Продолжение · 22

Таблица 67

Содержание йода в образцах кормов и тканей животного организма при разных способах их подготовки, мкг/кг (X ± S x)

Наиболее точным, но энергоёмким является способ № 1, так как при минерализации проб проводимых в колбах Шонигера в атмосфере кислорода, получаются результаты с небольшой погрешностью.

В данном случае при сжигании органического вещества в кислороде, в присутствии катализатора платины, образуются диоксид углерода, йод и вода, причём йод не подвергается потерям. Поэтому данный метод был взят в качестве контрольного.

При сравнении результатов, при подготовке материала способом № 2 и способом № 3 с контрольным, наибольшей точностью отличаются результаты полученные способом подготовки органического вещества способом № 3, так как в образцах подготовленных этим способом достоверных различий по отношению к способу № 1 (контрольному) не отмечается. Кроме того, при многократном определении йода в образцах, после их подготовки способом № 3, сходимость результатов варьирует в пределах 1,3 %. Способ № 2 является не точным, так как при подготовке материала происходит не полное сгорание углеводов, что затрудняет в свою очередь определение йода.

В связи с этим, в качестве подготовки органического вещества необходимо использовать способ № 3, а определение количества в нём йода проводить с помощью цветной реакции с бриллиантовой зеленью, что менее энергоёмко и более приемлемо в условиях биохимических лабораторий.

Оценка биологической доступности йода у хряков-производителей при его подкожной имплантации. При кормлении хряков-производителей, в их организм поступали микроэлементы в следующих суточных количествах: медь - 50-54 мг, цинк - 251-280, марганец - 136-204, кобальт - 5 мг, йод - 0,37-0,39 мг. Таким образом, дефицит по йоду составлял 63-65 %. В I-ой контрольной группе животные находились на дефицитном по йоду рационе, во II-ой опытной его дефицит восполняли через премикс, в III-ей, IV-ой, V-ой опытных группах методом подкожной имплантации в дозах соответственно 12,0, 21,0, 24,0 мг/гол.

Критерием оценки биологической доступности йода у хряков являлось изучение воспроизводительной способности (табл. 68).

Таблица 68

Влияние различных доз и способов введения йода хрякам - производителям на результаты осеменения свиноматок (X ± S x)

Наивысшая оплодотворяемость и многоплодие свиноматок были при использовании семени от хряков IV и V групп. При этом от 100 осеменённых маток получили наибольшее количество поросят - 852 и 855 голов. Так же количество семени у хряков IV и V групп было выше, где объём эякулята составлял в IV - 278±1,4 мл и в V - 275±1,6 мл, при концентрации 254,5±0,005 млн/мл и 255±0,008 млн/мл, в то время как в I, II и III группах объём составлял соответственно 192±2,4 мл; 250±1,8 мл; 234±1,1 мл, при концентрации соответственно 150±0,006 млн/мл; 215±0,003 млн/мл; 208±0,002 млн/мл.

Полученные данные свидетельствуют о высокой эффективности, а следовательно биологической доступности йода, применяемого методом однократной подкожной имплантации хрякам-производителям в дозах от 12,0 до 21,0 мг/гол. При использовании данной дозы воспроизводительная способность хряков выше, чем при использовании йода через премикс.

Научно-обоснованной величиной считается уровень содержания йодсвязанного белка в сыворотке крови животных 472,77-512,17 нмоль/л. Исследованиями установлено, что уровень содержания йодсвязанного белка в сыворотке крови хряков-производителей контрольной группы находится в пределах низкой величины с колебаниями 242-268 нмоль/л (табл. 69).

После однократного введения препарата, а так же перорального применения, уровень содержания йодсвязанного белка в сыворотке крови первоначально изменился во II опытной группе и составил 315,18 нмоль/л, в то время как в I контрольной группе этот показатель составил 242,69 нмоль/л, на 150 день достиг оптимального уровня, и равнялся в III - 483,80±4,037 нмоль/л (Р<0,001), в IV – 487,74±2,832 нмоль/л (Р<0,001), в V – 504,29±3,216 нмоль/л (Р<0,001).

Таблица 69

Динамика содержания йодсвязанного белка в сыворотке

крови, нмоль/л (X ± S x)

Количество йодсвязанного белка в сыворотке крови находилось на оптимальном уровне в зависимости от доз в течение разного периода:

- При введении дозы йода III опытной группе 12,0 мг/гол., на 240 день уровень йодсвязанного белка в сыворотке крови снижался до первоначального, и равнялся 280,51±2,877 нмоль/л (Р<0,001), на 280 день 206,44±3,603 нмоль/л (Р>0,05).

- При введении доз йода IV и V опытным группам, соответственно 21,0-24,0 мг/гол, содержание йодосвязанного белка в сыворотке крови находилось на оптимальном уровне весь учётный период и дальнейшее увеличение дозы нецелесообразно, из-за окончания периода интенсивного использования хряков-производителей, который составляет 210-240 дней.

Следует отметить, что во II опытной группе уровень содержания йодсвязанного белка в течение всего учётного периода колебался от 299,42±4,336 до 346,70±3,833 нмоль/л, в то время как в контроле его уровень был ниже, и составлял от 242,69±8,399 до 267,90±3,603 нмоль/л.

Для полной оценки секреторной активности щитовидной железы хряков-производителей, нами определён уровень содержания тироксинсвязывающего глобулина в крови (табл. 70).

Таблица 70

Уровень содержания тироксинсвязывающего глобулина в крови, мг/л (X ± S x)

Достоверное повышение тироксинсвязывающего глобулина в крови хряков-производителей произошло в 15- месячном возрасте или через 90 дней после введённого препарата йода во II, III, IV и V группах, и в 21- месячном возрасте или через 280 дней после введённого препарата йода во II, IV и V группах. Это указывает на более активное связывание тироксина и препятствие его действию на клетки мишени. Действие на клетки мишени осуществляется свободным тироксином (табл. 71).

Таблица 71

Уровень содержания свободного тироксина в крови, пмоль/л (X ± S x)

Так, в III опытной группе уровень свободного тироксина составил 16,25±0,793 пмоль/л (Р<0,01), в IV - 16,10±0,289 пмоль/л (Р<0,001), и в V - 12,05±0,953 пмоль/л (Р<0,05), в то время как в контроле 7,10±0,129 пмоль/л. Следует отметить, что во II опытной группе, между контролем достоверных различий в концентрации свободного тироксина в крови не наблюдалось.

Поступивший йод в организм хряков-производителей, повышает у них секреторную активность щитовидной железы, что подтверждается концентрацией свободного тироксина в крови. Трийодтиронин, который образуется путём дейодирования свободного тироксина, повышает интенсивность обменных процессов, уровень которых при недостатке йода несомненно снижен.

В уровне содержания общего белка и белковых фракций (табл. 72) у хряков - производителей IV опытной группы, особенно отмечались изменения на 90 день после имплантации.

Таблица 72

Уровень содержания общего белка и его фракций в сыворотке

крови, г/л (X ± S x)

Так же отмечено повышение содержания общего белка и его фракций альбуминов и γ-глобулинов (рис. 14, 15).

Рисунок 14. Уровень содержания общего белка и его фракций в сыворотке крови хряков-производителей через 90 дней, г/л

Рисунок 15. Уровень содержания общего белка и его фракций в сыворотке кро ви хряков-производителей через 90 дней, г/л

Так, уровень содержания общего белка в сыворотке крови хряков-производителей (Р<0,01) повысился, и составил 86,00±1,150 г/л, в то время как в контроле составлял 81,00±0,580 г/л. В составе общего белка произошло увеличение количества альбуминов и составило 45,03±1,700 г/л (Р<0,05), в то время как в контроле их количество составляло 36,05±0,490 г/л.

Данное количество альбуминов находится в пределах физиологической величины, и указывает главным образом на улучшение их связывающей способности и транспорта малорастворимых веществ.

Количество γ - глобулинов так же увеличилось, и составило 20,93±0,880 г/л (Р<0,05), в то время как в контроле их количество составляло 15,00±0,810 г/л. Данное увеличение фракций альбуминов и γ - глобулинов, произошло за счёт снижения α и β - глобулинов. Однако данные показатели находятся в пределах физиологической величины. Повышение уровня содержания γ – лобулина указывает на обеспечение гуморальной защиты организма, так как именно он является носителем иммуноглобулинов классов G, А, М, D, E.

При расщеплении жизненно важного, непосредственно участвующего в процессах тканевого дыхания, сложного белка гемоглобина, путём восстановления его конечного продукта расщепления биливердина, образуется билирубин, который может увеличиваться при повышенном гемолизе эритроцитов. В данном случае йод может служить катализатором синтеза гемоглобина, однако интерес заключается в изучении интенсивности распада гемоглобина. Поэтому был выбран критерий оценки распада гемоглобина по уровню содержания билирубина в сыворотке крови (табл. 73).

Таблица 73

Уровень содержания билирубина в сыворотке крови, мкмоль/л

(X ± S x)

Продолжение · 23

Содержание билирубина у подопытных животных находилось в пределах физиологической величины. Йод независимо от способа его введения и дозы существенного влияния на содержание билирубина в сыворотке крови не оказал.

Одним из важнейших показателей оценки липидного обмена, является содержание холестерина в крови (табл. 74), который является незаменимым компонентом всех клеточных структур. Как правило, гипофункция щитовидной железы способствует гиперхолестеринемии, и поэтому не исключено влияние на холестериновый обмен важнейшего микроэлемента йода, введённого методом однократной подкожной имплантации, так как его уровень поступления прямо коррелирует с активностью щитовидной железы.

Таблица 74

Уровень содержания холестерина в сыворотке крови, ммоль/л

(X ± S x)

Содержание холестерина достоверно снижалось (Р<0,01) во II опытной группе в течение всего учётного периода, а так же в IV и V опытных группах на 90-ый и 280-ый день учётного периода, что объясняется повышением функционального состояния щитовидной железы.

При повышении активности щитовидной железы, может увеличиваться связывающая способность альбуминов с кальцием (табл. 75).

Таблица 75

Уровень содержания общего кальция в сыворотке крови, ммоль/л

(X ± S x)

Повышение (Р<0,01) кальция в сыворотке крови хряков-производителей наблюдалось во II опытной группе в течение всего учётного периода, а так же в IV опытной группе на 90-ый день. Так, в IV опытной группе этот показатель был равен 3,40±0,120 ммоль/л, в то время как в контроле 3,30±0,170 ммоль/л.

Уровень содержания фосфора неорганического в сыворотке крови хряков- производителей служит одним из критериев оценки минерального обмена, а так же функционального состояния паращитовидных и околощитовидных желёз. Так, например, снижение фосфора в крови хрячков возможно при гиперфункции паращитовидных желёз и гипофункции околощитовидных желёз (когда увеличивается секреция паратгормона и уменьшается выработка кальцитонина). Повышение фосфора в крови может быть вызвано уменьшением секреции паратгормона, когда наступает торможение реабсорбции фосфора в почках. Увеличение кальцитонина стимулирует реабсорбцию фосфора в почках и может привести к гиперфосфатемии. Данные по содержанию фосфора неорганического в сыворотке крови подопытных хряков приведены в таблице 76.

Таблица 76

Уровень содержания фосфора неорганического в сыворотке крови, ммоль/л

(X ± S x)

В сыворотке крови подопытных хряков достоверных различий по содержании фосфора неорганического не наблюдалось.

В обмене веществ, так же огромное значение имеет натрий (табл. 77).

Таблица 77

Уровень содержания натрия в плазме крови, ммоль/л (X ± S x)

Он участвует в поддержании осмотического давления внеклеточной жидкости, кроме того, является важным компонентом буферных систем. Однако в содержании натрия в плазме крови хряков в опытных группах достоверных различий не установлено. Данное содержание натрия является предельно допустимой физиологической величиной, что указывает на положительное влияние йода на минеральный обмен, протекающий у хряков - производителей.

Другим важно необходимым элементом в плазме крови является калий (табл. 78).

Таблица 78

Уровень содержания калия в плазме крови, ммоль/л (X ± S x)

Как правило, калий и натрий являются энергозависимыми элементами, которые должны находиться в организме хряков в правильном соотношении.

Однако в опытных группах по отношению к контрольным аналогам достоверных различий не было установлено, уровень содержания калия в плазме крови хряков находился в пределах физиологической величины.

Эритроциты имеют определённую массу и в связи с этим могут оседать в крови, предотвращённой от свёртывания. Скорость их оседания зависит от физико-химических свойств плазмы и как правило от физиологического состояния животных. Скорость оседания эритроцитов в крови подопытных животных приведена в таблице 79.

Таблица 79

Скорость оседания эритроцитов в крови, мм/ч (X ± S x)

При определении скорости оседания эритроцитов значительных изменений в III, IV и V опытных группах по отношению к контрольным аналогам не установлено, однако во II опытной группе в течение всего учётного периода отмечается (Р<0,001) повышение скорости оседания эритроцитов. Так, во II опытной группе при первоначальном взятии крови скорость оседания эритроцитов составляла 9,33±0,330 мм/ч, на 90 день 12,00±0,580 мм/ч, на 280 день11,0±0,330 мм/ч, в то время как в контроле соответственно 3,00±0,580; 3,00±0,580; 2,00±0,580. Данное повышение скорости оседания эритроцитов объясняется тем, что йод, поступивший в организм путём всасывания через желудочно-кишечный тракт в меньшей степени связывается с альбуминами, чем йод, поступивший парентерально (подкожной имплантацией), и далее оставшийся свободный йод, в частности в менее растущем организме, в связи с разницей в интенсивности обменных процессов изменяет физико-химические свойства плазмы, а также массу эритроцитов.

По количеству эритроцитов судили о влиянии йода на функции кроветворных органов (табл. 80).

Таблица 80

Количество эритроцитов в крови, ×10¹²/л (X ± S x)

Результаты таблицы показали, что количество эритроцитов в крови хряков-производителей находилось в пределах физиологической величины, достоверных различий во II, III, IV и V опытных группах между контрольными аналогами не отмечалось. Изменений в эритроцитарном гомеостазе в сторону стимуляции эритропоэза не происходило, как это наблюдалось в молодом растущем организме свиней. Количество лейкоцитов во всех группах находилось в пределах физиологической величины (табл. 81).

Таблица 81

Количество лейкоцитов с лейкоцитарной формулой (X ± S x)

Окончание таблицы 81

Данное количество лейкоцитов в крови хряков исключает наличие стресса вследствие имплантации. Количество гемоглобина зависит от функции кроветворных органов, обеспеченности организма полноценным белком, железом, кобальтом, медью и йодом (табл. 82).

В III-ей опытной группе, на 90-ый день учётного периода повысилось (Р<0,05) содержание гемоглобина на 6,4 %. Так же повышение отмечалось в IV-ой и V-ой – на 90-ый день и 280-ый от 3,6 % (Р<0,05) до 18,8 % (Р<0,01).

Таблица 82

Уровень содержания гемоглобина в крови, г/л (X ± S x)

Продолжение · 24

Во II-ой опытной группе достоверных различий между контрольными аналогами не наблюдалось. Количество гемоглобина в расчёте на один эритроцит в IV-ой группе составляло 21 Пг, что выше чем в контроле на 26 %. Введение данной дозы профилактирует физиологическую анемию хряков.

Секреторным продуктом щитовидной железы, синтезируемым тиреоцитами и выделяемым ими в полость фолликула является гликопротеид тиреоглобулин, который, накапливаясь и конденсируясь в полости фолликула, становится основной частью интрафолликулярного коллоида (табл. 83).

Таблица 83

Уровень содержания тиреоглобулина в крови, нг/мл (X ± S x)

Увеличение тироглобулина в крови во всех опытных группах (II-ой, III-ей, IV-ой и V-ой) от 33 до 200 % (Р<0,01) указывает на активизацию его синтеза в полости фолликула. Значительное снижение титра антител к тиреоглобулину отмечалось с 15 месячного возраста (табл. 84).

Таблица 84

Титр антител к тиреоглобулину в крови, мг/мл (X ± S x)

Так, в III-ей, IV-ой и V-ой группах снижение составило в 7-8 раз по отношению к контрольным аналогам.

Снижение титра антител к микросомальной фракции тиреоцитов так же происходило во всех имплантированных йодом группах (табл. 85).

Таблица 85

Титр антител к микросомальной фракции тироцитов в крови, мМЕ/л (X ± S x)

Особенно, чёткая динамика в снижении на 81-82 % по отношению к контрольным аналогам прослеживалась в возрасте 15 месяцев. Однако во II-ой опытной группе достоверных различий в титре антител между контролем не наблюдалось. Увеличение циркулирующих антитиреоидных аутоантител сочеталось с низкой секреторной активностью в I-ой и II-ой группах, что указывает на скрытые формы гипотиреозов. Большое значение в изучении физиологической регуляции щитовидной железы имеет определение уровня содержания тиреотропного гормона (табл. 86).

Таблица 86

Уровень содержания тиреотропного гормона в крови, мМЕ/л (X ± S x)

При исследовании уровень содержания тиреотропного гормона в крови хряков-производителей, особенно в возрасте 15 месяцев снижался в III-ей, IV-ой и V-ой группах на 46-65 % (Р<0,01). Во II-ой опытной группе между I-ой контрольной достоверных различий не отмечалось.

На основании уровня содержания общего тироксина в крови, установили активность щитовидной железы хряков-производителей (табл. 87).

В течение всего учётного периода, особенно в возрасте 15 месяцев отмечалось повышение содержания общего тироксина во всех опытных группах на 52-132 % (Р<0,01), что указывает на нормализацию эндокринного гомеостаза.

В состав общего тироксина входит свободный и связанный. Как известно, из свободного тироксина в клетках мишенях путём дейодирования осуществляется образование трийодтиронина.

Таблица 87

Уровень содержания общего тироксина в крови, нг/мл (X ± S x)

Таким образом процесс снабжения гормонами зависит не только от щитовидной железы, но и от скорости образования трийодтиронина вне её (табл. 88).

Таблица 88

Уровень содержания общего трийодтиронина в крови, нг/мл (X ± S x)

Повышение уровня содержания трийодтиронина на 96-224 %% (Р<0,01) указывает на улучшение биологической доступности йода, интенсивности обменных процессов, уровень которых, несомненно, снижен.

На долю общего трийодтиронина, повышался в большей части свободный (табл. 89).

Таблица 89

Уровень содержания свободного трийодтиронина в крови, пмоль/л (X ± S x)

Небольшое увеличение свободного трийодтиронина отмечалось во II-ой опытной группе, что свидетельствует о незначительном повышении обменных процессов. Отмечалось повышение концентрации свободного трийодтиронина у животных в возрасте 15 месяцев в III-ей, в IV-ой и V-ой опытных группах на 76-90 % (Р<0,01). Данное повышение концентрации свободного трийодтиронина в крови хряков указывает на улучшение биологической доступности йода и интенсивности обменных процессов.

Биологическая доступность йода у свиноматок при его подкожной имплантации. Известно, что в яичнике взрослых свиноматок может созревать 25-30 и более яйцеклеток, а у молодых в среднем до 20. С учётом этого за один опорос от свиноматки, при оптимальных условиях, можно получать гораздо больше поросят. В создании оптимальных условий большую роль играет полноценное кормление свиноматок. С учётом физиологических особенностей свиноматок, а именно при подготовке к осеменению, кормили их по более высоким нормам, чем маток в первые месяцы супоросности. Низкая потребность маток в первые 84 дня супоросности объясняется относительно невысоким уровнем обмена веществ и очень малым отложением питательных веществ в плодах. В связи с возрастанием потребности свиноматок в энергии и питательных веществах, в период лактации, нами строго учитывался энергетический уровень рационов. Таким образом, особенности в потребностях свиноматок обуславливают необходимость дифференцировать нормы кормления с учётом физиологических периодов (холостой, супоросный – первый и второй период, лактации). С учётом этого (по нормам ВАСХНИЛ) для свиноматок всех трёх опытов были составлены рационы кормления (табл. 90, 91).

В состав рационов кормления свиноматок во все физиологические периоды включали: дерть пшеничную, дерть ячменную, дерть гороховую, картофель, мясо-костную муку, хвойную муку, дрожжи сухие, трикальцийфосфат, соль поваренную, кобальт углекислый, медь сернокислую, марганец сернокислый, цинк сернокислый, йодид калия, витамины Д, Е, В₂, В₅, В₁₂. Однако следует отметить, что при включении в кормовые смеси микроэлементов, между ними может происходить взаимодействие. Так, например, при взаимодействии йодида калия и меди сернокислой образуется йодистая медь, которая нерастворима в воде и эффективность этих микроэлементов в организме животных снижается. Кроме того, йод снижает активность тиоловых ферментов корма и окисляет липоевую (липоновую, тиоктоновую) кислоту,являющуюся коферментом многих оксиредуктаз, а это в свою очередь снижает переваримость и усвояемость кормов в рационе. При контакте йодида калия с трикальцийфосфатом образуется йодид кальция, образование которого нежелательно, поскольку данное соединение нерастворимо и в животном организме не усваивается. На основании вышеизложенных взаимодействий невозможно в рационах точно учитывать и удовлетворять потребность в йоде, а так же утверждать о сбалансированности рационов. Тем не менее, рационы свиноматок были сбалансированы по нормам ВАСХНИЛ (в том числе и по йоду).

Таблица 90

Рационы кормления свиноматок (на голову в сутки)

Таблица 91

Рационы кормления свиноматок (на голову в сутки)