длительное время или же переходить в анергию (ареактивность), которая может быть положительной или отрицательной. Положительная анергия обычно свидетельствует о том, что организм свободен от инфекции. Отрицательная анергия обусловливается туберкулезной кахексией организма, ухудшением его состояния, наступлением ареактивности клеток, подавлением защитных механизмов.
Аллергические диагностические пробы выявляют повышенную чувствительность клеток и тканей к специфическим аллергенам, тем самым позволяют определить инфицированность животных. Для аллергической диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота применяют туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих (РРД purufied protein derivative), который выпускается в сухом виде или в виде стандартного раствора.
Основным методом туберкулинизации крупного рогатого скота признана внутрикожная проба; глазная проба применяется лишь в отдельных случаях одновременно с внутрикожной пробой. Согласно наставлению во всех хозяйствах, в том числе и в неблагополучных по туберкулезу, проводится однократная внутрикожная туберкулинизация (рис. 11).
Проявление и характер туберкулиновых реакций зависят от общего физиологического состояния организма, чувствительности его к туберкулину, а также от времени года и внешних условий. У животных
53
старых, с низкой упитанностью или с генерализованным туберкулезным процессом реакция на туберкулин может отсутствовать, это так называемая отрицательная анергия. Поэтому при аллергических исследованиях на туберкулез, проводимых в период зимне-весеннего стойлового содержания, остаются не выявленными туберкулезные животные.
В связи с этим массовые диагностические исследования на туберкулез следует проводить летом или осенью, когда животные находятся в хороших условиях кормления и содержания. Установлено также, что аллергическая реактивность зависит от уровня содержания витамина С в организме. При недостатке этого витамина аллергическая реактивность оказывается резко ослабленной, вплоть до полного выпадения. Интенсивность реакции зависит и от места инокуляции туберкулина. Так, в области шеи реакция была специфичной у 96,3% животных, хвостовой складки - у 98,8% животных (Kransis, 1978). Кроме больных, на туберкулин могут реагировать и животные, сенсибилизированные атипичными и сапрофитными микобактериями, о чем более подробно будет изложено в следующем разделе. Несмотря на имеющиеся недостатки, аллергическая диагностика приобрела широкую популярность и является основным методом массовой диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота. В необходимых случаях для подтверждения показаний туберкулиновой реакции проводят контрольно-диагностический убой животного.
Патологоанатомический метод.
Обнаружение туберкулезных изменений в тушах убитых животных играет важную роль в диагностике болезни. Поэтому инструкцией по борьбе с туберкулезом предусмотрено в хозяйствах, благополучных по туберкулезу крупного рогатого скота, при выявлении единичных положительно реагирующих на туберкулин животных подвергать их контрольному убою с последующим тщательным патологоанатомическим исследованием. В случае выделения более 10 - 20 положительно реагирующих животных контрольному убою подвергают 5-10 голов, остальных изолируют.
Послеубойный осмотр животных следует проводить особенно тщательно. В области головы обращают внимание на средние и латеральные заглоточные, подчелюстные и околоушные лимфоузлы. Осмотр ливера начинают с легочных лимфоузлов: левого и правого бронхиальных, а также средостенных (краниальные, средние и задние). Все лимфоузлы разрезают по длине на тонкие пластинки. Легкие исследуют пальпацией и путем поперечных разрезов толщиной 10 - 15 см. Осматривают и другие органы (печень, селезенку, почки). При осмотре вымени делают продольный разрез каждой доли и надвымянных лимфоузлов. Из пищеварительных органов исследуют серозную оболочку кишок и вскрывают все брыжеечные лимфоузлы. Обследуют предлопаточные, глубокие шейные, поверхностные паховые, глубокие паховые и другие лимфоузлы туши.
У коров первичный туберкулезный процесс в 94% случаёв обычно локализуется в легких, бронхиальных, средостенных, а в остальных случаях в заглоточных лимфоузлах. Макроскопически сформировавшийся туберкулезный узелок представляет собой плотное округлое образование различной величины. Центральная его часть желтовато-белого цвета, крошится наподобие творога (казеозный некроз), в ней можно увидеть и прощупать крупинки извести. По периферии располагается серовато-белый пояс грануляционной ткани.
Bo всех случаях, когда обнаруживают туберкулезные изменения и когда их не выявляют, проводят лабораторные исследования. Материал для лабораторного исследования нужно брать сразу же после убоя животного/вырезая кусочки размером 10 - 15 мм в длину, 5 - 10 мм - в ширину и З - 4 мм в толщину. Кусочки паренхиматозных органов и лимфоузлов помещают в чистую стеклянную посуду и заливают фиксирующей жидкостью. Для бактериологических исследований материал фиксируют 30 %-ным водным раствором глицерина, для гистологических исследований - 8 - 10 %-ным раствором формалина.
Лабораторные методы диагностики.
B лаборатории материал исследуют бактериоскопическим (световая и люминесцентная микроскопия), бактериологическим (выращивание на искусственных питательных срёдах), биологическим (биопроба на морских свинках, кроликах и курах) и гистологическим методами.
Бактериоскопический метод. Для прижизненного диагноза используют молоко, бронхиальную слизь, фекалии, истечение из влагалища, иногда сперму и мочу; для посмертного - кусочки пораженных и непораженных паренхиматозных органов: легких, печени, селезенки, а также лимфоузлов.
B лаборатории прежде всего проводят бактериоскопию мазков, окрашенных по Цилю - Нильсену, или используют люминесцентный метод. Данный способ окраски основан на тинкториальном свойстве микобактерий принимать красный цвет (по Цилю -Нильсену) и сохранять устойчивость при воздействии кислот и щелочей.
Люминесцентный способ основан на способности микобактерий к окрашиванию люминесцирующими красителями и свечению под действием сине-фиолетового освещения. От каждого органа готовят по два мазка. B каждом окрашенном мазке просматривают под микроскопом не менее 50 полей зрения. Более чувствительным считается люминесцентный метод. Разработан ускоренный метод выделения туберкулезных микобактерий из молока с помощью прямого флуорохромирования. При этом, в 100% случаев результаты подтверждены классическими исследованиями - заражением животных и выделением чистой культуры (В.M. Карташова, 1976). Однако как положительные; так и отрицательные результаты световой и люминесцентной микроскопии следует подтверждать, особенно при
