нем лучше всего использовать специальные многоразовые полотенца (салфетки), смоченные в одном из специальных, разрешенных к применению для этих целей дезинфицирующих растворов. Для повышения эффективности действия необходимо, чтобы дезинфицирующее средство находилось на сосках не менее 30 с. Лучше всего использовать одноразовые салфетки. Если вымя и соски сильно загрязнены, то необходимо предварительно обмыть их водой и тщательно обсушить. Остающаяся на вымени вода сильно заражена микробами и она не должна стекать по соскам.
4. Здоровое состояние вымени . Через повреждения сосков (ссадины, трещины) микроорганизмы также проникают в молоко. Поэтому очень важно следить за состоянием сосков и вовремя их лечить.
5. Борьба с маститами . Значительное влияние на обсемененность молока микрофлорой оказывает степень заболевания стада молочных коров маститом. Молоко с большим содержанием соматических клеток имеет высокую бактериальную обсемененность
Неохлажденное молоко последнего удоя нельзя смешивать с охлажденным, поскольку при этом нарушается его бактерицидная фаза и повышается биохимическая активность микроорганизмов. В стандарте определены следующие требования по бактериальной обсемененности:
– для сорта «экстра» – в пределах до 100 тыс. колониеобразующих единиц мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в 1 см3 молока;
– для высшего сорта общее количество микроорганизмов (бактериальная обсемененность методом пробы на редуктазу) должно быть не более 3 × 105 колониеобразующих единиц в 1 см3 молока; первого – не более 5 × 105 колониеобразующих единиц в 1 см3 молока. Патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы, в 25 см3 не допускаются.
Бактерии, попавшие в молоко, в результате жизнедеятельности выделяют ферменты, в частности редуктазу и другие вещества. В только что выдоенном молоке редуктаза отсутствует. Поэтому об общей бактериальной обсемененности молока можно судить по наличию данного фермента.
При нарушении санитарно-гигиенических правил получения и хранения молока количество бактерий в нем возрастает, а, следова-
тельно, увеличивается и количество фермента. Редуктаза способна обесцвечивать добавленные к молоку органические красители – раствор метиленовый голубой (метиленовая синь) или резазурин. Обесцвечивание окраски происходит тем быстрее, чем больше в молоке редуктазы, а, значит, и бактерий. Поэтому по редуктазной пробе судят о санитарных условиях получения молока и его свежести.
Определение редуктазы с метиленовым голубым. Метод основан на восстановлении метиленового голубого окислительновосстановительными ферментами, выделяемыми в молоко микроорганизмами. По продолжительности обесцвечивания метиленового голубого (табл. 13) оценивают бактериальную обсемененность сырого молока и относят его к тому или иному классу.
Таблица 13
Определение числа бактерий в молоке и установление его класса
| Продолжительность обесцвечивания метиленового голубого | Число бактерий в 1 см3 молока | Класс |
|---|---|---|
| Более 3 ч 30 мин | До 300 тыс. | Высший |
| 3 ч 30 мин | От 300 тыс. до 500 тыс. | I |
| 2 ч 30 мин | От 500 тыс. до 4 млн | II |
| 40 мин | От 4 млн до 20 млн | III |
Определение редуктазы стандартным методом
Приготовление основного раствора метиленового голубого. Берут 10 г метиленового голубого и заливают 100 см3 96 %-ного этилового спирта и оставляют в термостате на сутки при температуре 37±1 °С, затем фильтруют в термостате при той же температуре. Срок хранения раствора в термостате (t° = 37±1) составляет не более 3 мес. Из этого раствора готовят рабочий.
Приготовление рабочего раствора
Для проведения редуктазной пробы с метиленовым голубым готовят водный раствор с массовой концентрацией метиленового голубого 0,005 г/см3 . Для этого 0,5 г метиленового голубого переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят до метки прокипяченной и охлажденной до 25±2 °С дистиллированной водой. Смесь тщательно перемешивают до полного растворения. Срок хранения приготовленного раствора не более 12 мес. в банках, защищенных от света.
Для приготовления раствора метиленового голубого с массовой концентрацией метиленового голубого 0,00015 г/см3 берут 6 см3 раствора с массовой концентрацией 0,005 г/см3 и смешивают со 194 см3 дистиллированной воды. Срок хранения приготовленного раствора не более 30 сут в холодильнике.
Проведение анализа
В стерильную пробирку пипеткой отмеряют 1 см3 рабочего раствора метиленового голубого и 20 см3 исследуемого молока, закрывают резиновой пробкой, размешивают путем трехкратного переворачивания пробирки и ставят в редуктазник с температурой 37±1 °С (при его отсутствии можно использовать водяную баню для жиромеров). Уровень воды в водяной бане должен быть выше уровня молока в пробирках; пробирки предохранять от воздействия света. При постановке пробирок в баню заметить время и затем наблюдать за обесцвечиванием их содержимого через 40 мин, 2,5 и 3,5 ч. По табл. 8 оценить качество молока и определить класс, к которому оно относится по бактериальной загрязненности. Окончанием анализа следует считать момент обесцвечивания окраски молока. Остающийся небольшой кольцеобразный окрашенный слой вверху (шириной не более 1 см) или небольшая окрашенная часть внизу пробирки (шириной не более 1 см) в расчет не принимается. Появление окрашивания молока в этих пробирках при встряхивании не учитывают.
Определение редуктазы с помощью резазурина
Метод основан на восстановлении резазурина окислительновосстановительными ферментами, выделяемыми в молоко микроорганизмами. По продолжительности изменения окраски резазурина оценивают бактериальную обсемененность молока. Пробу с резазурином следует проводить не ранее, чем через 2 ч после доения.
Приготовление раствора резазурина . Взять 100 мг резазурина и растворить в 200 см3 прокипяченной, охлажденной до 25±2 °С дистиллированной воды. Срок хранения основного раствора в посуде из темного стекла не более 30 сут при температуре 8–10 °С. Из основного раствора готовят рабочий. Для приготовления рабочего раствора основной раствор разбавляют прокипяченной охлажденной дистиллированной водой при температуре 25±2 °С в соотношении 1:2,5 (к 10 см3 основного раствора прибавить 25 см3 воды). Содержание резазурина в рабочем растворе 0,014 %. Срок хранения
рабочего раствора в холодильнике в посуде из темного стекла – не более 3 сут.
Проведение анализа
В стерильную пробирку отмеряют пипеткой 1 см3 рабочего раствора резазурина и 10 см3 молока. Закрыть пробирку резиновой стерильной пробкой, перемешать, медленно переворачивая ее 3 раза, размешать содержимое и поставить в редуктазник (водяную баню) при температуре 37±1 °С. Уровень воды в редуктазнике после погружения пробирки должен быть несколько выше уровня жидкости в пробирке (предохранять пробирки от прямых солнечных лучей). Время погружения пробирки в редуктазник (водяную баню) следует считать началом анализа. Показания снимают через 1 и 1,5 ч. Появление окрашивания молока в пробирке при встряхивании не учитывают. По истечении 1 ч пробирки вынимают из редуктазника. Пробирки с молоком, имеющие серо-сиреневую окраску до сиреневой со слабым серым оттенком, оставляют в редуктазнике еще на 30 мин.
Пользуясь табл. 14, определить качество молока и установить его класс.
Таблица 14
Определение числа бактерий в молоке и установление его класса
| Продолжитель- ность изменения цвета | Окраска молока | Число бактерий в 1 мл молока | Класс |
|---|---|---|---|
| Через 1,5 ч | Серо-сиреневая до сиреневой со сла- бым серым оттен- ком | До 300 тыс. | Выс- ший |
| Через 1 ч | Серо-сиреневая до сиреневой со сла- бым серым оттен- ком | От 300 тыс. до 500 тыс. | I |
| Через 1 ч | Сиреневая с розо- вым оттенком или ярко-розовая | От 500 тыс. до 4 млн | II |
| Через 1 ч | Бледно-розовая или белая | От 4 млн до 20 млн | III |
Для более точного определения общего количества бактерий проводят микробиологические исследования. Метод основан на способности мезофильных и аэробных микроорганизмов размножаться на плотном питательном агаре при 30±1 °С в течение 72 ч. Для этого производится посев исследуемого продукта в бактериологические чашки Петри.
Соматические клетки – это клетки тканей и органов животного. В частности, из них состоят и ткани молочных проходов и альвеол, участвующих в секреции молока. В вымени происходит постоянное обновление клеток эпителиальной ткани. Старые клетки отмирают и отторгаются (выделяются вместе с молоком).
Кроме того, в молоке имеются защитные клетки из крови (лейкоциты – белые кровяные тельца), которые организм мобилизует для защиты от возбудителей болезни, проникших в вымя.
Соматические клетки постоянно присутствуют в молоке. у основной массы здоровых животных их количество не превышает 200–300 тыс./см3 .
Производители молока на фермах ошибочно полагают, что, удалив из молока большую часть соматических клеток механическим путем (с помощью фильтрации и сепаратора), можно повысить качество производимого продукта. Однако это не так, ведь соматические клетки являются не причиной заболевания (мастита) животных, а его следствием. Соответственно, удаляя таким способом соматические клетки, производители молока маскируют некачественное, а иногда и опасное для здоровья человека молоко под молоко хорошего качества.
Содержание соматических клеток подвержено колебаниям (табл. 15) в зависимости от сезона года [1].
Содержание соматических клеток в молоке зависит от следующих факторов:
– наследственная предрасположенность (порода, семейство коровы, линия быка). В ряде стран (Швеция, Дания, Германия и др.) проводится оценка племенной ценности коров и быковпроизводителей по содержанию соматических клеток. Это важное условие для селекционного улучшения стада и повышения устойчивости вымени к заболеванию;
– стадия лактации : на первых и последних неделях лактации, а также на последних неделях стельности животные подвержены заболеванию вымени;
Содержание соматических клеток в молоке здоровых лактирующих коров
в зависимости от сезона года
| Количество соматических клеток, тыс/см3 | Процент поголовья стада | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Зима | Весна | Лето | Осень | Удельное чис- ло животных стада, % | |
| 100 | 2,9 | 4,06 | 14,3 | 8,1 | 7,1 |
| 150 | 10,8 | 20,6 | 39,5 | 29,7 | 24,8 |
| 200 | 28,1 | 31,7 | 41,2 | 37,1 | 34,4 |
| 250 | 30,9 | 24,6 | 30,4 | 10,1 | 17,5 |
| 300 | 15,8 | 14,3 | 0,8 | 8,1 | 10,0 |
| 350 | 7,2 | 2,4 | 0,8 | 4,7 | 3,9 |
| 400 | 2,9 | 1,6 | 0 | 2,2 | 1,5 |
| 450 | 1,4 | 0,8 | 0 | 0 | 0,6 |
| 500 | 0,7 | 0 | 0 | 0 | 0,2 |
– форма вымени : животные с малопригодным к доению выменем (неправильная форма, так называемое «козье вымя»), плохо выдаиваются, чаще болеют маститом. Низкое расположение вымени повышает опасность повреждения и проникновения инфекции;
– нарушенный обмен веществ: некоторые животные, имея напряженный обмен веществ и сниженную иммунную защиту, быстрее реагируют на нарушения извне повышением содержания соматических клеток (стресс-чувствительность);.
– пора года: самый высокий уровень соматических клеток регистрируется, например, в Германии, в летний период;
– ошибки при доении: неправильное надевание доильных аппаратов, слишком продолжительный период доения и отсутствие контроля за выдаиванием способствуют возникновению болезней вымени;
– несовершенство и дефекты доильного оборудования: слишком высокий или низкий уровень вакуума, колебания вакуума, высокая или малая частота пульсаций, изношенная сосковая резина вызывают раздражение вымени;
– недостаточная гигиена: антисанитария в коровнике, несоблюдение правил санитарного ухода за выменем и/или доильным оборудованием, грязные руки дояра, ранки или иные механические
