В настоящее время на основе достижений молекулярной генетики разработаны эффективные методы, которые определяют связь локусов количественных признаков с продуктивностью и заболеваниями животных. Селекция, основанная на связи локусов и сцепленных с ними генов, носит название маркерзависимой селекции 47, 48, 175 .
Одним из перспективных направлений остается изучение генетического разнообразия популяции животных, направленное на повышение эффекта селекции и сохранение генофонда пород. Исследования показали, что таким путем можно увеличить продуктивность и сохранность молодняка за счет повышения резистентности к заболеваниям. К настоящему времени при помощи ДНК-маркеров выявлено более ста генетических дефектов сельскохозяйственных животных, которые существенно влияют на их племенные качества. Ряд генетических дефектов определяют по измененной структуре ДНК. Названия более десяти генетических дефектов должны вноситься в племенные каталоги и фиксироваться при продаже – покупке животных, также их семени либо эмбрионов (для трансплантации), которые не могут использоваться в селекции без анализа на эти наследуемые нарушения. Наличие таких дефектов значительно снижает выход телят из-за повышенной гибели эмбрионов и повышает отход молодняка в результате того, что некоторые наследуемые дефекты снижают резистентность к бактериальным заболеваниям, а скрытые заболевания уменьшают продуктивность. Так, дефицит функции лейкоцитов, связанный с пониженной сопротивляемостью к бактериальным инфекциям, передающийся потомкам, вызывает заболевания желудочно-кишечного тракта и легких молодняка, что может приводить к летальному исходу 175 .
Вторым направлением молекулярной генетики, основанным на использовании генов-маркеров, является изучение полиморфизма структурных генов, вносящих существенный вклад в формирование продуктивности и использование их в маркерной селекции. Для молочного скота это, прежде всего, гены каппаказеина, лактоглобулинов молока, гены соматотропина, пролактина и др. Типы некоторых генов, как, например, ген каппаказеина, сейчас вносят в племенные документы, так как, с одной
стороны, необходимо контролировать генетическое равновесие в популяциях по типам этого гена, с другой – некоторые типы гена влияют на количество белка в молоке 175 .
Широко используется технология анализа микро- и минисателлитов ДНК, позволяющая получить данные о генетическом расстоянии между отдельными популяциями крупного рогатого скота, уровень гетерозиготности, определять достоверность происхождения на уровне 100%-ной надежности и регистрировать истинную кровность (или уровень инбридинга) не по теоретическим расчетам, используя данные о происхождении, а по содержанию генетического материала того или иного предка 175 .
В последние десятилетия молекулярная биология и молекулярная генетика обогатились рядом оригинальных методических подходов, которые принципиально изменили возможности указанных наук благодаря простоте, быстроте анализа и высокой информативности. Одним из них является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), легший в основу современной диагностики 121 .
Стандартным методом выявления полиморфизма структурных генов на уровне ДНК является ПЦР-анализ с последующим рестрикционным гидролизом образующихся фрагментов (ПЦР-ПДРФ). Суть метода заключается в амплификации определенного фрагмента ДНК, содержащего анализируемую точковую мутацию, с последующим расщеплением его соответствующей эндонуклеазой. По длине фрагментов (ПДРФ) делают вывод об отсутствии или наличии данного аллеля у индивидуума. Данный метод получил широкое распространение благодаря своей простоте и надежности. Он рутинно используется для диагностики аллельного полиморфизма ряда генов-кандидатов, связанных с локусами хозяйственно-полезных признаков сельскохозяйственных животных 209 . Данные, полученные современными методами оценки полиморфизма длин рестриктных фрагментов (ПДРФ) ДНК человека и животных, послужили основанием для использования в качестве генетических маркеров вариабельных участков ДНК 126 . Бесспорным преимуществом данного метода является возможность экспертизы не только мо-
лока, крови, но и другого материала, например, спермы или ткани 290 .
Маркер-зависимая селекция имеет ряд преимуществ перед традиционными методами селекции (MAS). Она не учитывает изменчивости хозяйственно-полезных признаков, обусловленной внешней средой. ДНК-технологии позволяют определить генотип животного независимо от пола, возраста и физиологического состояния особи. Селекция по генотипу способствует идентификации и быстрому введению предпочтительных аллелей ресурсных генов в популяции реципиентов с целью повышения продуктивности и устойчивости к заболеваниям улучшаемых пород животных. Так, многие ученые отмечают, что с помощью ДНК-диагностики можно определить наличие гена в клетке, генотип еще не родившегося приплода, получить желаемый генотип, диагностировать дефекты и т.д. Авторы также указывают на признаки, которые фенотипически выражаются у животных одного пола, например, показатель молочной продуктивности. Однако необходимо принимать во внимание, что генотипическое влияние на признак отца и матери одинаковое. Следовательно, отбор по ним надо проводить у особей одного и другого пола. Есть признаки, которые проявляются только в определенном возрасте и физиологическом состоянии, а ДНКтехнология позволяет диагностировать ген независимо от вышеперечисленных факторов 86, 96, 116, 136, 143, 207 .
В скотоводстве основным направлением ДНК-технологий, применяемых к животным, является необходимость исследований их генофонда и создание желательных генотипов 49 .
ПЦР и молекулярная гибридизация ДНК специфичны в той мере, в какой уникальны нуклеотидные последовательности генов каждого живого организма – от вируса до человека. На практике молекулярно-биологические методы чаще всего используются в диагностике вирусных инфекций. ПЦР-методы незаменимы и при выявлении ряда других инфекционных агентов (например, микоплазм, анаэробных микробов и др.), оценки их вирулентности, определения устойчивости микрофлоры к антибиотикам 121, 221 . Найманов А.Х. с сотрудниками считают, что этот способ позволяет получить положительный резуль-
