- 207 -
| ios 18 19 20 21 | Ев - - . _ | ae 60 40 40 60 20 80 ГВ 100 | ee a OeИЯ 166,0% 18. Rf 19 239,6 20 С } al = | = 39 40 АТ 42 | meta 214,6 19,0 7 ~ | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Примечание: | знаком "-" бриона х) - оболочка в культуре; слоена; хх) - эмбрион развивался. | а обозначено бластолемма погиб, | полное хотя | отсутствие после какое-то | культивирования время, | роста ONE эм OT _ видимо, | |
Обсуждение результатов.
B оценке вариантов сред, наиболее близких к оптимальному составу, руководствовались прежде всего результатами 24-часоче выявляет стабильность вого культивирования, поскольку оно яр р ды.в развитииТак, в несколькихэмбрионов ислучаяхуказывает(средына степень№№2,4,10,11,17,16,19)полноценности ср обнаруживается явное замедление роста эмбрионов. Это MORE быть связано, вероятно, с двумя факторами: Г) недостаточное количество питательных веществ в среде или 2) недоступность sux дия эмбриона в той форме, в которой данные вещества. присутствуют в культуре. Опираясь на сведения из биохимии аа, яйца (2), можно предположить, что желток, содержащий весь на бор питательных Веществ, необходимых для полного развития о риного эмбриона, обеспечивает этими веществами нашу р ную cpefy B достаточном количестве. Отсюда становится me a р некоторое снижение инте“сивности роста бластоцист в ряду ыы и с #5 no№ 15 и почти noxnoe отсутствие роста в безжелточ ых средах (№ 16-21). Здесь же следует отметить, что кобылье м - локо все же имеет небольшой запас питательных веществ и pod поддерживать развитие эмбрионов лошади в течение короткого в b риода времени (среды № 16-20), в отличие от OBC о т: нако, как видно из таблицы, желток в количестве более ae среде начинает через некоторое время (после 12 часов культ ия |
у - 28 - рования) губительно действовать на эмбрионы. По-видимому, здесь вступает в действие второй из указанных факторов. Из = | эмбриологии птиц известно, что зародыш птицы аккумулирует пи=. тательные вещества только из разжиженного желтка. Механизм п рехода воды с солями из белка в желток обусловлен разностью › осмотического давления между ними в яйце и предусматривает, — помимо всего прочего, перевод питательных веществ желтка в доступное для эмбриона состояние. Похоже, что’и лошадиные эм= брионы предъявляют к желтку такие же требования. де с Возможносодержаниеми другоежелткаобъяснениесвыше 60 %.фактаНамигибелиотмечено,эмбрионовчто жизне=в сре’ способный зародыш лошади из-за своего удельного веса тонет в ФБС Дюльбекко, в молоке всплывает к поверхности, а в желтоксодержащих средах с повышением вязкости сверх определенной величины совпадающей с 80 4-ной концентрацией желтка в культу.| pe) начинеет опускаться с поверхности в толщу среды. Учитывая» что в условиях матки эмбрион постоянно мигрирует из одного рога в другой (3), обеспечивая себе таким образом интенсивное питание и активный газообмен, логично предположить, что в куль ральной среде интенсивность "дыхания" неподвижного зародыша, и, определяется степенью его погруженности в среду. Возможно or=" сюда исходит причина гибели эмбрионов в средах № 1-З и № 20-21, не позволяющих зародышам подняться к поверхности; Не случайно и то, что жизнеспособные эмбрионы всплывают к поверхности с ды,'а погибшие опускаются на дно флакона. : | у вах Я ae у .
В результате проведенных экспериментов выделен ряд KyJb— туральных сред (№ 5,6,7,8,9), включающих в свой состав. 40-60% желтка куриного яйца, 0-40 % кобыльего молока и 0-40 % фосфатно солевого буферного раствора Дюльбекко, которые позволяют:не витиетолько8,5-дневныхсохранять жизнеспособность,эмбрионов лошадейноinи w/troобеспечиватьв течениерост 24и ча сов культивирования.К достоинствам среды следует отнести возможность культи-i . вирования в ней экспандированных (со сброшенной блестящей обо= лочкой) бластоцист лошади, а также простоту в изготовлении,. OM
- 209 - р . о сутствие дефицитных и дорогостоящих компонентов и специального газового режима при инкубировании. . Литература , этвенТ. Милованов В.К. ees ee и искусс ное осеменение животных. - М., о о йa 2. Орлов М.В., Выховец A.2., Злочевокая .5. М.: Колос, 1982. - С.17-22. } ВИ 3. Ginther О.Т. Mobility of early equine conceptus.//Theri~ ogenology. 1983, у. 19, N 4, р. 603-612. ; 4. Herr C., Wright В.М. Long-term culture р. hatched bovine enbryos.//5. HsuTheriogenelogy.Y.-C. Pos* blastocyst1986, vendifferentiation 2501, Be 1595in vitroр /s/} ature. 1971, у. 221, N 14, р. 100. | | ь 6. Robl J.M., Nelssen J.L., Davis D.L. Swine =e velopment in vitro.// J. anim. Sci. 1979, 49 (suppl. 1), ae Bie 7. Shaffer S.J., Wright RW. Aue ney end onc outgrowth of swine blastocysts in vitro.// J. Anim. Sci. 1978, NG, р..1712. И 8. Staples В.В, Development of 5-day rabbit м sake ы у tor culture at 37°C.// J. Reprod. Fert. 1967,у. 2s a [oh ot 9, Letisse, У. Induction OER multiples ey ienenene ny @'ещьгуорв chez la jument: These... Toulouse, 1984 (Ecole véterinaire de Toulouse; 1984, М 75).
