нитриты, обладают каталазной активностью, образовывают индол, сероводород, не вызывают гемолиз эритроцитов, не разжижает желатин, не свертывает молоко.
Данные биохимических свойств пастерелл отражены в таблице 3.
Таблица 3- Биохимические свойства производственных штаммов P.multocida
| Наименование штамма | Ксилозаа | Глюкоза | Галактоза | Мальтоза | Лактоза | Сахароза | Маннит | Сорбит | Арабиноза | Индол | H 2 S | гемол.св-ва | восст.нитрат | каталазная акт-ть | Подвижность |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| P.multocida А1 | - | к + | к + | к + | - | к + | + | к + | - | + | - | - | + | + | - |
| P.multocida К1 | - | к + | к + | к + | - | к + | ± | к + | - | + | - | - | + | + | - |
| P.multocida К2 | - | к + | к + | к + | - | к + | + | к + | - | + | - | - | + | + | - |
При изучении вирулентных свойств эпизоотических штаммов пастерелл А1, К1,К2 на белых мышах с массой 18-20 г. (таблица 4) с определением ЛД50 путем внутрибрюшинного введения вирулентной культуры пастерелл 15 КОЕ, 50 КОЕ и 100 КОЕ.
Таблица 4 - Вирулентные свойства эпизоотических штаммов пастерелл на белых мышах
| Наименование штамма | Кол - во животных | Доза введения | Метод введен. | Результаты | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Пало | Выжило | % падежа | ||||
| P.multocida А1 | 10 10 10 | 15 КОЕ 50 КОЕ 100 КОЕ | в/б в/б в/б | 6 8 10 | 4 2 - | 60 80 100 |
| P.multocida К1 | 10 10 10 | 15 КОЕ 50 КОЕ 100 КОЕ | в/б в/б в/б | 7 9 10 | 3 1 - | 70 90 100 |
| P.multocida К2 | 10 10 10 | 15 КОЕ 50 КОЕ 100 КОЕ | в/б в/б в/б | 3 9 10 | 7 1 - | 70 90 100 |
Как видно из таблицы 4 вирулентность эпизоотических штаммов пастерелл для белых мышей составило 15 - 100 КОЕ.
2.2.3 Изучение биологических свойств штамма Pasteurella multocida 90
Из коллекции музея лаборатории противобактериозной биотехнологии получаем лиофильно высушенные штамм P.multocida 90. Ампулу с аморфным веществом растворяем физиологическим раствором [рН 7,2-7,4] получаем 20 млрд. КОЕ, затем проводим серийное разведение и из 5, 6 пробирки производим посевы по 0,1 см3 в чашки Петри для подсчета количества колоний. Через 24 часа после инкубации при визуальном просмотре роста колоний в чашки Петри должно быть не менее 100-200 КОЕ.
На питательных средах культуры P.multocida 90 сохраняют исходные свойства не более 10 пассажей. Поэтому в период использования данного штамма пастерелл проводили пассажи культур на белых мышах, что обеспечивало повышение их вирулентности. Так как иммуногенные свойства возбудителя обусловлены наличием капсулы, не менее важным условием является сохранение музейных штаммов пастерелл в фазе, образования капсулы, а этим условием является животный организм, из которого выделен данный штамм.
Нами были изучены морфологические, культуральные, биохимичесике, вирулентные свойства музейного штамма P.multocida 90.
Штаммы P.multocida 90 – короткие овоидные палочки (длиной 0,31,5 мкм и шириной 0,15-0,25 мкм), грамотрицательные, неподвижные (рисунок 4). Отмечается биполярность при окраске по РомановскомуГимзе, при окрашивании по Михину обнаруживали капсулу, ее наличие связано со степенью вирулентности штаммов.

Как видно из рисунка, в мазках пастереллы располагаются изолированно иногда парами, реже в виде цепочек
Культуральные свойства изучали при посеве на плотные и жидкие питательные среды при температуре 370 , рН 7,2-7,4. По характеру роста на плотных питательных средах (МПА) обогащенной 5%-ой сывороткой крови лошади выявили три типа колоний: гладкую S-форму, которые представляют собой мелкие, гладкие, округлые, прозрачные с голубоватым оттенком ровными краями (рисунок 7).


На необогащенном МПА пастереллы растут в виде нежных мелких росинчатых колоний, слегка опалесцирующих в проходящем свете (рисунок 8). Для выделения чистых культур пастерелл производили дробный посев исследуемого патологического материала на чашки Петри с обогащенными средами МПА (по две-три чашки на каждое исследование).

