оставление в гуртах и выращивание для воспроизводства телочек, полученных от туберкулезных коров; течение туберкулеза в форме латентного микробизма и переход латентной формы в активную; длительное сохранение микобактерий туберкулеза во внешней среде; несбалансированное кормление и плохие условия содержания, а также занос микобактерий туберкулеза в хозяйство повторно.
B каждом случае при появлении туберкулеза крупного рогатого скота необходимо выявить пути заноса инфекции, всесторонне изучить эпизоотическую ситуацию, механизмы заражения скота, закономерности и особенности развития эпизоотического процесса. Все это нужно учитывать при составлении конкретного оперативного плана борьбы с туберкулезом.
ПАТОГЕНЕЗ
Морфологическим субстратом, определяющим характер клиникоанатомического проявления туберкулеза, является туберкул (бугорок, гранулема). В последние десятилетия проведены фундаментальные исследования, которые в значительной мере изменили существующее представление о сущности гранулематозного воспаления. B частности, выяснены вопросы клеточного состава и гистогенеза гранулем, связь гранулематоза с реакциями гиперчувствительности замедленного типа и иммунитета, прослежены основные закономерности развития специфического воспалительного процесса. Установлено, что основной клеточный компонент гранулемы - мононуклеарные фагоциты. Развитие гранулем проходит 3 стадии: 1) накопление молодых мононуклеарных клеток; 2) созревание этих клеток в макрофаги и формирование ими зрелой гранулемы; 3) дальнейшее созревание мононуклеарных фагоцитов в эпителиоидные клетки, слияние последних или макрофагов в гигантские клетки инородных тел, из которых в определенных условиях развиваются клетки Пирогова-Лангханса. Такую трансформацию клеток гранулемы принято рассматривать как свидетельство развития антимикробной устойчивости (Л.В. Хейфец, 1977) .
Дифференциация моноцитов в зрелые эпителиоидные клетки при туберкулезе является постоянным процессом и состоит из двух фаз: фазы биосинтеза, когда основным компонентом клеток является эндоплазматический ретикулум, и фазы секреторной, когда образуется в цитоплазме значительное количество везикул и активно развивается комплекс Гольджи (Броуст, Симпсон, 1979).
Эволюция - клеток туберкулезньгх гранулем прослежена с помощью электронного микроскопа. Мононуклеарные клетки, превращаясь в макрофаги, увеличиваются, поверхность их становится складчатой, ядра - двухроматиновыми, в цитоплазме накапливаются органеллы, причем отмечаются переплетения многочисленных псевдоподий рядом лежащих клеток. Межклеточные контакты наиболее часто выявляются на 3 – 14 сутки после заражения, при этом развитие клеточных реакций осуществляется
благодаря направленному кооперированию иммунокомпетентных клеток, в частности T- и В-лимфоцитов и макрофагов (В.Ф. Салов, В.С. Карпов, 1980). Цитоплазматические мостики, как правило, формируются между В- лимфоцитами, находящимися в свободном состоянии в просвете капилляров и венозных синусов. Мостики образуются в результате увеличения длины одного из цитоплазматических отростков, который вступает в тесный контакт с аналогичной ультраструктурой соседней клетки. Вначале между отростками расположенных рядом лимфоцитов хорошо прослеживаются клеточные оболочки и узкое межклеточное пространство. B дальнейшем, плазмалеммы контактирующих клеток вступают в тесное соприкосновение друг с другом. B зоне контакта осуществляется лизис клеточных оболочек и в цитоплазматическом мостике формируется канал, при помощи которого клетки могут обмениваться между собой различными веществами. Если клетки располагаются в непосредственной близости одна от другой, клеточные оболочки их могут контактировать на значительном расстоянии без образования цитоплазматических мостиков, формируя лишь в зоне контакта обособленное межклеточное пространство. Плазмалемма лимфоцита, обращенная в зону контакта, обладает повышенной проницаемостью по сравнению с остальной частью плазмалеммы, на что указывает появление в зоне контакта большого числа микропиноцитозных пузырьков, при помощи которых и осуществляется обмен веществ между клетками. Т-лимфоциты не образуют цитоплазматических мостиков, контакт осуществляется при помощи конической формы цитоплазматического отростка одного лимфоцита, проникающего в лакунообразную структуру, сформированную на поверхности соседней клетки. Между макрофагом и лимфоцитом образуется несколько цитоплазматических мостиков. Увеличение зоны межклеточного взаимодействия и прямой контакт цитоплазмы в области цитоплазматических мостиков в конечном итоге может привести к слиянию макрофагов и образованию гигантских многоядерных клеток. При слиянии эпителиоидных клеток или макрофагов и образовании гигантских клеток, как ядра, так и органеллы расположены хаотично, затем ядра отодвигаются на периферию цитоплазмы, расположение органелл становится более упорядоченным. Увеличение количества ядер в гигантских клетках сопровождается уменьшением их фагоцитарной активности.
B эпителиоидной клетке органелл становится еще больше, они специализированы в незрелых формах преимущественно для фагоцитарной, а в зрелых для синтетической функции.
Установлено, что фагоцитированные туберкулезные бактерии могут обнаруживаться в активированных макрофагах, но полностью разрушаются ко времени достижения ими стадии эпителиоидной клетки. Весьма характерным для эпителиоидно-клеточной гранулемы является агрегация клеток с образованием тесных "межпальцевидных" сцеплений цитоплазматических выпячиваний по типу застежки "молния". B дальнейшем
такие компоненты соприкасающихся эпителиоидных клеток служат одним из источников формирования многоядерных гигантских клеток.
Гигантские клетки характеризуются значительным полиморфизмом: от 2 – З ядерных, до гигантских с 20 ядрами. B гигантских клётках ядра располагаются в цитоплазме равномерно, реже – по периферии, в клетках Пирогова - Лангханса – преимущественно по периферии. Гистохимически они характеризуются пиронинофилией, ШИК-позитивной цитоплазмой, активностью кислой фосфатазы и окислительных ферментов. Относительно механизма образования гигантских клеток существует 3 точки зрения: 1) деление ядер без разделения цитоплазмы; 2) слияние клеток; 3) сочетание этих процессов.
Для борьбы с микобактериями туберкулеза необходимо взаимодействие лимфоцитов с неспецифическими эффекторными клетками - фагоцитами. При обсуждении этого вопроса одни исследователи отдают предпочтение лимфоцитам, считая, что они первыми встречаются с бактериальным антигеном и дают информацию в иммунокомпетентные органы. Другие авторы такую роль отводят макрофагам, подтверждая свою точку зрения данными о первичной локализации меченых антигенов в макрофагальных клетках.
При инфицировании организма микобактериями туберкулеза макрофаги, расположенные на некотором расстоянии от внедрившихся микроорганизмов, привлекаются к ним хемотаксическими факторами, образующимися в результате активирования сывороточного комплемента путем разрушения его компонентов C3 и C5. Опсонизированные сывороточными белками микроорганизмы подвергаются эндоцитозу фагоцитами. Считается, что активирование фагоцитоза опсонизацией микроорганизмов связано с активацией молекул рецептора на поверхности фагоцитов. Процесс эндоцитоза включает 3 этапа: 1)адсорбцию бактерий на клеточной мембране; 2) инвагинацию клеточной мембраны; 3) везикуляцию с образованием фагоцитарной вакуоли. Для осуществления завершенного фагоцитоза необходимо слияние фагоцитарной вакуоли с лизосомами клетки. Если по тем или иным причинам не произошло такое слияние с лизосомами, то в фагоцитарной вакуоли обнаруживаются бактерии, способные к внутриклеточному переживанию. Однако, если слияние происходит, основная масса бактериальных антигенов расщепляется и подвергается изменению, в результате которого антиген становится доступным к специфическому распознаванию с помощью T-лимфоцитов. Между макрофагами и лимфоцитами существует и обратная связь. Так, Т- лимфоциты, в свою очередь, воздействуют на макрофаги, находящиеся в месте внедрения возбудителя инфекции с помощью медиаторов - таких биологически активных веществ, как фактор, тормозящий миграцию макрофагов. Под влиянием лимфокинов сенсибилизированных лимфоцитов получена задержка внутриклеточного размножения в макрофагах микобактерий туберкулеза.
