Рисунок 10 - Длительное хранение семени в стационарном хранилище
Существует несколько методов хранения спермы:
♦ кратковременное хранение спермы при плюсовых температурах;
♦ длительное хранение в замороженном состоянии в жидком азоте.
При кратковременном хранении спермы при температуре 2-5°С свежеполученную сперму после оценки ее качества разбавляют средой и проверяют снова под микроскопом на активность спермиев, а затем фасуют.
Сперму фасуют в стерильные стеклянные или полиэтилен-, новые ампулы, пробирки объемом по 1 мл. Для предупреждения гибели спермиев от температурного шока сперму охлаждают до температуры 2-5 С. постепенно в течение 2-3 часов. Вначале разбавленную сперму помещают в стеклянный стакан с теплой водой температурой 30 С, затем переносят в водяную баню температурой 22°С на 20 минут, после чего производят фасование.
Длительное хранение спермы в замороженном состоянии в жидком азоте при температуре минус 196 С требует соблюдения следующих условий:
-
♦ соблюдение технологии разбавления, охлаждения и замо
-
раживания спермы; ♦ непрерывное поддерживание низкой температуры в тече
-
ние всего срока хранения спермы; ♦ для перевозки спермы в жидком азоте применяют сосуды
-
Дьюара различной модификации;
♦ длительное хранение в жидком азоте замороженной спермы осуществляют в специальных стационарных биохранилищах типа ХБ-0,5, КВ-6202 и др;
- ♦ сперму быков используют для замораживания с концентрацией спермиев не менее 0,7 млрд в 1 мл и активности спермиев не ниже 8 баллов.
6. Техника безопасности работы с жидким азотом При работе с криогенным оборудованием и сжиженным азотом требуется соблюдение техники безопасности. Жидкий азот - прозрачная, бесцветная, легковоспламеняющаяся жидкость. Массовая плотность его 0,804 кг/л при давлении 760 мм рт. ст., в обычных условиях химически инертен. Попадая на открытые участки тела, он вызывает ожоги.
На длительное хранение, замороженная в жидком азоте сперма производителей, закладывается в сосуды Дьюара емкостью 50 л и стационарные биологические хранилища емкостью 200-500 л.
Техника безопасности при замораживании спермы. При замораживании спермы необходимо соблюдать общие правила безопасности при работе с жидким азотом: тщательная защита I лица, глаз, рук; наличие одежды, полностью закрывающей кожный покров тела; вентиляция помещения.
Особую осторожность следует соблюдать при оттаивании глубоко замороженной спермы в соломинках, облицованных гранулах, пакетах, так как проникший внутрь, вследствие пло
хой герметизации, жидкий азот при оттаивании быстро испаряется, резко увеличивает давление и разрывает оболочку. Для извлечения из сосудов Дьюара замороженной спермы следует использовать предварительно охлажденный металлический корцанг или большой пинцет, концы которых должны быть плотно затянуты полиэтиленовой или резиновой трубкой нужного диаметра.
Техника безопасности при работе с сосудом Дьюара. Персонал, работающий с сосудами Дьюара, (заливка жидкого азота, загрузка и выгрузка канистр со спермой, опорожнение сосуда и т.п.) обязан надевать защитные очки (лучше щитки из органического стекла) и рукавицы кожаные, асбестовые или брезентовые. Одежда не должна оставлять открытым кожный покров. Нужно избегать соприкосновения открытых участков тела с металлическими предметами, извлеченными из жидкого азота, Брюки должны быть без манжет и закрывать верх обуви. Рукавицы должны надеваться на руки свободно, чтобы при необходимости их можно было легко сбросить.
Жидкий азот имеет температуру кипения 196°С и при по-] падании на незащищенные участки тела может вызвать ожоги, j При больших концентрациях газообразного азота в помещении у человека может наступить головная боль, поэтому эффектив-1 ная вентиляция помещения при работе с азотом обязательна! Сосуды Дьюара с жидким азотом должны находиться вдали от! источников тепла.
При заливке жидкого азота в сосуд, загрузке канистр и| мешочков со спермой, опорожнении сосуда, при извлечении! гранул для осеменения необходимо надевать защитные очки и| кожаные рукавицы. При попадании жидкого азота на незащи-1 щенный участок тела его следует немедленно обмыть водой.
В теплый сосуд Дьюара, хранящийся без азота, жидкий! азот надо заливать медленно, так как быстрое заполнение сосуда! азотом приводит к выбросам жидкости- из сосуда вследствие! чрезмерно большого количества образующихся паров (особенно! у сосудов с узкой горловиной). При заливке сосудов жидким! азотом из транспортных резервуаров шланг должен быть опу»
