Саркоцистоз крупного рогатого скота

цистами, в том числе 6 голов со слабой степенью инвазии, 6 – средней и 6 – сильной. Пятая группа (12 голов) включала ассоциативное заражение животных микросаркоцистами с эхинококками (6 голов) и микросаркоцистами с фасциолами (6 голов).

Под малым увеличением микроскопа (×56) подсчитывалось общее количество цист саркоцист в копрессории и согласно методике В. А. Салимова (табл. 1) интенсивность инвазии подразделяли на слабую, среднюю, сильную.

Таблица 1

Критерии оценки интенсивности саркоцистозной инвазии

Животные, поступившие на мясокомбинат для технологической переработки и производства мясных изделий, согласно ветеринарной сопроводительной документации поступали на мясоперерабатывающее предприятие клинически здоровыми. Общее физиологическое состояние скота оценивали по методикам, изложенным в клинической диагностике (С. Д. Балаховский, М. С. Балаховский, 1959; В. Е. Предтеченский, 1960; М. Д. Лемперт, 1964; С. А. Ивановский, 1965).

Обсеменённость органов, тканей для исключения заболеваний бактериального происхождения выборочно проводили в областной ветлаборатории (директор Д. А. Гулин), вирусного и инвазионного характера – Самарской научно-исследовательской ветеринарной станции (директор, д-р вет. наук К. М. Садов). Кроме того для уточнения распространения эхинококкоза и фасциолёза в хозяйствах области анализировали отчёты областного департамента ветеринарии (начальник канд. биол. наук, доцент С. В. Овчинников).

Для патоморфологического исследования и снятия микрометрических замеров от каждого животного вырезали по три кусочка из миокарда, печени, щитовидной, поджелудочной желёз и надпочечников. Взятые образцы фиксировали раствором 10% нейтрального формалина, после проводки в Центральной научно-исследовательской лаборатории при Самарском государственном медицинском университете, материал заливали в парафин. С парафиновых блоков на роторном микротоме готовили срезы

толщиной 5-7 µ. Гистологические препараты для обзорного изучения окрашивали гематоксилином и эозином, на соединительную ткань – по Ван-Гизону. Изучали препараты в лаборатории патологической анатомии на кафедре эпизоотологии, патологии и фармакологии (зав. кафедрой, д-р биол. наук, проф. В. С. Григорьев) под микроскопом Биолам. Наиболее характерные места фотографировали для подтверждения полученных данных.

В миокарде определяли линейные размеры кардиомиоцитов, миоцитов симпласта и атипических волокон; в печени измеряли размер долек, диаметр гепатоцитов, их ядер; диаметр жёлчных протоков и толщину выстилающего эпителия; в щитовидной железе – площадь фолликулов, количество резорбционных вакуолей, высоту фолликулярного эпителия, минимальный и максимальный диаметры ядер; в поджелудочной железе – размер долек, диаметр ацинусов, ациноцитов, островков Лангерганса, панкреацитов, инсулоцитов и их ядер; в надпочечниках – высоту наружного и внутреннего слоев капсулы, клубочковой, пучковой и сетчатой зон, мозгового вещества, эпинефроцитов, минимальный и максимальный диаметр ядер.

Гистоморфоцитометрические измерения проводили с помощью окулярной линейки. Цену деления окулярной линейки высчитывали путём линейки объект-микрометра. С её помощью проводили переодическую эталонизацию окулярной линейки. Для получения достоверных данных использовали формулу определения необходимого количества замеров с заданной вероятностью (Р=0,95) и допустимой ошибкой в биологических исследованиях не более 5% и материалы М. В. Угловой (1982), В. А. Салимова (1991, 2003). Необходимое число наблюдений и сравниваемых величин рассчитывали по формуле

n   n   k  m x12   m mxi  2  Tp2    1 21m    2 / k  m  1  2   mmxi   2 ,
   
 

где k – число объектов наблюдения; m – число измеренных показателей в одном объекте; хi – результат единичного замера по сравниваемым показателям; Tp – значение коэффициента Стьюдента для заданной вероятности P ; ɛ – заданная допустимая ошибка измерений в относительных единицах; n – число наблюдений, необходимое для того, чтобы получить достоверные данные

в опыте по сравнению с контролем; Δn – доверительный интервал числа n при заданных значениях P .

Функциональное состояние ядер, клеток, фолликулов, островков определяли на основании микрометрических данных размера ядер клеток и цитоплазмы, выводили цотоплазменно-ядерное отношение (ЦЯО), объём ядер, цитоплазмы, шара  VШ  и эллипсоида  VЭ  , площадь круга  SК  и эллипса  SЭ  , для чего использовали формулы, предодложенные К. Ташке, 1980; М. В. Угловой, 1982; Б. А. Угловым, 1986:

 d3  a2b  d2  ab
VШ  ; VЭ  ; Sк  ; SЭ  ,
6 6 4 4
ЦЯО  VK  VЯ ; ЦЯО  VЯ  VЯД ; ЦЯДО  VК  VЯД ,
V V V
Я ЯД ЯД
где d – диаметр ядра (клетки); a – малая полуось клетки (ядра);
b – большая ось клетки (ядра); VК – объем цитоплазмы; VЯ – объ-
ем ядра; VЯД – объем ядрышка.

Полученные данные заносили в протокольные карточки. Вычисляли показатели средней арифметической, её ошибки и коэффициента достоверности при Р <0,05; Р<0,01; Р<0,01 общепринятыми в биологии методами с использованием пакета программ Microsoft Office Excel 2007. Аналогичным образом с использованием статистического анализа обрабатывали цифровой материал таблиц. Всего приготовлено 540 парафиновых блоков, 2160 гистологических препаратов для окраски гематоксилином и эозином, методом Ван Гизона.

2.1. Распространение спонтанного саркоцистоза и ассоциации (саркоцистоз : эхинококкоз : фасциолёз) у крупного рогатого скота в хозяйствах Самарской области

Самарская область расположена в среднем течении реки Волга и занимает площадь 53,6 тыс. км². Территория области с севера на юг протянулась на 335 км, с запада на восток – 315 км. На севере область граничит с Республикой Татарстан, на юге –