— 202 - | УДК 636.1:612.646 . С.Г.Лебедев, кандидат биологических наук, Л.@.Лебедева | КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ЭКСПАНДИРОВАННЫХ БЛАСТОЦИСТ ЛОШАДИ ‘ В связи с расширением исследований по трансплантации эмбрионов лошади возникла необходимость сохранения жизнеспособ= | ности и обеспечения нормального роста и развития зародышей во внешней среде. Помимо чисто научного интереса, метод инкуб эмбрионов в спе ци альных средах представляет в 4 коневодствеКУбаЦИИбольч— щую практическую значимость. Он позволит транспортировать эм= > брионы на дальние расстояния, хранить их непродолнительное врем мя, когда замораживание экономически невыгодно, доращиват случае необходимости до нужной стадии развития, проводить оце ky биологической полноценности зародышей после различных мани» Г нь бои то ороем ть ия т среды сильно солевых растворов ры Parla ее от сравнительно простый тена, GEC Дюльбекко) до Прим роде, Эрла,Бринстера, Витщих от 50 до 80 компонентов (MEM Neue Plo ope сред, включаю р panos и ‘oma Р-, № 199, Менезо и вяйственных животных ранних ст а лабораторных и сельскохо= бластоцисты). Культивирование = развития (or 1-2 клеток до освещено в литературе. Описаны any поэдних зародышей почти He а кроликов (8) г м oomon: эксперименты на рогатого скота (4). РИ. As евиней, (6,7) и крупного Вопрос о составе сред i. а is a ee НОА наиболее слабо изучен в нада е культивирования эмбрионов re a тве. Препятствием здесь, очевиди чения эмбрионов, принятого к то путем нехиругического извле= получить leans ele оневодстве, мы имеем возможность = есть в 6-7-дневном возрасте Comma его из яйцевода в матку, 10 бластоцисты). В первые часы пребываниятадия позднейв морулы илий ранней.; Pe,сбрасывает блестящую оболочку и быстро увеличиваетсяматке эмбрионв разме-лошади перейдя в стадию расширенной бластоцисты. В 8-sHeBHOM воз-
- ca - 203- фисте он. виден при извлечении из кобылы невооруженным глазом и очень ‘удобен: для работы. Кроме того, физиологической особонностью кобыл является задержанный, по сравнению с другими _*видами- насельскохозяйственных30-й день после ‘овуляцииживотных, еесрок имплантациизначительно onзаро| Ширяет возможности исследователей в области ттансплантации | зародышей лошадей, в частности при культивировании эмбрионов. Однако, методика. инкубации бластоцист лошади в литератуew ee erie В 1982 году в лаборатории физиологии размножения ВНИИ коневодства начаты исследования по культивированию эмбрионов ло| — идей. В культуральных средах”были апробированы сыворотка кро| вы КРС и плазма ВЕсемени жеребцааспа на базе фоофатно-солевого буферHoro раствора Дюльбекко: Удовлетворительных результатов полумить не удалось. Впоследствии B состав культуральной среды бы| IM BIOTOUBHE КОбылье молоко и желток куриного яйца. | №териал Для выявления оптимального соотношения подобранных компонен| и методика | тов (раствор Дюльбекко, желток и кобылье молоко) был использован метод треугольной трехкомпонентной диаграммы Гиббса-Розебома (I). Готовили 21 вариант среды. Соотношение концентраций | принятых ингредиентов в приготавливаемых растворах варьировали с 204-ным интервалом (рис. Г). Молоко предварительно расфа, осовывали в ‚пенициллиновые флаконы и @ETORRABBBOS=TE® Hoxton брали только из свежеснесенных яиц категории "диетическое". В | культуральную среду добавляли антибиотики из расчета: 100 ед. пенициллина и 0,5 мг стрептомицина на I мл среды. Извлеченные 'нехирургическим методом 8, 5-дневные эмбрионы ‚ лошади помещаля в испытуемые среды и культивировали в термоотате при 37°C. В первой серии опытов инкубацию проводили в | — течение 12 часов, во второй серии - в течение 24 °ссов. До и после культивирования эмбрионы измеряли и оценивали по морфологическим признакам (табл. Г). В эксперимент включали эмбри| оны только отличного качества. Интенсивность роста бластоцист ` в культуре определяли по формуле: | V | где J - интенсивностьJ = aроста бластоцисты100 4, (%),Vz - объем блас-
и |
NTA ААА |
.
- 204 - an
Е a:
a oe ингредионтов ( раствора i Дольбокко eeeсунок I, |
лока) в составе‘ испытываемых вариантовon ai cpems т
ie .
р reo-0% a у ы.
2
ж-80%1 fs -
ыйс-0% : |
Г5 ah9-206 й з:
: 2-60 ж-6
Е] м-20% а }
‘ Of с-40%
то ‚
/
x-40% 8 в д
м-60% ig i о
5-0 9-20 nr м-50-60% у
м 20%BOF 17ж- sug 13ж-2 raee ‘i , —
way we© cigс-40% xyc-60% <780% .
"=
16 17
ae #08 a8 of 19 на 26 s
м-Т00% м-80% peal Ж- ж-0% вы
c=0% -20% woe nei M-202 a
у — e108
Обозначения:,
cor |- * варианта среды
u-208 | — KowuontpenmО ция молокаMOJIOL
920% |- концентрация солевого раствора
оо.
