количество гексозамина и уроновой кислоты. Качественный анализ углеводных компонентов Pasteurella multocida сероварианта А, выделенных от различных видов животных и человека, показал наличие гиалуроновой кислоты [97,98, 121]. В дополнение к изложенному, в 1993 году появилось сообщение о выделении методом бумажной хроматографии гиалуроновой кислоты из капсульного материала штаммов Pasteurella multocida сероварианта Д, изолированных из легких свиней [122].

Анализ литературных данных показал отсутствие целостного представления о биохимических и физико-химических свойствах капсульного материала Pasteurella multocida различных серовариантов, но указывает на значительную важность ее в иммунологической реакции, как основного антигенного фактора.

Многими авторами подчеркивается сложность антигенного состава капсульной субстанции Pasteurella multocida с различной степенью активности отдельных компонентов. В ряде работ сообщается о выделении методом гель-фильтрации из капсульных антигенов высокомолекулярной фракции, обладающей выраженными антигенными свойствами [123,124]. По мнению ряда авторов, капсульное вещество Pasteurella multocida является полноценным антигеном и в значительной мере определяет антигенную специфичность штаммов [101,102,103]. В ряде серологических тестов (РА, РНГА) была продемонстрирована специфичность капсульных антигенов, на основании чего штаммы Pasteurella multocida делятся на серологические варианты [125,126].

Учитывая сложность антигенного строения капсульной субстанции Pasteurella multocida, исследователи расходятся во мнении относительно компонентов, детерминирующих антигенную активность. В целом у Pasteurella multocida установлено 18 растворимых антигенов, два из которых лежат на поверхности клетки: соматический термостабильный и капсульный термолабильный специфический антигены. Тем не менее, точная топографическая локализация антигенов как в капсуле, так и в клетке в целом не выявлена [91,92,93].

Основными антигенами являются соматический термостабильный протективный, общий для рода пастерелл, и капсульный полисахаридный термолабильный специфический, в зависимости от которых пастереллы делятся на несколько групп. Четыре капсульных типа Pasteurella multocida обозначены через А, В, С и Е [95,96,127].

Pasteurella multocida состоит более чем из 16 сероваров, некоторые из них ассоциированы с определенными видами животных и симптомами болезни. Серовары В:2 и Е:2 являются возбудителями геморрагической септицемии у крупного рогатого скота и водяных буйволов, серовары А:1 и А:3 – возбудителями пастереллеза птиц [128,129,130].

Современные представления об основных компонентах, ассоциированных с капсульным веществом, можно резюмировать так:

1) β-антиген – типоспецифический полисахарид, адсорбируется на эритроцитах в реакции непрямой гемагглютинации: встречается в микроорганизмах, которые дают флюоресцирующие и мукоидные варианты;

2) d-комплекс – полисахаридно-белковый, тесно прикрепляющийся к клеточной стенке, иммуногенный, видимо, в некоторой степени лабильный;

3) γ-антиген – липополисахарид, встречающийся у микроорганизмов всех вариантов, входящий в состав клеточной стенки; у каждого одна или более антигенных детерминант, ответственных за различные О-, или соматические, серовары [131,132].

Многие исследователи указывают на вариабельность биохимических свойств возбудителя пастереллеза. По данным некоторых исследователей биохимический тест нельзя использовать для дифференциации штаммов возбудителя различного зоологического происхождения, который заключается в сбраживании сахарозы, глюкозы [133,134]. Khalifa I.A., напротив, установил зависимость биохимических свойств штаммов от зоологического происхождения. [135]. По данным Breed R.S. et al. [136], Pasteurella multocida, как правило, не ферментирует лактозу, но имеются исключения. Так, штаммы разлагающие лактозу, описаны некоторыми учеными. Эти бактерии обычно не свертывают молоко, не изменяют его реакцию [137,138]. Pasteurеlla multocida не коагулирует плазму кролика и морской свинки. Желатину и свернутую сыворотку не разжижает, не вызывает гемолиза, но образует индол и сероводород. Восстанавливает нитраты до нитритов, дает отрицательную пробу с метиленовым красным. Мочевину не разлагает, разрушает перекись водорода. Ферментирует сахара, спирты и гликозиды с образованием кислоты без газа. Как указывают Breed R.S. и др., Pasteurella multocida сбраживает глюкозу, сахарозу, фруктозу, сорбит, галактозу, маннозу и как правило, маннит, ксилозу и трегалозу; не ферментирует лактозу, дульцит, амигдалин, рафинозу, рамнозу, адонит, декстрин, инулин, глицерин, эритрит, салицин, мальтозу и арабинозу. У Pasteurella multocida видовым признаком следует считать лишь способность ферментировать глюкозу, сахарозу, маннозу и галактозу с образованием кислоты без газа, не разжижать желатину, не свертывать и не пептонизировать молоко и, как правило, не образовывать сероводород [85,112,133,134,139,140].

1.2 Диагностика пастереллеза

Диагноз пастереллеза ставится комплексно, с учетом данных эпизоотологии, клиники, данных патологоанатомических изменений и

бактериологического исследования. Каждый из методов диагностики имеет ценность лишь в совокупности с другими методами, в особенности с результатами патологоморфологических и бактериологических исследований [115,139,141].

Обнаружение у заболевших животных сходной с пастереллезом клинической картины не дает права ставить диагноз на пастереллез, так как имеется ряд заболеваний, клиническое течение которых очень напоминает пастереллез. Патологоанатомические данные достаточно выражены при остром течении пастереллеза, но не патогномоничны, и ставить диагноз только на основании их нельзя. Выделение культуры пастерелл при бактериологическом исследовании без учета результатов, полученных другими диагностическими методами, также не дает оснований для постановки диагноза на это заболевание, так как при пастереллезе наблюдается широкое бактерионосительство как среди переболевших, так и среди клинически здоровых животных, контактировавших, а иногда и неконтактировавших с животными неблагополучных хозяйств. Совокупность сведений по эпизоотологии, клинической и патологоанатомической картине дает право на постановку предварительного диагноза, результаты же бактериологических и биологических и молекулярно-биологических исследований позволяют поставить диагноз окончательно [139,142]. Клинические признаки не имеют большого диагностического значения. Исключительно ценные данные для правильной постановки диагноза при остром и подостром течениях пастереллеза дают патологоанатомическое исследования. Прижизненная бактериологическая диагностика пастереллеза также не имеет большого значения, чаще исследуют материал от павших животных. Результаты лабораторного исследования этого материала дают возможность уточнить первоначальный диагноз [6,7,9,17,18,37].

Для бактериологического исследования в лабораторию посылают отдельные органы (сердце, селезенку, печень и др.). Патологический материал лучше посылать свежий или замороженный, либо в консервирующей жидкости – 30%-ный водный раствор глицерина.

Бактериологическая диагностика пастереллеза слагается из

следующих методов:

• микроскопии мазков крови или мазков-отпечатков внутренних органов (печень, селезенка);

• выделения культур P.multocida из патологического материала путем высева на искусственные питательные среды или биологическим методом, заражая лабораторных животных;

• идентификации культуры;

• определения вирулентности выделенных культур на лабораторных животных.