Современные методы диагностики и меры борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота

вида и 28,5% к атипичным микобактериям. И.И. Румапчик и А.А. Солонеко (1980) экспериментально доказали возможность воспроизведения микобактериозов у свиней как при алиментарном введении атипичных микобактерий, так и контактно при совместном содержании больных и здоровых свиней. Они обнаружили в 2,4% случаев туберкулезоподобные изменения в органах этих животных. Некоторые исследователи считают свиней основным источником атипичных микобактерий группы intracellure. Так, Tsukamura, Nomoto (1973) указывают, что в Японии 98% микобактериозов вызывается именно этой группой атипичных микобактерий. Resnicov, Ziggo (1974) выявили значительную обсемененность почвы микобактериями intracellure. Из 80 образцов почвы, взятой в частях и общественных садах, в З6 обнаружены эти микобактерии. Ionoviec (1972) из исследованных проб почвы и зеленого корма выделил атипичные микобактерии, фотохромогенные в 63% случаев, нефотохромогенные - 18,9, быстрорастущие - 7,2 и патогенные - 0,9%. Я.А. Благодарный, И.M. Блехман (1976) выделил и атипичные микобактерии от клещей, диких птиц и на основании широкого распространения микобактерий туберкулеза и атипичных микобактерий среди многих видов диких птиц высказали предположение о наличии природных очагов туберкулеза и микобактериозов.

Немаловажную роль в сенсибилизации крупного рогатого скота к туберкулину играют и сапрофитные микобактерии, которые в отличие от туберкулезных апатогенны как для человека, так и для животных. Они свободно обитают в природе, и их можно выделить как в экскретах здорового человека так и из патологического материала, а также из объектов внешней среды (В.H. Васильев, 1971).

Разными исследователями описано более 200 штаммов кислотоустойчивых сапрофитных микобактерий. Истинные микобактерии сапрофиты в громадном количестве обитают в желудочно-кишечном тракте животных, птиц и людей (В.И. Ротов и др., 1978).

Название сапрофиты происходит от греческих слов saprotes - гнилой и phytou - растение, что указывает на одно главное их свойство - развитие на мертвом субстрате органического происхождения. Изменчивость сапрофитных микобактерий не изучена, не создана их систематика, патогенность их также остается спорной.

Литературные данные последних лет свидетельствуют о более частом нахождении этих микобактерий в органах и тканях крупного рогатого скота. 0.В. Марта (1964) из патологического материала телят, реагирующих на туберкулин, выделила кислотоустойчивые микобактерии - сапрофиты. По мнению И.В. Поддубекого (1965), только один штамм М. fortuitum из группы сапрофитных микобактерий обусловливает сенсибилизацию организма крупного рогатого скота к туберкулину. П.Е. Савченко (1965) наблюдал спонтанное инфицирование лошадей сапрофитными микобактериями. При этом в печени отмечались мелкие некротические очажки, и животные

положительно реагировали на туберкулин. Такие же микобактерии были выделены от собак, кошек и птиц.

Источники сапрофитных микобактерий почти не выяснены. Большинство исследователей считают, что микобактерии попадают в организм из внешней среды. M.А. Сафин (1976) изучил 26 культур выделенных от животных; из них 17 были не фотохромогенные и 9 фотохромогенные, быстрорастущие. По культуральным, биохимическим и тинкториальным свойствам все они были отнесены к 3 и 4 группам по классификации Раниона. Выделенные культуры оказались устойчивыми к пенициллину, биомицину, левомицетину, тетрациклину, эритромицину и препаратам ГИНК и ПАСК. B то же время они были чувствительны к мономицину, стрептомицину. Определение каталазной активности показало у 14 культур высокую, у 8 среднюю, у 4 слабую активность этого фермента. При внутрикожном и подкожном введении патогенность культур для кроликов и морских свинок была резко ослабленной, чувствительность к туберкулину сохранялась. У кур при заражении внутривенно этими штаммами появлялась положительная реакция на туберкулин, а на вскрытии специфические для туберкулеза изменения не наблюдались.

B целях проверки иммунизирующих свойств одного из выделенных штаммов мы провели опыты на 25 морских свинках, из которых 15 иммунизировали путем двукратного введения им внутрикожно по 0,5 мг атипичных микобактерий. 10 морских свинок служили контролем. Через месяц после иммунизации у всех подопытных животных отмечали хорошо выраженную аллергическую реакцию на туберкулин. Через 2месяца 5 свинок были убиты и подвергнуты тщательным патоморфологическим исследованиям. При этом не было отмечено свойственных для туберкулеза изменений, за исключением гиперплазии лимфоидной ткани в регионарных лимфоузлах. В дальнейшем все подопытные и контрольные морские свинки были заражены вирулентным штаммом микобактерий бычьего вида (подкожно по 1 мг в 0,5 мл физраствора), При одинаковых условиях кормления и содержания все 10 контрольных морских свинок пали в течение 3 мес. после заражения, с признаками генерализованной формы туберкулеза. Подопытные животные остались живыми. У них отмечалось увеличение регионарных лимфоузлов и были единичные туберкулезные узелки (величиной с конопляное зерно) в печени. Вероятно, у животных, пораженных атипичными микобактериями, инфекция протекает в такой форме, при которой взаимодействие между микро- и макроорганизмом не вызывает болезни, но сопровождается субиммунизацией организма. O подобных наблюдениях сообщают и другие авторы. Например, по данным E.А. Суворова (1980), в зонах, где распространены не патогенные кислотоустойчивые микобактерии, заболеваемость туберкулезом значительно ниже.

Количество исследований и выделение атипичных и сапрофитных микобактерий от различных видов животных и птиц из года в год

увеличивается. Большое внимание к ним уделяется в связи с аллергизирующей их способностью, так как по результатам туберкулиновой пробы решается вопрос: подлежит животное убою, или нет. Все это обусловило поиски различных методов дифференциации кислотоустойчивых микобактерий от возбудителей туберкулеза.

Кислотоустойчивые сапрофиты сравнительно нетрудно отличить от микобактерий туберкулеза, так как, кроме отсутствия патогенности для морских свинок и белых мышей, они на питательных средах растут при комнатной температуре в течение 4 - 5 дней.

Атипичные микобактерии, с одной стороны, имеют черты сходные с микобактериями туберкулеза - морфологию, кислото- и спиртоустойчивость, а с другой - по ряду свойств близки сапрофитам: вид колоний, скорость роста, ферментативная активность и лекарственная устойчивость. Все это обусловило поиски многочисленных методов для дифференциации микобактерий.

Для дифференциации атипичных и сапрофитных микобактерий от микобактерий туберкулеза ВОЗ дает рекомендации, разработанные на симпозиуме в г. Праге в июне 1964 г., по использовании двух групп тестов: основных и дополнительных. К основным относятся тесты: спиртоустойчивость, окраска по Граму, рост при температуре 22 - 37⁰ C (таблица 1), скорость роста, морфология колоний, их пигментированность. Сюда же включены биохимические тесты: ниациновый, амидазные, восстановление нитритов и нитратов, некоторые ферментативные реакции (с липазой, фосфатазой), а также биологические тесты на подопытных животных (морские свинки, кролики, белые мыши, птицы).

Таблица 1. Культуральные свойства атипичных и туберкулезных микобактерий.

К дополнительным тестам относятся: действие на глициды, чувствительность к туберкулостатикам; каталазная и пероксидазная активность (табл. 2).

Патогенность атипичных и кислотоустойчивых микобактерий изучают на морских свинках, кроликах и белых мышах. Как правило, атипичные