Иммуногенетика в селекции овец

1:8, в то время как у взрослых животных (12 мес. и старше) процент реактивных животных варьировал от 71,5 до 86,8, при титрах сывороток 1:64 и выше. Женские особи более реактивны, чем мужские- 90,8 % против 72,6 %.

Кроме того, нами отмечено, что у тонкорунных овец легче и чаще образуются антитела — Aa, Ав и Da, другие — Bd, Ве, Ma, Ms, Св — имеют меньшую антигенную активность и вырабатываются с трудом. Реиммунизация — повторный цикл иммунизации, который наиболее целесообразно проводить через 2-3 месяца после первой иммунизации, потому как 50-65 % овецреципиентов после первого цикла иммунизации не образуют нужных антител, а если образуют, то с очень низким титром. Если при иммунизации титры антител в сыворотке крови нарастают постепенно, то при реиммунизации — скачкообразно. Титры антител поливалентных сывороток после реиммунизации в 2-5 раз выше, чем при иммунизации. Реиммунизация эффективна также при получении сывороток против слабых антигенов, которые в первом цикле иммунизации вызывали образование иммунных антител со слабым титром. Реиммунизация животных теми же эритроцитами донора является эффективным приемом повышения титра получаемых сывороток. Однако и при реиммунизации не всегда удается получить необходимые антисыворотки. Все это указывает на недостаточную изученность иммунологических процессов.

Получение реагентов. Работа по изучению и практическому применению групп крови животных и изготовлению моноспецифических сывороток (реагентов) возможна только в условиях хорошо оборудованной иммуногенетической лаборатории, в которой имеются:

• иммунологические пластмассовые блоки, для постановки реакции гемолиза и агглютинации;

• бактериологические пробирки со штативами для приготовления суспензии эритроцитов из крови панельных животных, а также для отбора проб крови у исследуемых животных;

• пастеровские, лабораторные пипетки объемом на 1, 2, 5,

• 10 мл;

• полиэтиленовые сосуды емкостью от 100 мл до 1 литра

• для отбора крови и хранения сыворотки;

• шприцы для иммунизации;

• иглы для взятия крови;

• шкафы для стерилизации стеклянной посуды при тем-

• пературе 120°С;

• аппараты для дистилляции воды;

• центрифуги со скоростью вращения не менее 4000

• об/мин;

• вакуумные и водоструйные насосы для отсасывания сы-

• воротки или надосадочной жидкости;

• низкотемпературные холодильники с температурным

• режимом в пределах- 15-20°С;

• холодильники с температурным режимом +2, +4°C;

• весы для взвешивания реактивов;

• реактивы для изготовления изотонического и антикоа-

• гулирующего растворов (хлористый натрий, 3-х замещенный лимоннокислый натрий, глюкоза, реванол, альбуцид);

• бланки протоколов и карточек.

• Для определения эритроцитарного антигенного состава

• крови животных донорского стада из яремной вены берут по 10-15 мл крови в хорошо закрывающиеся пробирки, в кото-

• рые, в целях предотвращения свертывания крови, заранее вносится консервант из расчета 1/4 - 1/5 объема крови.

Состав консерванта:

После добавления крови содержимое пробирок тщательно перемешивают. Кровь, не позднее двух суток со времени забора, доставляют в лабораторию либо в специальных холодильниках (автохолодильники), либо в термосах со смесью льда и поваренной соли в пропорции 3:1, для поддержания температуры непосредственно вблизи образцов крови не ниже +4 С, образцы отделяют от смеси прокладками из паралона толщинойв 3-4 см.

Каждая проба крови должна иметь этикетку с указанием номера животного, все необходимые сведения о котором заносят перед взятием проб крови в ведомость.

В лаборатории из полученной крови готовят 2,5 % суспензию эритроцитов и определяют антигенный состав использованием гемолитического теста (реакция гемолиза и агглютинации).

Суспензию эритроцитов получают путем центрифугирования крови в течение 10 мин при 3000 об/мин. Отделившуюся плазму отсасывают пипеткой, с помощью вакуумного насоса. К осадку доливают изотонический раствор (0,9 % раствор хлористого натрия), встряхивают, снова центрифугируют, эту процедуру повторяют трижды.

В пробирку, содержащую 9,75 мл изотонического раствора, вносят 0,25 мл трижды отмытых эритроцитов, тщательно