было взято12 коров, из которых восемь были вакцинированы БЦЖ раньше в различные сроки (2 - 5 лет), четыре коровы служили контролем. Всех животных заразили вирулентной культурой микобактерий туберкулеза бычьего вида. Через 7 мес. животных убили. Патоморфологическими и лабораторными исследованиями материала установлено наличие туберкулеза у всех контрольных животных, а из числа вакцинированных - лишь у одной. Опыт показал, что иммунитет у вакцинированных животных сохранялся до четырех лет.
Эти данные подтверждены результатами производственных опытов, где в общем комплексе противотуберкулезных мер применяли вакцину БЦЖ. B 1974 - 1975 гг. несколько ферм, неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота, были оздоровлены. Поголовье крупного рогатого скота в этих хозяйствах в течение 5 - 7 лет периодически подвергали аллергическим и иммунологическим исследованиям на туберкулез. При плановых сдачах скота на мясокомбинат внутренние органы животных тоже выборочно исследовали. Туберкулез у животных не выявлен.
B дальнейшем эти исследования продолжались по программе, утвержденной ГУВ MCX CCCP в виде производственного испытания в комплексе противотуберкулезных мероприятий при оздоровлении хозяйств, длительно неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота. Эти испытания проводились в хозяйствах Республики Татарстан, в трех областях Сибири и четырех областях Казахстана. По состоянию на 01.06.83 г. было иммунизировано вакциной БЦЖ в 168 хозяйствах РСФСР 324248 гол. животных, в 4-х областях Казахстана в 52 хозяйствах 91778 гол. животных. B Республике: Татарстан за период 1977-1987 гг. в 42-х неблагополучных по туберкулезу хозяйствах было привито вакциной БЦЖ 65011 животных в том числе 18114 коров; в 34 условно - благополучных хозяйствах - 43045 голов животных, том числе 16076 коров. B указанный период в результате применения вакцины БЦЖ в комплексе противотуберкулезных мероприятий все неблагополучные пункты в Республике Татарстан были оздоровлены от туберкулеза.
Экономическая эффективность противотуберкулезных мероприятий на 1 рубль затрат составила 1,41 руб., а в целом получен экономический эффект в сумме 1132108 рублей (в ценах 1988 г.).
На основании положительного результата применения вакцины БЦЖ в производственных испытаниях Главное управление ветеринарии МСХ СССР одобрил проведенную работу и утвердил наставление по применению вакцины БЦЖ при туберкулезе крупного рогатого скота (от 22.02. 1985 г.) и издал приказ о принятии к применению в ветеринарии вакцины БЦЖ при туберкулезе крупного рогатого скота (от 25.12.84 г.) в РСФСР, Украинской ССР, Казахской ССР.
По материалам, представленным из трех республик - РСФСР, Казахстан, Украина, 27 областей страны к началу 1990 г. было привито вакциной БЦЖ более 1 млн. голов крупного рогатого скота, в том числе телят
- 757 тысяч, телок, завезенных из других хозяйств для замены неблагополучного поголовья - 23 тысячи, коров - 70 тысяч, откормочных животных - 150 тысяч голов. Из 517 хозяйств, в которых скот иммунизировали вакциной БЦЖ, оздоровлено от туберкулеза 284 (54,9%), резко снизилась заболеваемость в 135 (26,1%) хозяйствах.
Показано, что применение вакцины БЦЖ на молодняке позволяет в течение 1 - 1,5 года снизить заболеваемость животных и на фоне выполнения общего комплекса противотуберкулезных мероприятий полностью оздоровить поголовье от туберкулеза.
В связи с применением вакцины в широких масштабах и производством вакцины специально для крупного рогатого скота, наставление по применению вакцины БЦЖ при туберкулезе крупного рогатого скота было переутверждено ГУВ Государственной комиссии СМ СССР по продовольствию и закупкам в феврале 1990 г. Применение вакцины БЦЖ осуществляется с учетом эпизоотической обстановки хозяйств по туберкулезу крупного рогатого скота.
Так, по данным Коваленко А.М. (1994 г.) в результате широкомасштабной иммунизации комплекса противотуберкулезных мероприятий в Никопольском районе Днепропетровской области за 5 лет в 31 раз уменьшилось число реагирующих животных на туберкулин, а туберкулезные изменения при ВСЭ туш убойных животных с 618 в 1988 году до прекращения таковых животных.
На основании эпизоотических наблюдений, изучения у иммунизированных животных клеточных реакций (бласттрансформации лимфоцитов), результатов контрольных заражений этих коров, проведенных через различные сроки после вакцинации, был сделан вывод о том, что иммунитет к туберкулезу даже при высокой вирулентности возбудителя сохраняется у привитых животных до трех лет и более. Возникает иммунитет через 1 - 3 месяца после вакцинации.
Иммунобиологические реакции у животных, привитых вакциной БЦЖ. Иммунизация против туберкулеза вакциной БЦЖ обусловливает не только выработку специфического иммунитета, но и вызывает ряд физиологических сдвигов (В.Н. Черниговский, Г.С. Нан, Б.И. Альбертинский, 1962). Одним из механизмов усиления иммунных реакций организма под воздействием БЦЖ, по данным Zatr (1976), может быть действие вакцины на регуляцию перемещения лимфоцитов к лимфоидным тканям. Автор наблюдал через 1 - 2 дня после введения БЦЖ и черёз 3 недели накопление лимфоцитов в регионарных лимфоузлах и селезенке.
Противотуберкулезный иммунитет у вакцинированных животных оценивается по различным показателям: по параспецифическим морфологическим реакциям (усиление лимфоидной инфильтрации, гиперплазии ретикулярных и эндотелиальных клеток), по аллергическим туберкулиновым реакциям и т.д. В последние годы предложены и другие показатели, такие как реакция бласттрансформации (РБТ), с помощью
которой многие исследователи оценивают клеточный иммунитет (X. Шютт, 1979).
Установлено, что лимфоциты, взятые у лищ положительно реагирующих на туберкулин, при культивировании в присутствии ППДтуберкулина подвергаются митозу, тогда как лимфоциты лиц, отрицательно реагирующих на туберкулин, при культивировании в тех же условиях митозу не подвергаются. Эти наблюдения и определили возможность использования реакции бластрансформации лимфоцитов для изучения иммунитета. Под действием специфического антигена до 35%, а под действием фетогемагтлютинина ФГА - до 90 % лимфоцитов переходят в бласты (0.Е. Вязов, Ш.X. Ходжаев, 1973).
Лимфоциты, трансформирующиеся в бласты под влиянием специфического антигена, относятся к В-(антителопродуцирующим) и Т (ответственным за клеточный иммунитет) - клеткам и воспроизводимая in vitro реакция бласттрансформации - аналогична, реакции in vivo; она является начальным этапом иммунного ответа (Э.Н. Шляхов, 1977) .
Бласттрансформация представляет собой ранний этап процесса распознавания лимфоцитами чужеродных антигенов, она сопровождается усилением синтеза ДНК и последующим делением бластов (А.С. Шевелев, 1978). Если в культуре с антигеном бласты присутствуют в большем количестве, чем в культуре без антигена, то это является доказательством наличия клеточного иммунитета (М.М. Авербах, В.И. Литвинов, 1972; У.Д. Герберт, 1974). Показатели РБТ лимфоцитов возрастают в случае повышения устойчивости организма к туберкулезу и снижаются при ее падении.
Показателем наличия противотуберкулезного иммунитета в привитом вакциной БЦЖ организме считается также персистенция в нем микобактерий БЦЖ в виде Л-формы. 3.Н. Качемасов (1968, 1969, 1970) и др. выявили у микобактерий туберкулеза так же, как и у многих других, видов микроорганизмов, способность персистироваться, т.е. образовывать Л- формы. Последние длительно сохраняются и могут дать реверсию в исходный микробный вид с восстановлением вирулентности.
Оставалась неизвестной форма персистирования в организме иммунизированных микобактерий вакцинного штамма БЦЖ. Было доказано, что микобактерии БЦЖ в организме проходят несколько фаз: адаптации - 15 дней; максимального развития (вегетирования) - до 50 дней после вакцинации; стационарного вегетирования - до 150 дней; постепенного угасания. С 5 - 11 мес. с момента, вакцинации микобактерий БЦЖ в организме не выявляются (0.Р. Драбкина, 1959; А.И. Каграманова, 1961). Однако фактором, обусловливающим иммунитет при туберкулезе, А. Кальметт и его школа считали наличие в организме живых бактерий, что лежит в основе существующих взглядов и на БЦЖ как на фактор индуцирующий иммунитет. По данным многочисленных исследователей, иммунитет после вакцинации БЦЖ развивается 1 - 3 месяца, держится на высоком уровне 2 -3 года и в определенной степени сохраняется до 6 - 7 лет
