрациями хромосом; номер хромосомы со структурной аберрацией и точное местоположение измененного участка хромосомы.
5.4. Описание хромосомного набора крупного рогатого скота
Кариотип крупного рогатого скота состоит из 60 хромосом, 29 пар аутосом и половые хромосомы — 2n=60, X Y. Все аутосомы данного кариотипа представлены акроцентрическими хромосомами, постепенно убывающих в размерах. Поэтому идентификация отдельных аутосом крупного рогатого скота при рутинной окраске невозможна, для идентификации хромосом применяют дифференциальную окраску. X хромосома — крупный субметацентрик, у- хромосома — самая маленькая хромосома — субметацентрик. Эти хромосомы возможно идентифицировать при рутинной окраске. При рутинной окраске возможно идентифицировать только половые хромосомы: Х-хромосому — крупный субметацентрик и у- хромосому — самая маленькая хромосома набора. Идентификация отдельных аутосом крупного рогатого скота при рутинной окраске
невозможна. Для идентификации всех хромосом набора применяют дифференциальную окраску.
Для идентификации каждой дифференциально исчерченной хромосомы используют карты стандартного кариотипа, издаваемые Международной конференцией по стандартизации кариотипов животных.
5.5. Необходимое оборудование
1 .Одноразовые стерильные шприцы и иглы.
-
Центрифуга.
-
Стерильный культуральный бокс или настольный ламинарный бокс.
-
Термостат.
-
Холодильник.
6 . Малое лабораторное оборудование (водоструйный насос, вортекс, вариационные пипетки, пинцеты, контейнеры для окрашивания препаратов, стерилизаторы, медицинские шприцы типа «Рекорд» на 20-10-5 мл, инъекционные и специальные медицинские иглы, одноразовые шприцы и иглы, маркеры для химической посуды, парафильм).
- Лабораторные аналитические весы.
8 . Лабораторный аналитический микроскоп.
-
Дистиллятор.
-
Лабораторная посуда ( колбы вместимостью 100-500 мл, химические стаканы 50-800 мл, мерные цилиндры 10-100 мл, пробирки, чашки Петри).
11 • Предметные стекла.
-
Покровные стекла.
-
Фотооборудование (фотоувеличитель, красный фонарь, бачки для проявления фотопленки, кюветы для печатания фотоснимков, аппарат для сушки фотоснимков).
| 5.6. Нормы и стоимость цитогенетического | анализа |
|---|---|
| Нормы (в расчете на 1 чел.-день, головы) | |
| 1. Взятие проб крови | 20 |
| 2. Культивирование лейкоцитов периферической крови | 5 |
| 3. Фиксация клеток и приготовление препаратов хро- | 20 |
| мосом | |
| 4. Окраска препаратов хромосом: | |
| рутинная | 1 0 |
| дифференциальная | 5 |
| 5. Анализ препаратов хромосом, кариотипирование | 1 |
| 6 . Заключение о генетическом состоянии животного | 1 |
| Стоимость тестирования одной головы | |
| 1. Цитогенетический анализ | 170 руб. |
| 2. Цитогенетический анализ с полным кариотипиро- ванием | 350 руб. |
| 5.7. Выходные документы | |
| 1 • Протокол цитогенетического исследования. | |
| 2 . Генетический паспорт. | |
| СОДЕРЖАНИЕ | |
| Общие положения............................................................................................. | 3 |
| Методика генетической экспертизы и оценки племенной | продук |
| ции крупного рогатого скота................................................................................ | 3 |
| 1. Подтверждение истинности происхождения крупного | рогатого |
| скота по группам крови.........................................................................................4 | |
| 1.1. Необходимые материалы......................................................................4 | |
| 1.2. Правила получения и хранения образцов крови.............................. | 8 |
| 1.3. Метод и правила определения антигенного спектра | эритро- |
| ......... | 9 |
| 1.4. Определение генотипов животных по группам крови | 1 1 3 |
| 1.5. Определение достоверности происхождения ..... | 1 1 4 |
| 1.6. Необходимое оборудование............................................ | 4 1 1 0 4 |
