- ca - 203- фисте он. виден при извлечении из кобылы невооруженным глазом и очень ‘удобен: для работы. Кроме того, физиологической особонностью кобыл является задержанный, по сравнению с другими _*видами- насельскохозяйственных30-й день после ‘овуляцииживотных, еесрок имплантациизначительно onзаро| Ширяет возможности исследователей в области ттансплантации | зародышей лошадей, в частности при культивировании эмбрионов. Однако, методика. инкубации бластоцист лошади в литератуew ee erie В 1982 году в лаборатории физиологии размножения ВНИИ коневодства начаты исследования по культивированию эмбрионов ло| — идей. В культуральных средах”были апробированы сыворотка кро| вы КРС и плазма ВЕсемени жеребцааспа на базе фоофатно-солевого буферHoro раствора Дюльбекко: Удовлетворительных результатов полумить не удалось. Впоследствии B состав культуральной среды бы| IM BIOTOUBHE КОбылье молоко и желток куриного яйца. | №териал Для выявления оптимального соотношения подобранных компонен| и методика | тов (раствор Дюльбекко, желток и кобылье молоко) был использован метод треугольной трехкомпонентной диаграммы Гиббса-Розебома (I). Готовили 21 вариант среды. Соотношение концентраций | принятых ингредиентов в приготавливаемых растворах варьировали с 204-ным интервалом (рис. Г). Молоко предварительно расфа, осовывали в ‚пенициллиновые флаконы и @ETORRABBBOS=TE® Hoxton брали только из свежеснесенных яиц категории "диетическое". В | культуральную среду добавляли антибиотики из расчета: 100 ед. пенициллина и 0,5 мг стрептомицина на I мл среды. Извлеченные 'нехирургическим методом 8, 5-дневные эмбрионы ‚ лошади помещаля в испытуемые среды и культивировали в термоотате при 37°C. В первой серии опытов инкубацию проводили в | — течение 12 часов, во второй серии - в течение 24 °ссов. До и после культивирования эмбрионы измеряли и оценивали по морфологическим признакам (табл. Г). В эксперимент включали эмбри| оны только отличного качества. Интенсивность роста бластоцист ` в культуре определяли по формуле: | V | где J - интенсивностьJ = aроста бластоцисты100 4, (%),Vz - объем блас-
и |
NTA ААА |
.
- 204 - an
Е a:
a oe ингредионтов ( раствора i Дольбокко eeeсунок I, |
лока) в составе‘ испытываемых вариантовon ai cpems т
ie .
р reo-0% a у ы.
2
ж-80%1 fs -
ыйс-0% : |
Г5 ah9-206 й з:
: 2-60 ж-6
Е] м-20% а }
‘ Of с-40%
то ‚
/
x-40% 8 в д
м-60% ig i о
5-0 9-20 nr м-50-60% у
м 20%BOF 17ж- sug 13ж-2 raee ‘i , —
way we© cigс-40% xyc-60% <780% .
"=
16 17
ae #08 a8 of 19 на 26 s
м-Т00% м-80% peal Ж- ж-0% вы
c=0% -20% woe nei M-202 a
у — e108
Обозначения:,
cor |- * варианта среды
u-208 | — KowuontpenmО ция молокаMOJIOL
920% |- концентрация солевого раствора
оо.
- 205 -
тоцисты до культивирования, Vp - объем бластоцисты после куль- |
тивирования. =~ Soak; Таблица Г.
Щкала: оценки 8-9 дневных бластоцист лошади по морфологи- ||
`
ческим признакем, .. множенияпринятаялошадей“ВНИИв лабораторииконеводствафизиологии раз- |
ОЕ ЗЕ aa aT ИИ
оМорфологические. признакиинститута11 Оценка | |
3 клеточной !оболочки 1рачность,
| : ООНобласта и|Собволниемы шаПроза. | |
Форма | “Размер ‘ eee npe-tenacronentseponh
Waposug- 1.9Э-дн.-не ме-. '1Эмбриоблас! Бласто- | |
1 + mat | ! |
ная нее 1,5 мм лемма не
дн т ae а видна и pe ae 5 баллов |
Hee 0.7 мм ИАОтНО об- |
ту |
бластоцис-
Шаровид- Э-дн,-не Me- | Бластолем-
най,допу-скается нее 1,0 мм Нормаль-ное мн а неи плот-зраченвид-Полупро- 4 балла.
слегка, Senne He bom но облега- |
еплипсо- идная “ee 9,0 мм етцистубласто- |
Шн а я,ровид- допу- Э-дн.-неmec 1,0 м м е- Кормаль- Властолем-М8 видна и
скается в Ona слегка от-Полупроз-3 балла
эллипсои- ВОН ме НОО слоена от paueH
saan нее Uy бластоцис-
TH
|
Сморщен- Размер таких Клетки Бластолем- |
ne Mane geen cee gras те Мутный 2 балла
Qexant—14- не принима- шиеся отслоена
гаябо дру- ется нойот клеточ-массы
Зародыш не освободился от блестящей оболочки I балл
ола ест )
8906 CE
. серии.ВсегоТакимбылообразом,прокультивированокаждый вариант42 эмбриона,среды былапробированпо 21 в каждой ||
| |
