экстенсивность и интенсивность инвазии. Одновременно изучалась динамика распространения ассоциации саркоцистоза с эхинококкозом и фасциолезом. Отработав методики, накопив материал по динамике распространения инвазий, на базе мясокомбината по принципу аналогов сформировали 5 групп по шесть голов в каждой группе. От всех 36 животных взяты образцы для патоморфологических исследований из миокарда, печени, щитовидной, поджелудочной желёз и надпочечников.
а б
в г
Рис. 1. Компрессориум. Микросаркоцисты в миокарде (а), языке (б), массетере (в), длиннейшей мышцы спины (г). Метиленовая синь. Ок. 7, об. 8
Распределение скота по группам провели после убоя животных на основании результатов экспертизы туш, органов и саркоцистоскопии мышечной ткани. Убой провели в технологические сроки после 18-24-часовой голодной выдержки. Первая группа (6 голов) не инвазированные животные служили контролем. Вторая-четвертая группы (18 голов) инвазированные микросарко-
цистами, в том числе 6 голов со слабой степенью инвазии, 6 – средней и 6 – сильной. Пятая группа (12 голов) включала ассоциативное заражение животных микросаркоцистами с эхинококками (6 голов) и микросаркоцистами с фасциолами (6 голов).
Под малым увеличением микроскопа (×56) подсчитывалось общее количество цист саркоцист в копрессории и согласно методике В. А. Салимова (табл. 1) интенсивность инвазии подразделяли на слабую, среднюю, сильную.
Таблица 1
Критерии оценки интенсивности саркоцистозной инвазии
| Интенсивность | Количество цист | саркоцист (экз. при ×56) |
|---|---|---|
| инвазии | в поле зрения микроскопа | в 24 полях зрения компрессория |
| Слабая | 1-3 | до 50 |
| Средняя | до 18 | 51-200 |
| Сильная | более 18 | выше 201 |
Животные, поступившие на мясокомбинат для технологической переработки и производства мясных изделий, согласно ветеринарной сопроводительной документации поступали на мясоперерабатывающее предприятие клинически здоровыми. Общее физиологическое состояние скота оценивали по методикам, изложенным в клинической диагностике (С. Д. Балаховский, М. С. Балаховский, 1959; В. Е. Предтеченский, 1960; М. Д. Лемперт, 1964; С. А. Ивановский, 1965).
Обсеменённость органов, тканей для исключения заболеваний бактериального происхождения выборочно проводили в областной ветлаборатории (директор Д. А. Гулин), вирусного и инвазионного характера – Самарской научно-исследовательской ветеринарной станции (директор, д-р вет. наук К. М. Садов). Кроме того для уточнения распространения эхинококкоза и фасциолёза в хозяйствах области анализировали отчёты областного департамента ветеринарии (начальник канд. биол. наук, доцент С. В. Овчинников).
Для патоморфологического исследования и снятия микрометрических замеров от каждого животного вырезали по три кусочка из миокарда, печени, щитовидной, поджелудочной желёз и надпочечников. Взятые образцы фиксировали раствором 10% нейтрального формалина, после проводки в Центральной научно-исследовательской лаборатории при Самарском государственном медицинском университете, материал заливали в парафин. С парафиновых блоков на роторном микротоме готовили срезы
толщиной 5-7 µ. Гистологические препараты для обзорного изучения окрашивали гематоксилином и эозином, на соединительную ткань – по Ван-Гизону. Изучали препараты в лаборатории патологической анатомии на кафедре эпизоотологии, патологии и фармакологии (зав. кафедрой, д-р биол. наук, проф. В. С. Григорьев) под микроскопом Биолам. Наиболее характерные места фотографировали для подтверждения полученных данных.
В миокарде определяли линейные размеры кардиомиоцитов, миоцитов симпласта и атипических волокон; в печени измеряли размер долек, диаметр гепатоцитов, их ядер; диаметр жёлчных протоков и толщину выстилающего эпителия; в щитовидной железе – площадь фолликулов, количество резорбционных вакуолей, высоту фолликулярного эпителия, минимальный и максимальный диаметры ядер; в поджелудочной железе – размер долек, диаметр ацинусов, ациноцитов, островков Лангерганса, панкреацитов, инсулоцитов и их ядер; в надпочечниках – высоту наружного и внутреннего слоев капсулы, клубочковой, пучковой и сетчатой зон, мозгового вещества, эпинефроцитов, минимальный и максимальный диаметр ядер.
Гистоморфоцитометрические измерения проводили с помощью окулярной линейки. Цену деления окулярной линейки высчитывали путём линейки объект-микрометра. С её помощью проводили переодическую эталонизацию окулярной линейки. Для получения достоверных данных использовали формулу определения необходимого количества замеров с заданной вероятностью (Р=0,95) и допустимой ошибкой в биологических исследованиях не более 5% и материалы М. В. Угловой (1982), В. А. Салимова (1991, 2003). Необходимое число наблюдений и сравниваемых величин рассчитывали по формуле
n n k m x12 m mxi 2 Tp2 1 21m 2 / k m 1 2 mmxi 2 ,
где k – число объектов наблюдения; m – число измеренных показателей в одном объекте; хi – результат единичного замера по сравниваемым показателям; Tp – значение коэффициента Стьюдента для заданной вероятности P ; ɛ – заданная допустимая ошибка измерений в относительных единицах; n – число наблюдений, необходимое для того, чтобы получить достоверные данные
