Современные методы диагностики и меры борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота

• 757 тысяч, телок, завезенных из других хозяйств для замены неблагополучного поголовья - 23 тысячи, коров - 70 тысяч, откормочных животных - 150 тысяч голов. Из 517 хозяйств, в которых скот иммунизировали вакциной БЦЖ, оздоровлено от туберкулеза 284 (54,9%), резко снизилась заболеваемость в 135 (26,1%) хозяйствах.

Показано, что применение вакцины БЦЖ на молодняке позволяет в течение 1 - 1,5 года снизить заболеваемость животных и на фоне выполнения общего комплекса противотуберкулезных мероприятий полностью оздоровить поголовье от туберкулеза.

В связи с применением вакцины в широких масштабах и производством вакцины специально для крупного рогатого скота, наставление по применению вакцины БЦЖ при туберкулезе крупного рогатого скота было переутверждено ГУВ Государственной комиссии СМ СССР по продовольствию и закупкам в феврале 1990 г. Применение вакцины БЦЖ осуществляется с учетом эпизоотической обстановки хозяйств по туберкулезу крупного рогатого скота.

Так, по данным Коваленко А.М. (1994 г.) в результате широкомасштабной иммунизации комплекса противотуберкулезных мероприятий в Никопольском районе Днепропетровской области за 5 лет в 31 раз уменьшилось число реагирующих животных на туберкулин, а туберкулезные изменения при ВСЭ туш убойных животных с 618 в 1988 году до прекращения таковых животных.

На основании эпизоотических наблюдений, изучения у иммунизированных животных клеточных реакций (бласттрансформации лимфоцитов), результатов контрольных заражений этих коров, проведенных через различные сроки после вакцинации, был сделан вывод о том, что иммунитет к туберкулезу даже при высокой вирулентности возбудителя сохраняется у привитых животных до трех лет и более. Возникает иммунитет через 1 - 3 месяца после вакцинации.

Иммунобиологические реакции у животных, привитых вакциной БЦЖ. Иммунизация против туберкулеза вакциной БЦЖ обусловливает не только выработку специфического иммунитета, но и вызывает ряд физиологических сдвигов (В.Н. Черниговский, Г.С. Нан, Б.И. Альбертинский, 1962). Одним из механизмов усиления иммунных реакций организма под воздействием БЦЖ, по данным Zatr (1976), может быть действие вакцины на регуляцию перемещения лимфоцитов к лимфоидным тканям. Автор наблюдал через 1 - 2 дня после введения БЦЖ и черёз 3 недели накопление лимфоцитов в регионарных лимфоузлах и селезенке.

Противотуберкулезный иммунитет у вакцинированных животных оценивается по различным показателям: по параспецифическим морфологическим реакциям (усиление лимфоидной инфильтрации, гиперплазии ретикулярных и эндотелиальных клеток), по аллергическим туберкулиновым реакциям и т.д. В последние годы предложены и другие показатели, такие как реакция бласттрансформации (РБТ), с помощью

которой многие исследователи оценивают клеточный иммунитет (X. Шютт, 1979).

Установлено, что лимфоциты, взятые у лищ положительно реагирующих на туберкулин, при культивировании в присутствии ППДтуберкулина подвергаются митозу, тогда как лимфоциты лиц, отрицательно реагирующих на туберкулин, при культивировании в тех же условиях митозу не подвергаются. Эти наблюдения и определили возможность использования реакции бластрансформации лимфоцитов для изучения иммунитета. Под действием специфического антигена до 35%, а под действием фетогемагтлютинина ФГА - до 90 % лимфоцитов переходят в бласты (0.Е. Вязов, Ш.X. Ходжаев, 1973).

Лимфоциты, трансформирующиеся в бласты под влиянием специфического антигена, относятся к В-(антителопродуцирующим) и Т (ответственным за клеточный иммунитет) - клеткам и воспроизводимая in vitro реакция бласттрансформации - аналогична, реакции in vivo; она является начальным этапом иммунного ответа (Э.Н. Шляхов, 1977) .

Бласттрансформация представляет собой ранний этап процесса распознавания лимфоцитами чужеродных антигенов, она сопровождается усилением синтеза ДНК и последующим делением бластов (А.С. Шевелев, 1978). Если в культуре с антигеном бласты присутствуют в большем количестве, чем в культуре без антигена, то это является доказательством наличия клеточного иммунитета (М.М. Авербах, В.И. Литвинов, 1972; У.Д. Герберт, 1974). Показатели РБТ лимфоцитов возрастают в случае повышения устойчивости организма к туберкулезу и снижаются при ее падении.

Показателем наличия противотуберкулезного иммунитета в привитом вакциной БЦЖ организме считается также персистенция в нем микобактерий БЦЖ в виде Л-формы. 3.Н. Качемасов (1968, 1969, 1970) и др. выявили у микобактерий туберкулеза так же, как и у многих других, видов микроорганизмов, способность персистироваться, т.е. образовывать Л- формы. Последние длительно сохраняются и могут дать реверсию в исходный микробный вид с восстановлением вирулентности.

Оставалась неизвестной форма персистирования в организме иммунизированных микобактерий вакцинного штамма БЦЖ. Было доказано, что микобактерии БЦЖ в организме проходят несколько фаз: адаптации - 15 дней; максимального развития (вегетирования) - до 50 дней после вакцинации; стационарного вегетирования - до 150 дней; постепенного угасания. С 5 - 11 мес. с момента, вакцинации микобактерий БЦЖ в организме не выявляются (0.Р. Драбкина, 1959; А.И. Каграманова, 1961). Однако фактором, обусловливающим иммунитет при туберкулезе, А. Кальметт и его школа считали наличие в организме живых бактерий, что лежит в основе существующих взглядов и на БЦЖ как на фактор индуцирующий иммунитет. По данным многочисленных исследователей, иммунитет после вакцинации БЦЖ развивается 1 - 3 месяца, держится на высоком уровне 2 -3 года и в определенной степени сохраняется до 6 - 7 лет

(Л.А. Митинская, 1966, и др.). Таким образом, сроки выведения из организма микобактерий вакцинного штамма БЦЖ и длительность иммунитета не совпадали, к тому же не было известно о судьбе микобактерий БЦЖ в организме вакцинированных. В последующем Н.Л. Шмелев, И.Р. Дорохова и 3.С. Земскова обнаружили у микобактерий БЦЖ способность образовывать Л-формы, т.е. персистироваться в привитом организме в Л-форме длительное время, поддерживая противотуберкулезный иммунитет.

Исследованиями И.Р. Дорожковой (1974) установлено, что уже через 2 недели после вакцинации из лимфоузлов выделяются наряду с бактериальными формами и Л-формы. По мере увеличения срока с момента вакцинации процесс Л-трансформации постепенно углублялся: до 5 мес. выделялась смесь Л-формы и БЦЖ, после 5 мес. бактериальные формы обнаруживались лишь в единичных случаях, к 11 месяцам имелись только Л- формы. Все эти факты свидетельствуют о том, что специфический иммунитет противотуберкулезной инфекции существует довольно длительно в результате индуцирования микобактериями или их антигенами.

Для изучения напряженности поствакцинального иммунитета у крупного рогатого скота, привитого вакциной БЦЖ, использовали клеточную реакцию бласттрансформации лимфоцитов (М.А. Сафин, 1976). У животных, исследованных РБТЛ после иммунизации, отмечалось активное бластообразование (табл. 6). В мазках, окрашенных азур-эозином, лимфоциты имели характерные круглой формы ядра. Последние были плотными, располагались чаще эксцентрически, в узком поясе цитоплазмы. Наблюдались весьма значительные колебания в размерах лимфоцитов

Лимфобласты в отличие от лимфоцитов имели большое ядро, неравномерно распределенный хроматин, выраженную перинуклеарную зону; они отличались также размером и конфигурацией цитоплазмы. Ядра чаще имели вид «формы Ридера». В мазках лимфобласты обычно располагались группами, по 2 – 3 и более. Таблица 6. Результаты реакции бласттрансформации лимфоцитов у крупного рогатого скота.

Примечание: доза туберкулина 60 мкг/мл.

В группах животных, вакцинированных БЦЖ, отмечалось бластообразование до 12 - 17% лимфоцитов.