Смесь молока с реактивом перемешивают палочкой в каждой лунке в течение 10-15 секунд.
При использовании молочно-контрольной пластинки МКП-2 палочка не требуется, смешивание молока с реактивом производится путем горизонтального вращения пластинки. Реакция учитывается по густоте желе и цвету.
Учет реакции по вязкости желе:
- отрицательная реакция — однородная жидкость (-);
- сомнительная реакция - следы образования желе(±); -положительная реакция (+) — ясно видимый сгусток (от слабого до плотного), который можно выбросить из луночки палочкой.
На пластинке МКП-2 при:
- отрицательной реакции (-) образуется однородная смесь.
- Сомнительная реакция (±) - во время вращения пластинки на дне лунки заметны тонкие хлопья без образования сгустка.
- Положительная реакция (+) - отчетливое появление слабого или быстрообразующегося плотного сгустка.
Проба с 10% раствором мастидина. Для исследования коров на мастит по молоку из общего удоя применяют 10% раствор мастидина.
Техника постановки пробы на пластинках МКП-1 и МКП-2 и учет реакции по образованию желе проводят так же, как и при постановке с димастином.
Для определения пораженной четверти вымени от животных давших, положительную или сомнительную реакции с 10% раствором мастидина, отбирают пробы молока из каждой доли вымени и исследуют с 5% или 2% растворами мастидина или по пробе отстаивания.
Проба с 2% раствором мастидина. Для приготовления 2% раствора мастидина к 100 мл 10% раствора прибавляют 400 мл дистиллированной или прокипяченной воды.
Постановка проб и учет реакции проводят также по образованию сгустка и изменению цвета, как и при исследовании молока с 10% раствором мастидина.
Образование сгустка является основным диагностическим признаком при исследовании молока димастином и мастидином, а изменение цвета служит ориентировочным признаком.
Реакции с димастином или мастидином на субклинический мастит в обязательном порядке должны подтверждаться пробой отстаивания.
Проба отстаивания
Проводят путем отбора секрета из долей вымени, которые реагировали положительно на димастин или мастидин.
В конце доения в пробирку сдаивают 10 мл молока и помещают ее на 16-18 часов в холодильник. На второй день учитывают результат, при этом определяют наличие осадка, количество и характер сливок и цвет молока.
Молоко здоровых коров имеет белый или слегка синеватый оттенок, осадка не образует. Молоко от больных маститом коров водянистое, сливки становятся тягучие, слизистые, хлопьевидные.
Однако основным диагностическим признаком пробы отстаивания является осадок. Образование осадка в молоке, наличие хлопьевидных, тягучих слизистых сливок указывает на положительную реакцию. Такую корову считают больной маститом, ее изолируют от общего стада и подвергают лечению. Молоко из пораженной маститом доли выдаивают руками, сдаивают отдельно и уничтожают. Молоко из непораженных четвертей в каждом отдельном случае бракуют в соответствии с наставлением.
Проба Тромсдорфа — один из давно известных непрямых методов обнаружения повышенного количества клеток в молоке. Сущность ее заключается в осаждении повышенного содержания лейкоцитов и других клеточных элементов при центрифугировании 10 мл молока. Используют делительные пробирки с суженным нижним концом. После центрифугирования судят по осадку о наличии или отсутствии заболевания вымени.
В процессе дальнейших исследований было замечено, что при центрифугировании сырого молока не все соматиче-
ские клетки выпадают в осадок, какая-то часть их остается в слое сливок. Поэтому при нагревании молока перед центрифугированием до температуры 60-70°С объем осадка увеличивается.
Проба Уайтсайда — довольно распространенный диагностический тест. Для постановки пробы используют 4 %- ный раствор едкого натра, который смешивают с молоком в соотношении 1:5. При наличии воспалительных процессов в вымени (положительная реакция) образуется густая тягучая масса с хлопьями. В молоке здоровых животных такой массы не образовывается. Для упрощения реакции и ускорения исследований обычно берут 0,1 мл щелочи и 0,5 мл молока.
Некоторые исследователи признают пробу Уайтсайда достаточно чувствительной и пригодной для выявления различных состояний вымени, при помощи которой можно обнаружить до 80 % и более коров, подозреваемых в заболевании маститом. При изучении механизма действия пробы Уайтсайда оказалось, что степень реакции ее зависит не только от количества лейкоцитов, но и содержания молочного жира и солей кальция в молоке.
В настоящее время широко применяют также и быстрые маститные тесты из поверхностно-активных веществ, которые, по многочисленным данным, дают хорошие результаты при диагностике мастита, отражая количество соматических клеток в молоке. Одним из таких тестов является калифорнийская маститная проба (КМТ).
Действующим началом в ней являются поверхностноактивные вещества типа алкиларилсульфатов и алкиларилсульфонатов. Данная проба заключается в смешивании равных объемов молока и раствора реактива (3—5 %-ного). Ставят ее на специальных пластмассовых пластинках с четырьмя цилиндрическими углублениями. В углубления надаивают из каждой четверти вымени по 2 мл молока и добавляют такое же количество реактива из пластмассовой шприц-бутылки. Молоко с реактивом перемешивают круговыми движениями пластинки. При повышенном содержании клеток в молоке через 5—10 с образуется желеобразная масса (густота по-
