не многие из них можно было использовать в качестве В — реагентов из-за низких титров. Нативную сыворотку крупного рогатого скота использовал C.Stormont (1961) для получения анти — О при исследовании групп крови у овец. В дальнейшем Г.М. Sprague (1958) и В.А. Rasmusen (1962), тестируя несколько сот сывороточных образцов крупного рогатого скота, подтвердили эти исследования, обнаружив антиовечью О — сыворотку в сыворотках J — негативных животных. S.Suzuki и C.Stormont (1961) сообщили также о наличии анти — О в сыворотке четырех A - негативных коз. В последствии эти исследования подтвердили В.А. Rasmusen (1979), T.C.Nguyen (1979) и T.Zur и др. (1979). Учитывая трудности в получении реагентов и, в частности, О — реагентов, В.А. Rasmusen (1979) предложил использовать нормальную неиммунную сыворотку для определения О — фактора у овец и свиней. Она может содержать анти — О антитело в исключительно редких случаях.
Новорожденные ягнята не имеют анти — К сыворотки до сосания, приобретая эти антитела только с молозивом матерей. Затем пассивное накопление антител снижается у ягненка по мере роста животного. Поэтому, J.Rendel (1957) рекомендует не определять анти — К у ягнят, которым нет еще 2- х месяцев. Он считает, что большинство овец начинает продуцировать анти — R в пределах от 3 до 7 месяцев.
Резюмируя выше изложенное, можно сделать следующее заключение:
- внутривидовая изменчивость антигенных факторов эритроцитов у овец четко наследственно обусловлена и иммунологически обнаруживается в виде восьми систем групп крови. Сельскохозяйственные животные, в том числе и овцы, изучены в этом плане все еще недостаточно;
-
ассоциативность ряда антигенных факторов с направленностью обмена калия, натрия, аминокислот и других биокомпонентов организмов открывает определенные перспективы для поиска подобных связей с физиологическими, биохимическими и продуктивными особенностями овец;
-
для проведения результативных исследований, с привлечением в качестве генетических маркеров эритроцитарных антигенов, необходим достаточно полный набор моноспецифических сывороток, что предопределяет важность создания и регулярного пополнения Банка иммуногенетических реагентов для овец.
1.4 Изготовление моноспецифических сывороток — реагентов для овец
Донорское стадо. Важнейшим условием получения моноспецифических сывороток является наличие донорского стада из 150-200 голов овец. На них не должны распространяться хозяйственные планы получения продукции.
Согласно существующему положению антигенный состав эритроцитов крови животных донорского стада должен быть подтвержден одним из научно-исследовательских центров Международной организации по изучению групп крови животных (МОИГКЖ). При комплектовании донорского стада желательно, чтобы оно состояло из овец разных пород, так как межпородная изоиммунизация позволяет получать планируемые антитела.
Отобранных в донорское стадо животных условно делят на две группы - доноров и реципиентов. Определяют панельную группу из 30-40 аттестованных овец по всем системам групп крови. Такие животные, с известным составом эритро-
цитарных антигенов, являются стандартом для проверки наличия антител в испытуемой сыворотке.
Подбор доноров и реципиентов. При изоиммунизациях, преследующих цель получение сывороток с определенными иммунными антителами, большое значение имеет правильный подбор доноров и реципиентов. В качестве доноров выбираются животные, имеющие эритроциты с теми антигенами, на которые требуется выработать соответствующие антисыворотки. Такие животные выявляются уже при «слепых» иммунизациях, когда антигенный состав доноров и реципиентов неизвестен. Однако более эффективным путем получения реагентов является плановая иммунизация, при которой антигенная характеристика доноров и реципиентов известна.
Группа доноров должна иметь антигены, против которых планируется выработать антитела у реципиентов. Как показали наши исследования, многие реципиенты зачастую оказывались иммунологически ареактивными: изоиммунизация их эритроцитами не обеспечивала образования антител. Поэтому желательно иметь доноров — дублеров с соответствующей группой реципиентов, для повышения вероятности получения необходимых антител.
Число реципиентов определяется количеством искомых антител, причем получаемые иммунные «сырые» сыворотки не должны быть очень сложными, то есть содержать различные антитела. С другой стороны, поскольку значительная часть реципиентов оказывается иммунологически ареактивной и не образует искомых антител, то к каждому донору необходимо прикреплять не одного, а несколько реципиентов. Обычно при подборе пар донор-реципиент у овец учитывается разница на 1-3 антигенных фактора. Следует отметить, что одни эритроцитарные факторы (Aa, AB, Bd и Da) у
