Данные таблицы 5 свидетельствуют о высокой эффективности реиммунизации. Титры антител увеличились в 2-5 раз по сравнению с первым циклом.
Иммуностимуляторы. Иногда, после проведения полного цикла иммунизации, выявляется до 50 % ареактивные или слабо реагирующих животных, что значительно снижает эффективность работы при изготовлении реагентов. С целью стимуляции иммуногенеза нами использовался адъювант Фрейда (5 г. вазелинового масла, 2 г. ланолина, 5 г. вакцины БЦЖ) и 65 % сульфазин, внутримышечно, однократно. Применение иммуностимуляторов значительно повышает иммунореактивность животных, сокращая количество ареактивных до 10-15 %. Титр образовавшихся антител в крови прореагировавших животных достигал 1:128, 1:512. Повышение выработки изоиммунных антител под влиянием адъюванта Фрейда, сульфазина можно объяснить замедлением резорбции антигенов вследствие образования депо, создания в организме комплекса по типу химической связи «адъювант-антиген», что приводит к суммации антигенных раздражений продолжительное время. При этом определенную роль играет влияние местных воспалительных реакций организма. Применение иммуностимулирующих адьювантов значительно сокращает сроки получения сывороток. Однако, эти сыворотки многофакторны и содержат большое количество ненужных антител. Дальнейшая работа с такими сыворотками длительна и сложна. Кроме того, животные очень болезненно переносят введение адъювантов (образование абсцессов, флегмон).
Возраст, порода животных также влияют на эффективность иммунизаций. Так, среди 4-х месячных ягнят только у 31,8 % животных была ответная реакция на иммунизаторное воздействие, причем с достаточно низким титром, не выше
1:8, в то время как у взрослых животных (12 мес. и старше) процент реактивных животных варьировал от 71,5 до 86,8, при титрах сывороток 1:64 и выше. Женские особи более реактивны, чем мужские- 90,8 % против 72,6 %.
Кроме того, нами отмечено, что у тонкорунных овец легче и чаще образуются антитела — Aa, Ав и Da, другие — Bd, Ве, Ma, Ms, Св — имеют меньшую антигенную активность и вырабатываются с трудом. Реиммунизация — повторный цикл иммунизации, который наиболее целесообразно проводить через 2-3 месяца после первой иммунизации, потому как 50-65 % овецреципиентов после первого цикла иммунизации не образуют нужных антител, а если образуют, то с очень низким титром. Если при иммунизации титры антител в сыворотке крови нарастают постепенно, то при реиммунизации — скачкообразно. Титры антител поливалентных сывороток после реиммунизации в 2-5 раз выше, чем при иммунизации. Реиммунизация эффективна также при получении сывороток против слабых антигенов, которые в первом цикле иммунизации вызывали образование иммунных антител со слабым титром. Реиммунизация животных теми же эритроцитами донора является эффективным приемом повышения титра получаемых сывороток. Однако и при реиммунизации не всегда удается получить необходимые антисыворотки. Все это указывает на недостаточную изученность иммунологических процессов.
Получение реагентов. Работа по изучению и практическому применению групп крови животных и изготовлению моноспецифических сывороток (реагентов) возможна только в условиях хорошо оборудованной иммуногенетической лаборатории, в которой имеются:
- иммунологические пластмассовые блоки, для постановки реакции гемолиза и агглютинации;
-
бактериологические пробирки со штативами для приготовления суспензии эритроцитов из крови панельных животных, а также для отбора проб крови у исследуемых животных;
-
пастеровские, лабораторные пипетки объемом на 1, 2, 5,
-
10 мл;
-
полиэтиленовые сосуды емкостью от 100 мл до 1 литра
-
для отбора крови и хранения сыворотки;
-
шприцы для иммунизации;
-
иглы для взятия крови;
-
шкафы для стерилизации стеклянной посуды при тем-
-
пературе 120°С;
-
аппараты для дистилляции воды;
-
центрифуги со скоростью вращения не менее 4000
-
об/мин;
-
вакуумные и водоструйные насосы для отсасывания сы-
-
воротки или надосадочной жидкости;
-
низкотемпературные холодильники с температурным
-
режимом в пределах- 15-20°С;
-
холодильники с температурным режимом +2, +4°C;
-
весы для взвешивания реактивов;
-
реактивы для изготовления изотонического и антикоа-
-
гулирующего растворов (хлористый натрий, 3-х замещенный лимоннокислый натрий, глюкоза, реванол, альбуцид);
-
бланки протоколов и карточек.
-
Для определения эритроцитарного антигенного состава
-
крови животных донорского стада из яремной вены берут по 10-15 мл крови в хорошо закрывающиеся пробирки, в кото-
-
рые, в целях предотвращения свертывания крови, заранее вносится консервант из расчета 1/4 - 1/5 объема крови.
