повреждений (Castillejos, L., et al, 2007, Gosalbes,M.J. et al, 2011). Резорцин и хлорид кадмия являются структурно-неспецифическими агентами, поэтому обработка этими соединениями вызывает структурные повреждения, затрагивающие все компартменты клетки и многие важные функции, в том числе и люминесценцию, что оуказыает на возможность создания избирательных тестов (Kelly, W.J. et al, 2010$ Moallem, U. Et al, 2010). Несмотря на очевидные преимущества биолюминесцентного тестирования, такие тесты до сих пор не паспортизованы и не доказана правомерность их использования в качестве индикатора загрязнения окружающей среды (Marx, Н. Et al, 2011). Для этого прежде всего необходимо провести сопоставление результатов биолюминесцентного тестирования и других современных биотестов (Padmanabha J., et al, 2004).
Считается, что среди большого разнообразия мутантов можно выбрать штаммы, избирательно чувствительные к определенным веществам. Однако успешных работ в этом направлении пока мало. Зато появились работы, сделанные с использованием рекомбинантных светящихся бактерий, где успешно эксплуатируется идея о том, что излучающие ферменты- люциферазы и их гены в последние годы стали самыми привлекательными и употребительными маркерами в генетике, эмбриологии, молекулярной биологии, в мониторинге окружающей среды и для биохимической диагностики в медицине (McSweeney, C.S., et al, 2005; , Mensink, В.Р. et al, 2003). Поэтому помимо использования в люминесцентном анализе природных светящихся бактерий ведется разработка новых направлений биотестирования, и одним из них является использование в качестве тест-объекта люминесцентных рекомбинантных штаммов различных бактерий (Е. coli, Pseudomonas, Rysobium и другие) (Dodd, D., et al, 2000; Ingelbrecht, J. A., et al, 2000). К настоящему времени описано клонирование ‘и экспрессия генов люминесцентной системы светящихся бактерий Vibrio harveyi, У. fischeri HP. leiognati в плазмидном векторе клеток различных микроорганизмов (Min В.В. et al, 2002, Mitsumori М., et al, 2011). Введение шх-гена позволяет создавать высокочувствительные биосенсоры, обладающие высокой спепифичностью. Например, сконструированы бактерии, в которых под действием токсикантов увеличивается свечение. С помощью такого биолюминесцентного биосенсора, созданного на основе Е. coli, можно установить наличие в среде (и в смесях тяжелых металлов) ртути. Принцип действия этого биосенсора заключается в увеличении экспрессии шх-генов при наличии в среде ионов ртути. Чувствительность метода выше, чем в атомной абсорбционной спектроскопии. Подобный биосенсор на основе бактерий Pseudomonas putida сконструирован и для определения в.среде нафталина, толуола, ксилола (Camboim, E.K.A., et al., 2012; Denman, S.E., et al., 2012). Бактерии рода Rysobium использованы для конструирования люминесцентного биосенсора загрязнения почвы. Некоторые штаммы бактерий рода Salmonella использованы для конструирования люминесцентного биотеста, позволяющего определять распределение бактерий на поверхности различных пищевых продуктов. Было предложено встраивать 25
шх-гены в бактериофаги, которые, внедряясь в клетку-хозяина, через от 30 до 50 мин вызывают экспрессию lux-reHoB. С использованием этого приема был разработан метод определения бактериальных клеток непосредственно в молоке, который позволяет «уловить» до 10 клеток в образце (Morgavi, D.P., et al, 2012; Or-Rashid, М. М., et al, 2003). Таким образом, приведенные выше данные иллюстрируют актуальность и фундаментальную ценность новых знаний о механизмах взаимодействия микроорганизмов, населяющих рубец жвачных, определяющих бактерицидную активность кормового фактораи компонентов рубцовой жидкости.
- Исследования по оценке влияния типа кормления и породы на рубцовое пищеварение молодняка крупного рогатого скота В настоящее время нет общепризнанной теории, объясняющей внутривидовые различия в проявлении продуктивного потенциала животных. В связи с этим сравнительное изучение пищеварения и обмена веществ молодняка крупного рогатого скота разного генетического потенциала является актуальным. Исследования проводились методом периодов (50 дней), на двух группах животныхстепной породы).12 мес. возраста (I группа - бычки герефордской, П — красной Таблица2 - Структура рационов подопытных животных,% [Сено судак | [288 | ГЗерносенаж яяменный [36,13 [= f- Гбилос кукурузный [м 14,04
Содержали животных на рационах, состоявших из следующих компонентов: сено люцерновое, сено суданки, ячменный зерносенаж, силос кукурузный, ячмень дробленый, свекла кормовая, весовая доля которых при сенажном типе кормления (первый период) составляла 21,5; 0; 36,1; 0; 28,4; 14,0%; при концентратно-силосном (второй период) 23,6; 0; 0; 24,7; 36,9; 14,8%; при сенно-концентратном (третий период) 23,2; 23,2; 0; 40,9; 12,7%, соответственно. В ходе эксперимента фактическая поедаемость кормов по группам не различалась. Переваримость и использование питательных веществ корма. В ходе эксперимента была выявлена тенденция к лучшей переваримости сухого вещества (СВ) сенажного и сенно-концентратного рационов у герефордов на 1,4-0,7%, органического (ОВ) — на 1,6-1,7%, BOB - на 2,3-1,7%. При скармливании подопытным животным концентратно-силосного рациона
отмечена наибольшая разница между группами по переваримости сырой клетчатки (5,3%, Р<0,05) в пользу животных мясного направления продуктивности. В целом же, по переваримости других питательных веществ достоверной разницы между группами не установлено. На протяжении всего опыта животные потребили с кормом примерно одинаковое количество азота: в первом периоде 152,6-150,0; во втором — 168,6-164,2; в третьем — 164,0 - 162,5 г/гол. Наибольшее отложение азота в ткани тела наблюдалось у герефордов. При скармливании сенажного рациона ретенция азота у данных животных была выше уровня молодняка молочного направления продуктивности на 12,2% (P<0,05), концентратно-силосного — 6,8% (Р<0,05) и сенно-концентратного — 13,8% (Р<0,05). В свою очередь, отложение кальция в теле бычков молочной породы было выше при скармливании концентратно-силосного рациона — на 9,8%, сенно-концентратного— на 19,8% (Р<0,05). Проблема доступности фосфора для моногастричных достаточно хорошо изучена (США, 1994). В связи с этим, нами предполагалось, что проблема доступности данного элемента существует и для животных с многокамерным желудком. Согласно полученным данным потери фосфора с мочой увеличиваются от сенажного к сенно-концентратному типу кормления на 4,59,7%. Потери эндогенного фосфорау животных мясной породы составили: при сенажном рационе — 76,4%; концентратно - силосном — 58,4%; сенно - концентратном — 65,6%, у бычков молочной породы — 57,1; 69,5 и 62,7%, соответственно. Истинная степень использования фосфора из концентратносилосного рациона оказалась выше (на 11,2-26,0%). Объяснение этого кроется в ое доступности фосфора для обмена в отдельных видах корма. использр о вания эдуктив н оеергиииспользование животными разногоэнергии направлениярационов. продуктивностиЭффективность имеет некоторые особенности. Различия по потреблению валовой энергии между группами не были значительны. По уровню доступной энергии для обмена животныевеличине чистой1-й группыэнергиипревосходилив продукции сверстников- на 2,0-9,4%,П-й группыв зависимостина 0,24-4,4%,от типапо кормления. Относительное количество теплопродукции находится в прямой зависимости от особенностей кормления и направления продуктивности животных. При этом определенный интерес может представлять та часть теплопродукции, которая образовалась на этапе трансформации обменной энергии сверхподдержания в чистую энергию прироста. Рассматривая ее как работу организма по формированию тканей «de novo», можно получить следующий числовой материал. Скармливание бычкам мясной породы сенноконцентратного рациона привело к наиболышему увеличению значения работы по сравнению с сенажным рационом — на 3,9%, концентратно-силосным — на 6,9%. Аналогичные данные были получены и в экспериментах на животных молочной породы, где разница по величине работы составила соответственно 6,3 и 1,6%. Характеристика рубцового пищеварения. Как видно из анализа данных (табл.3) концентрация ЛЖК в зависимости от тила кормления имеет свои
