эпизоотологической и эпидемиологической обстановки по данной инфекции, нанося большой экономический ущерб сельскому хозяйству. Пастереллез – как зооантропонозная болезнь представляет большую проблему, как для ветеринарии, так и для медицины.
Возбудители пастереллезов относятся к семейству Pasteurellaceae, роду Pasteurella. Род включает виды multocida, haemolytica, pneumotropica, ureae, gallinarum, aerogenes. [90]. Пастереллы являются аэробами или факультативными анаэробами, температура их жизнедеятельности 22-42ºС, оптимальная - 37ºС [32]. Возбудители пастереллезов характеризуются наличием многих антигенов и имеют сложную антигенную структуру, по которой некоторые штаммы пастерелл резко отличаются друг от друга, а в серологических реакциях ведут себя как представители разных групп бактерий [91,92,93,94,95,96].
В соответствии с общепринятой в настоящее время классификацией у Pasteurella multocida обнаружено наличие трех основных факторов патогенности, ответственных за развитие инфекционного патологического процесса. Среди инвазивных факторов у Pasteurella multocida установлено наличие, по крайней мере, двух основных ферментов. Один из них гиалуронидаза [97.98], другой - нейраминидаза [99]. Работами целого ряда авторов у вирулентных штаммов Pasteurella multocida обнаружена капсульная субстанция, обладающая выраженной антифагоцитарной активностью [46, 47, 100, 101, 102, 103]. Факторы патогенности с токсической функцией включают липополисахаридный комплекс клеточной стенки и экзотоксин белковой природы, выявленный в настоящее время у штаммов Д и А серовариантов Pasteurella multocida [104,105]. Однако факторы патогенности Pasteurella multocida изучены еще недостаточно, особенно в плане иммуногенной активности.
Многочисленными исследованиями ученых доказано, что среди поверхностных антигенов капсула является важным фактором патогенности многих видов бактерий, обуславливающим ряд их биологических свойств []. Вирулентность культур Pasteurella multocida прямо коррелирует с количеством микробов, имеющих капсулу [100]. Так при гемосептицемии, тяжелом течении пастереллезной пневмонии и других формах пастереллезов у животных были выделены инкапсулированные формы. Штаммы ослабленной вирулентности характеризовались отсутствием на их поверхности капсулы. При бактерионосительстве среди кошек и собак выявлено циркулирование в их организме преимущественно неинкапсулированных клеток Pasteurella multocida [87,88].
По данным ряда авторов основное биологическое свойство капсульных полисахаридов пастерелл связано с антифагоцитарной
функцией, обеспечивающей протекцию против различных механизмов клеточной защиты хозяина [102,104,106,107]. Работами целого ряда авторов продемонстрировано антифагоцитарное действие инкапсулированных штаммов Pasteurella multocida серотипа А на нейтрофиллы крупного рогатого скота в тестах in vitro [108,109,110]. Несмотря на эту неоднократно подтвержденную точку зрения, по мнению Dubrenil J.D. et al. [111], не всегда наличие капсулы коррелирует с вирулентностью штаммов Pasteurella multocida и определяет их антифагоцитарную активность.
Тем не менее, замечено, что диссоциативные изменения, связанные с нарушением синтеза капсулы, в частности капсульных полисахаридов, сопровождались снижением или полной потерей вирулентности и иммуногенной активности. Капсулы представляют собой внеклеточное слизистое образование, более или менее выраженный наружный слой в составе клеточной оболочки многих грамотрицательных бактерий. Анализ большого количества штаммов позволил выявить корреляцию между толщиной капсульного слоя и серовариантной принадлежностью штамма. Замечено, что сероварианты А и Д проявляют сильное инкапсулирование. У клеток этого типа при дополнительной стабилизации наблюдается внеклеточное образование толщиной 70-90 и 10-30 нм от внешней мембраны соответственно для указанных выше серовариантов [112,113]. По данным Коломниной Г.Ф. и др., Pasteurella multocida сероварианта В при определенных условиях культивирования тоже формирует капсулу или микрокапсулу [101]. Ряд авторов отмечает зависимость процессов капсулообразования от условий и сроков культивирования бактерий [108,109,114,115].
Относительно химической природы капсульного материала единого мнения нет. Большинство авторов указывают, что капсульные экстракты представляют собой белково-полисахаридный комплекс с примесями веществ различной биохимической природы. Соотношение основных компонентов в неочищенных экстрактах различно и варьирует от штамма, серовариантной принадлежности, условий культивирования бактерий и метода экстракции. Согласно литературным данным содержание протеинов составляет от 37,7% до 55,1% углеводов - от 4,71% до 14,8% [106,111,116, 117].
Исследование белковых компонентов капсул Pasteurella multocida различных серовариантов методом электрофореза продемонстрировало их неоднородность. В капсульном материале вирулентных штаммов было выявлено до 12 белковых полос [118,119].
Pirocky P. удалось выделить полисахаридные компоненты из гладких культур Pasteurella multocida [120]. Из капсульного вещества Pasteurella multocida серовариантов А и Д, полученных по методу Carter, были выделены муцинозные полисахариды, содержащие равное
количество гексозамина и уроновой кислоты. Качественный анализ углеводных компонентов Pasteurella multocida сероварианта А, выделенных от различных видов животных и человека, показал наличие гиалуроновой кислоты [97,98, 121]. В дополнение к изложенному, в 1993 году появилось сообщение о выделении методом бумажной хроматографии гиалуроновой кислоты из капсульного материала штаммов Pasteurella multocida сероварианта Д, изолированных из легких свиней [122].
Анализ литературных данных показал отсутствие целостного представления о биохимических и физико-химических свойствах капсульного материала Pasteurella multocida различных серовариантов, но указывает на значительную важность ее в иммунологической реакции, как основного антигенного фактора.
Многими авторами подчеркивается сложность антигенного состава капсульной субстанции Pasteurella multocida с различной степенью активности отдельных компонентов. В ряде работ сообщается о выделении методом гель-фильтрации из капсульных антигенов высокомолекулярной фракции, обладающей выраженными антигенными свойствами [123,124]. По мнению ряда авторов, капсульное вещество Pasteurella multocida является полноценным антигеном и в значительной мере определяет антигенную специфичность штаммов [101,102,103]. В ряде серологических тестов (РА, РНГА) была продемонстрирована специфичность капсульных антигенов, на основании чего штаммы Pasteurella multocida делятся на серологические варианты [125,126].
Учитывая сложность антигенного строения капсульной субстанции Pasteurella multocida, исследователи расходятся во мнении относительно компонентов, детерминирующих антигенную активность. В целом у Pasteurella multocida установлено 18 растворимых антигенов, два из которых лежат на поверхности клетки: соматический термостабильный и капсульный термолабильный специфический антигены. Тем не менее, точная топографическая локализация антигенов как в капсуле, так и в клетке в целом не выявлена [91,92,93].
Основными антигенами являются соматический термостабильный протективный, общий для рода пастерелл, и капсульный полисахаридный термолабильный специфический, в зависимости от которых пастереллы делятся на несколько групп. Четыре капсульных типа Pasteurella multocida обозначены через А, В, С и Е [95,96,127].
Pasteurella multocida состоит более чем из 16 сероваров, некоторые из них ассоциированы с определенными видами животных и симптомами болезни. Серовары В:2 и Е:2 являются возбудителями геморрагической септицемии у крупного рогатого скота и водяных буйволов, серовары А:1 и А:3 – возбудителями пастереллеза птиц [128,129,130].
