Современные методы диагностики и меры борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота

У животных, клинически здоровых и не привитых БЦЖ, реакция бласттрансформации лимфоцитов со специфическим антигеном ППД чаще была отрицательной или же не превышала 3%.

У животных, зараженных, возбудителем туберкулеза, отмечалось резкое угнетение бластообразования. В культурах лимфоцитов под влиянием ППД образовалось в среднем 1,5% бластов, при контроле - 0,5%. Большая часть бластов у данных животных, под действием антигена ППД подвергалась разрушению.

Таким образом, результаты исследований показали, что у животных, иммунизированных вакциной БЦЖ, продолжительность аллергической реакции на внутрикожное введение туберкулина не превышает обычно 10 - 12 мес. Но реакция стимуляции бласттрансформации в культуре лимфоцитов периферической крови у этих животных под влиянием туберкулина сохраняется годами.

Следовательно, РБТ лимфоцитов in vitro позволяет судить о наличии и напряженности клеточного иммунитета у крупного рогатого скота против туберкулезной инфекции.

При изучении напряженности и продолжительности иммунитета у вакцинированных БЦЖ животных мы также определяли формы персистирования микобактерии БЦЖ в организме (М.А. Сафин, 1980). Исследования проводили по методу Дорожковой (1974), а также бактериологически и с помощью биологической пробы на морских свинках (табл. 7). Материалом для исследования служили лимфоузлы и паренхиматозные органы вакцинированных БЦЖ животных, взятые асептически сразу после убоя в различные сроки после проведения вакцинации (от 1 лет).

Таблица 7. Результаты микробиологического исследования материала, полученного от телят, вакцинированных БЦЖ.

У всех культур изучали морфологические и культуральные особенности, а также вирулентность для лабораторных животных. Культуры, представляющие собой смесь бактериальных и нестабильных Л-форм микобактерий БЦЖ, на плотных питательных средах дали рост в виде сухих

морщинистых колоний светло-кремового цвета, а на среде Школьниковой - типичные «косы», состоящие из микобактерий БЦЖ.

В мазках обнаруживались скопления однородной зернистости, среди которых, выявлялись и отдельные микобактерий БЦЖ. При двух-трех последовательных пассажах на морских свинках получали чистую культуру БЦЖ. 16 культур при пересевах на плотных и жидких средах, а также при пяти последовательных пассажах на морских свинках оказались условно стабильными. Они давали рост подобных себе культур, состоящих из скоплений темных и. светлых шаровидных тел различной величины или же в виде различных типов зернистости, где микобактерий БЦЖ в бактериальной форме отсутствовали.

Эти культуры при дальнейших пересевах утратили рост. Принадлежность их к БЦЖ была доказана косвенным методом на основании вызванных ими в лимфоузлах у морских свинок специфических изменений, характерных для морфологических реакций при нормальном вакцинном процессе.

Из выделенных нами культур 6 оказались нестабильными вариантами Л-форм и при последовательных двух пассажах - одна культура, трех пассажах - 3, четырех пассажах - 2 культуры дали реверсию в бактериальные формы БЦЖ, что явилось прямым доказательством их принадлежности к микобактериям вакцинного штамма БЦЖ. Они росли на плотных питательных средах в виде сухих морщинистых выпуклых колоний светлокремового цвета. Колонии были нежными и росли менее интенсивно, чем обычная культура БЦЖ.

На жидких средах они росли в виде обрывков «кос». В мазках, окрашенных Циль-Нильсену, обнаруживались красные полиморфные зернистые палочки. Ниациновая проба дала у всех культур отрицательный результат, что подтверждает их принадлежность к микобактериям бычьего вида (БЦЖ). Все они оказались устойчивыми к циклосерину, что является одной из биологических особенностей вакцинного штамма БЦЖ, и чувствительными к стрептомицину и ПАСК.

В основе феномена Л трансформации лежит нарушение координации роста и размножения микробной клетки. Л-формы образуются при воздействии факторов, вызывающих дисфункцию их роста и размножения, разрушающих поверхностную структуру клеточной стенки, блокирующих отдельные - звенья ее синтеза и повреждающих глубоко локализованные элементы цитоплазматической мембраны или цитоплазмы, связанные с синтезом клеточной стенки. В специальной литературе имеется много данных об Л-трансформирующем воздействии противотуберкулезных препаратов - изониазина, рифамицина, циклосерина и других, а также некоторых антибиотиков. Наилучшие результаты получены при совместном воздействии пенициллина и дигидрострептомицина. Однако в вакцинированном организме животных Л-индуцирующим фактором является макроорганизм со всеми его защитными механизмами. Животные,

вакцинированные БЦЖ, антибиотиков не получали, тем не менее, через различные сроки после вакцинации получены Л-формы микобактерий вакцинного штамма БЦЖ, которые вызывали у лабораторных животных изменения, характерные для нормального вакцинного процесса. Л-формы БЦЖ, длительно персистируя в вакцинированном организме животных, на долгое время обусловливают его резистентность к туберкулезу.

Гистологические и биохимические изменения в организме вакцинированных телят. Наиболее достоверным критерием оценки напряженности противотуберкулезного иммунитета у привитых телят является устойчивость их к заражению в условиях постоянного контакта с больными животными. С этой целью телят через 2 мес. после вакцинации поместили в группу больных туберкулезом животных. Затем через 6 мес. совместного содержания их подвергли убою и провели тщательное исследование органов. Патоморфологические изменения в органах и тканях подопытных телят были в основном однотипны, поэтому считаем целесообразным привести их общее описание.

В лимфоузлах и селезенке животных, иммунизированных против туберкулеза, отмечены усиление лимфоидно-гиперпластической, макрофагальной и плазмоцитарной реакций, а также повышенный распад зрелых лимфоцитов. Реактивные центры фолликулов заглоточного, предлопаточного, средостенного и бронхиального лимфоузлов имели сравнительно крупные размеры и содержали значительное количество ретикулярных клеток бластов, единичные лимфоциты и макрофаги. В цитоплазме последних, как правило, обнаруживались обломки ядер распавшихся клеток. В большинстве фолликулов из-за расширения реактивных, центров ретикулярная строма оттеснена к периферии. Наряду с такими фолликулами встречались фолликулы с явлениями редукции. В последних отмечалось разреженное расположение клеток, причем некоторые из них имели угловатые формы и пенистую цитоплазму. В периферической зоне расширенных реактивных центров имелись компактные скопления зрелых лимфоцитов, среди которых многие были представлены в виде «голых ядер». Мякотные тяжи лимфоузла гиперплазированные, содержали в основном малые и средние лимфоциты, клетки плазмоцитарного ряда и единичные бласты. Эндотелиальные клетки посткапиллярных венул пролиферированы, ядра их просветленные, увеличенные в размерах, округлоовальной формы.

В стенках большинства артериол, венул и некоторых капилляров имелись признаки мукоидного набухания и увеличенное количество кислых мукополисахаридов в основном веществе соединительной ткани. При этом эндотелиальные клетки интимы пораженных сосудов были пикноморфны, нередко слущены. Однако не во всех сосудах даже одного и того же лимфоузла темпы развития и характер проявления вышеуказанных процессов были одинаковыми. В некоторых случаях мукоидное набухание стенки сосудов сменялось явлениями фибриоидного набухания с последующей