LABCONCO. Синтезированные праймеры переосаждали этанолом, ресуспендировали в высокоочищенной воде и хранили при минус 20⁰ С. Наработку специфических участков ДНК проводили в термоциклере с градиентом температур Mastercycler gradient, Eppendorf .

Электрофорез продуктов амплификации ДНК бактерии Pasteurella multocida проводили в аппарате для горизонтального электрофореза "G-100", фирмы "Pharmacia'', при напряжении 8 В/см. Для электрофореза использовали 2 % раствор агарозы в TBE-буфере. Документирование полученных результатов проводили через трансгельиллюминатор. Последующий анализ результатов проводили с использованием программы Digi-Doc-It.

В качестве маркера молекулярных масс использовали "DNA Wide Range marker" и "DNA Ladder 1kb" фирмы "Sigma"

2.2 Результаты исследований

2.2.1 Изучение распространенности пастереллеза в Костанайской области

На территории Казахстана, согласно данным ветеринарной отчетности, имеются энзоотические вспышки пастереллеза среди крупного рогатого скота. За период с 2012 по 2015 годы в Костанайской области были подвергнуты патологоанатомическим и бактериологическим исследованиям пробы от 4357 голов павшего крупного рогатого скота, из числа которых выделено 802 культуры пастерелл (18,4%).

Таблица 2 - Информация о результатах бактериологических исследований сельскохозяйственных животных и птиц в Костанайской области за 2013 – 2015 гг.

Из таблицы видно, что к пастереллёзу восприимчивы все виды домашних животных и птицы. В 2012 году из 390 исследованных проб материала КРС с постановкой бактериологического диагноза получено 2 положительных результата (2,8%), из 360 проб материала от свиней – 46 положительных результатов (12,7%), 65 проб материала от птиц – 6 положительных результатов (5,3%).

В 2013 году исследовано всего 392 пробы материала от КРС, выделено 19 культур пастерелл (4,8%), 397 проб материала от свиней - выделено 58 культур (14,6%), 39 проб материала от птицы – выделено 3 культуры (8,1%).

В 2014 году бактериологически исследовано 379 проб материала от КРС – выделено 8 культур (2,1%), 383 пробы материала от свиней – выделено 7 культур (1,8%), 40 проб материала от птицы - выделена 1 культура пастерелл (2,5%). В 2015 году исследовано 837 проб материала от КРС– выделено 24 культуры (2,8%), 372 пробы материала от свиней – выделено 12 культур (3,2%), 9 проб патматериала от птицы - культуры не выделены.

Из таблицы видно, что было проведено значительное количество исследований биоматериала. Положительные результаты, полученные при исследованиях биоматериала от КРС, говорят о наличии носительства среди животных.

При исследованиях патологического материала больные животные выделяются чаще, чем при исследованиях биологического материала. Так, в 2012 году процент выделения культур при исследованиях патматериала от КРС составил 8,8%, от свиней -23,5%, от птиц -9,5%. В 2013 году процент выделения культур при исследованиях патматериала от КРС составил 5,8%, от свиней -31%, от птиц -8,1%. В 2014 году от КРС - 8,3%, от свиней - 23% и от птиц - 2,5% . В 2015 году – 12,5%, 3,2% и 0% соответственно (рисунок 3).

35
30
25
20
15
10
5
0
2012 год 2013 год 2014 год 2015 год
КРС
свиньи
птицы

Рисунок 3 - Положительные результаты бактериологических исследований патматериала от животных

Как видно из диаграммы, за анализируемый период в области выделение культур Pasteurella multocida из патматериала от крупного рогатого скота начиная с 2013 года растет: в 2013г 5,8%, в 2014 г - 8,3%, в 2015г - 12,5%. Наибольший процент выделения культур за анализируемый период (2012 – 2015 г) наблюдается у свиней – 15,5%, крупного рогатого скота – 7,3% и птицы – 6,7% (рисунок 4).

Как видно из диаграммы за 3 анализируемых года заболеваемость крупного рогатого скота пастереллезом превосходит заболеваемость