in situ ~ хронической фистулы рубна на молодняке крупного рогатого скота — 24 часовая экспозиция
При выполнении эксперимента 5 (in vitro) использованы бактериальные штаммы E.coli K12, трансформированные плазмидами с сшивками рецепторных генов (rh/R, lasR ot Pseudomonas aueruginosa и luxR Vibrio fisheri) и генов свечения ([ихСРАВЕ) Photorhabdus luminescens (10) (табл. 28). Культивирование осуществляли на LB-arape (Sigma, США) с добавлением 10 мкг/мл доксициклина в течение 18 часов при 37 °С. Далее переносили в LBбульон (Sigma, США) и инкубировали 90 минут при 37 °С для достижения клетками ранней экспоненциальной фазы. В качестве аутоиндукторов использованы N-butyryl-L-homoserinelactone (С4-ГСЛ), N-(3-oxo}-hexanoyl-Lhomoserinelactone (оксо-Сб-ГСЛ) и N-dodecanoyl-L-homoserinelactone (С12ГСЛ) в диапазоне концентраций от 10° до 104 М. Рубцовая жидкость молодняка крупного рогатого скота была получена через хроническую фистулу и подвергнута центрифугированию при 5000 об/мин в течении 10 минут. Оценку способности подавлять активность аутоиндукторов осуществляли путем инкубации 10 мкл рубцовой жидкости с ГСЛ равного объема в течении 15 минут при 37 °С, после чего был добавлено 80 мкл суспензии соответствующего биосенсора. Измерение проводили в кинетическом режиме на люминометре LM-01T (Immunotech, Чехия) в течение 120 минут, а уровень свечения выражали в RLU (relative luminescent units).
Таблица 28. Использованные штаммыи их характеристика.
| E.coli ALLO] о | PhIR rhll:sluxCDABE | | детекция yes | |Ми homoserinelactone |
|---|---|---|---|
| pALlo2 tats | "НИ: Вх СРАВЕ | о | Rar homoserinelactone |
| AL LOZ | luxR* luxl::luxCDABE | yes | aka)HUET homoserinelactone |
| E.coli | a | N-(3-0xo0)-hexanoyl-L- | |
| E.coli | aioe | N-dodecanoyl-L- | |
| E.coli | р - | N-dodecanoyl-L- |
Оборудование и технические средства. Люминометр LM-01T (Immunotech, Чехия), многофункциональный микропланшетный ридер Infinite 200 PRO, комплекс для определения белка, азота UDK 139, хроматограф газовый «Кристалл-ЛЮКС- 4000», хроматограф жидкостной «Люмахром». Средние образцы кормов (500r), их остатков, исследовались по методикам зоотехнического анализа и биохимических исследований в Центре
коллективного пользования научным оборудованием и Испытательном центре Всероссийского НИИ мясного скотоводства на содержание в них сухого вещества, сырого протеина (ГОСТ 13496.4-93), сырого жира (ГОСТ 13496.1597), сырой клетчатки (ГОСТ 12396.2-91), сырой золы (ГОСТ 26226-95), кальция (ГОСТ 26570-95), фосфора (ГОСТ 26657-97). Статистическая обработка. Математическая обработка полученных данных проводилась программой «SPSS Statistics Version 20». По результатам исследований отмечается изменение химического состава фуражного зерна под действием баротермической деструкции. В частности, в обработанном фуражном зерне ячменя и пшеницы отмечается увеличение массовой доли сухого вещества (на 1,3-5,4%), сырого жира (на 6,1-10%), на фоне снижения сахара (на 11,3-25,7%), сырой клетчатки (на 0,2-1,0%) (табл.29).
Таблица 29 - Изменение химического состава фуражного зерна под действием
баротермической деструкции
| Показатель| | Зерно фуражного ячменя | Обработанное | зерно фуражного ячменя* | Зерно фуражной пшеницы | Зерно фуражной ишеницы* |
|---|---|---|---|---|
| Сухое вещество, мд.% | 92,3 | 93,6 | 88,2 | 93,6 |
| Сырая м.д. % | ||||
| Сырой жир, мд. | 53 | 11,4 | 1,6 | 11,6 |
| %Сырой протез ML % | 12,0 | 10,5 | 93 | |
| Кальций | ||||
| Фосфор | ||||
| Сахар, мд. | ||||
| Витамин | 150,1 | 272,4 | 259,3 | |
| Обменная энергия, . iia | 11.5 и | 12.1 у | 119 й | 132 |
| * - зерно, | подвергнутое | баротермической | деструкции (Патент | на изобретение |
№2562715).
По результатам исследований на 4 с ay персваримости сухого вещества ячменя me aa su Рона ружено снижение пшеницы соответственно на 42,4 и 13 1% ее ЕО. ae Е Ea и 13,1% по сравнению с нативной формой и
| Таблина 30 - Переваримость НЯ Измельченное | ehhaaanкрa сухо аЕЕТЕЕ oo | in i, situ (через 3 часа . Eta = |
|---|---|---|
| зерно фуражного ячменя | 7G om ny | ЕЯ Крахмал |
| Обработанное фуражного ячменя* зерно | 1931042 | 29,3+0,98 |
| Еее зерно фуражной шпеницы | 35.9219 vel, | ad bao 9+1,85 |
| Обработанное зерно фуражной шпеницы* | 13,5+0,84 | 21,8+0,85 |
| зерно, подвергнутое ann баротермической | = деструкции (Патент на | изобретение №2562715) |
| Таблица 31 - Переваримость пищеварение), % (24 час. Зерно | сухого вещества и крахмала инкубация НС! в искусственном и пепсином) ЕЕ | in "и. vitro (кишечное рубце с РЖи 12 час. с |
|---|---|---|
| Измельченное зерно фуражного ячменя = | 65,8413 | 81.50.81 |
| Обработанное фуражного ячменя* зерно | 69,1=0,82 | 97,1+0,78 |
| Измельченное зерно фуражной шпеницы | 658091 | 8475087 |
| Обработанное зерно фуражной шпеницы* | 73.550,88 | 94 ” |
| OS зерно, подвергнутое баротермической | = деструкции (Патент на | изобретение №2562715) |
5Takumобразом,предварительныеисследованияпо использованиюпроцесса аротермическойd адеструкции зерновых кормов как одного из путей снижения
Разработка способа регулирования распада крахмала в рубце за счет снижения его доступности для микрофлоры В первой серии лабораторных исследований по оценке влияния дозы раствора на структуру измельченного зернового корма установили, что при дозировке 0,25-0,3 литра на 1 кг измельченного зернового корма 86
