рекиси водорода добавляют 99,4 мл дистиллированной воды. Концентрацию перекиси определяют титрованием 0,1н раствором перманганата калия (KMnO4). На титрование 3,0 мл 0,333н перекиси водорода должно пойти 10,0 мл 0,1н раствора перманганата калия. По результатам титрования раствор перекиси водорода доводят до нужной концентрации дистиллированной водой.

3) Приготовление молочной сыворотки. Пробу молока центрифугируют в течение 15 мин при 2000 об/мин. Ставят в морозильную камеру холодильника на 20-30 мин для застывания жира. Слой жира удаляют шпателем, молоко нагревают до 37°С. Затем добавляют сычужный фермент на кончике скальпеля, выпавший в осадок казеин отделяют центрифугированием, а сыворотку молока фильтруют через бумажный фильтр.

Проведение анализа

В термостатируемую кювету с рабочей длиной 10 мм наливают 2,0 мл раствора бензидина и 0,5 мл раствора перекиси водорода, предварительно подогретых до температуры 37°С. Содержимое кюветы, перемешивают и устанавливают на спектрофотометре при длине волны 520 нм нулевую отметку шкалы оптической плотности. Затем в кювету добавляют 0,1 мл исследуемой сыворотки молока, перемешивают и ровно через 60 сек определяют оптическую плотность. Аналогично опытной пробе проводят измерение оптической плотности контрольной пробы, содержащей вместо сыворотки молока 0,1 мл дистиллированной воды.

Обработка результатов

Активность ЛПО выражают в условных единицах активности (УЕА) и рассчитывают по формуле:

УЕА = ( Е0 - Ек ) × 10 / 60 , где

УЕА – активность фермента, Ед.ОП/мл; Е0 – оптическая плотность опытной пробы; Ек – оптическая плотность контрольной пробы; 10 – коэффициент пересчета в 1 мл;

60 – время проведения реакции, сек;

1 УЕА – изменение оптической плотности на 0,01 за 1 сек

1 мл сыворотки молока.

Модифицированный метод Орама и Рейтера Подготовка к анализу

1) Приготовление 0,1М фосфатного буфера (рН=6,7). 6,8 г двузамещённого фосфорнокислого калия (КН2РО4) растворяют в 500 мл дистиллированной воды. 11,4 г трёхводного однозамещённого фосфорнокислого калия (К2НРО4 ×3H2O) растворяют в 500 мл дистиллированной воды. В раствор КН2РО4 под контролем рН-метра приливают раствор К2НРО4 до рН 6,7.

2) Приготовление 0,01% раствора орто-дианизидина. 10 мг орто-дианизидина растворяют в 100 мл 0,1М фосфатного буфера рН 6,7.

3) Приготовление молочной сыворотки. Пробу молока центрифугируют в течение 15 мин при 2000 об/мин, ставят в морозильную камеру холодильника на 20-30 мин для застывания жира. Слой жира удаляют шпателем, молоко нагревают до 37°С. Добавляют на кончике скальпеля сычужный фермент, выпавший в осадок казеин отделяют центрифугированием, а сыворотку молока фильтруют через бумажный фильтр.

Проведение анализа

К 3 мл 0,01% раствора орто-дианизидина добавляют 0,1 мл исследуемой сыворотки молока, тщательно перемешивают и определяют экстинкцию на спектрофотометре при длине волны 460 нм с рабочей длиной кюветы 10 мм. Затем в кювету доливают 0,1 мл 9 мМ перекиси водорода, хорошо перемешивают и выдерживают в водяной бане или термостате при температуре 37°С 5 мин. Снова измеряют экстинкцию при той же длине волны.

Обработка результатов

Активность ЛПО выражают в условных единицах активности (УЕА) и определяют по формуле:

УЕА = ( Д0 – Д5 ) / 5 , где

Д0 – начальная экстинкция молока;

Д5 – экстинкция через 5 мин;

5 – время инкубации образца при температуре 37°С, мин;

1 УЕА – изменение экстинкции на 0,001 единицы за 1 мин 1 мл сыворотки молока.

5. ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ МАСТИТОМ КОРОВ

5.1. Общие требования

Лечение больных маститом коров должно быть комплексным, направленным на подавление жизнедеятельности микрофлоры, повышение факторов общей неспецифической резистентности всего организма и локальных механизмов защиты молочной железы, устранение болезненности и отечности её тканей, восстановление физиологической функции поражённых долей (рис. 17) [66, 67, 69, 80].

Интрацистер- Инъекционные ан- Противовоспали-
нальные средства тимикробные сред- тельные средства
ства
Антибиотики Пенициллины Глюкокор-
тикоиды
Антибиотики+противо- Цефалоспорины
воспалительные сред- НПВС
ства Тетрациклины
Другие средства (фер- Аминогликозиды
ментные, др. антимик-
робные)
Фторхинолоны

Рис. 17. Общая схема лечения мастита коров.

Коров, больных маститом, переводят в стационар, где организуют ручное доение. Если такие условия отсутствуют, то больных коров выдаивают доильным аппаратом в последнюю очередь. Поражённые четверти вымени освобождают от секрета вручную в специальную ёмкость, а остальные – доильным аппаратом. Для удаления патологического секрета при острой форме мастита сдаивание проводят через 2-3 ч, при подострой и хронической – в обычные сроки доения. Для разжижения