подтверждение соответствия происхождения племенного материала данным племенного учета;

выявление генетических аномалий;

заключение о племенной ценности животного.

1. Подтверждение истинности происхождения крупного рогатого скота по группам крови

Наиболее информативным и самым отработанным и доступным методом подтверждения достоверности происхождения особи является метод иммуногенетического контроля, который проводится путем определения групп крови у родителей и потомков с последующим анализом их соответствия (достоверности происхождения).

Метод основан на законах кодоминантного наследования и неизменяемости антигенного состава крови в течение жизни животного. Выявление у потомков групп крови, отсутствующих у отца или матери, является основанием для исключения из родословной одного из родителей.

Подтверждение истинности происхождения животных проводится в два этапа:

первый — паспортизация животных, включающая выявление антигенов эритроцитов в крови свиней и определение генотипов по локусам групп крови.

второй — выявление соответствия происхождения животных данным племенного учета по генотипам групп крови.

Антигены эритроцитов в крови крупного рогатого скота определяют гемолитическими тестами с помощью реагентов, содержащих специфические к ним антитела.

Каждому антигену соответствует строго определенное антитело. Для определения групп крови используют стандартные сывороткиреагенты, полученные от животных — доноров и содержащие маркированные антитела на определенные антигены.

1.1. Необходимые материалы

Реагенты для определения групп крови крупного рогатого скота. Комплемент из кроличьей сыворотки, консерванты крови, реактивы.

Реагенты

Это моноспецифические сыворотки, полученные путем сложной изоиммунизации крупного рогатого скота, предназначенные для определения групп крови.

Технические условия (ТУ)

1. Должны быть высокоспецифичными, т.е. реагировать только с одним антигеном.

2. Проходят обязательную унификацию в головном центре по экспертизе племенной продукции (материала).

3. Набор реагентов включает не менее 50 наименований сывороток для определения антигенов 1 0 систем.

4. Расфасованы во флаконы емкостью 10-20-50 мл по 125-250500 доз в каждом.

5. Маркировка флаконов: указывается предприятие-изготовитель, наименование иммуноспецифической сыворотки к определенному антигену, титр, количество в мл и дозах, номер серии, дата изготовления (месяц, год), срок годности, номер госконтроля, условия хранения.

6 . Дозой реагента считается 0,1 мл (две капли) рабочего раствора в замороженном состоянии.

1. Реагент должен обладать высокой активностью, т.е. иметь концентрацию антител, достаточную для выявления соответствующих антигенов в любом образце крови.

8 . Физические свойства: жидкость соломенно-желтого цвета до светло-коричневого. Не должно быть механических примесей и плесени. При длительном хранении допускается наличие осадка на дне.

1. Хранят реагенты в морозильных камерах при температуре не выше -20°С.

2. Срок годности — 2 года со дня изготовления при соблюдении правил хранения.

Комплемент

Это вещество, которое катализирует реакцию гемолиза при соединении антител, содержащихся в сыворотках, с антигенами эрит

роцитов крови. Комплемент содержится в нормальной сыворотке крови животных.

В реакции гемолиза при определении антигенов крови крупного рогатого скота используют кроличий комплемент.

Техника приготовления кроличьего комплемента

1. Кровь у кроликов можно брать двумя способами:

а) непосредственно из сердца — (кролика фиксируют на спине, вводят в ушную вену 1 мл теопентала, животное через 1 - 2 мин засыпает); из сердца длинной иглой берут 40-50 мл крови.

б) из ушной вены — (смазывают край уха ксилолом или толуолом, делают продольный разрез ушной вены размером 3 - 5 мм, кровь собирают в чашку Петри).

1. Кровь выдерживают при комнатной температуре 1,5-2 ч до свертывания и выделения сыворотки.

2. Отстоявшуюся сыворотку сливают в центрифужные стаканы и центрифугируют при 3000-3500 мин" 1 — 10 мин.

3. Сыворотку рекомендуется абсорбировать эритроцитами крупного рогатого скота, так как у некоторых кроликов встречаются естественные антитела типа гемолизинов.

4. Готовую сыворотку расфасовывают во флаконы по 10-20 мл.

Для повышения качества и активности комплемент готовят путем смешивания сывороток крови, полученных в один и тот же день от 1 0 и более кроликов.

ТУ на комплемент

1. Хранят комплемент при температуре -20°С до 6 месяцев.

2. Комплемент, сохранявшийся более 6 месяцев, используют после усиления его активности путем смешивания в различных соотношениях (1:1, 1:2, 1:3 и 1:4) со свежеполученным. Соотношение зависит от истинной активности хранившегося и свежеполученного комплемента.

3. Активность комплемента проверяют первый раз после трехмесячного хранения путем постановки реакции гемолиза с 1 0 - 2 0 образцами крови.