Справочник по контролю кормления и содержания животных

Определение фосфора

Колориметрический метод определения фосфора является наиболее простым, удобным и`точным. Oi основан па способности неорганических фосфатов образовывать с молибденовокислым аммонием комплексные соединения, которые затем восстанавливаются сульфитом натрия и гидрохиноном до молибденового окисла, окрашенного в голубой цвет (так называемая молибденовая синь). ионамиВ присутствиикомплексноеванадиясоединениефосфорнаяжелтогокислоцве та . oopanyerИнтенсивностьс молибдатсине - го или желтого окрашивания растворов пропорциональна содержанию фосфора. Фосфор определяют из растворов золы (озоление при температуре ue выше 450—500°С) и из минерализатов после мокроTO озолеция кормов. Определение фосфора по интенсивности образования фосфорномолибденовой сини (из растворов золы). Концентрация фосфора в растворе золы, взятом для колориметрического определения, не должна превышать 0,15 мг. Поэтому рекомендуется делать разведения исходного раствора золы с учетом вида и массы корма, взятых для озоления. Ниже приводится вспомогательная таблица по определению оптимального объема раствора золы при массе корма 2 и Бен исходном объеме раствора 100 мл (табл. 42).

1. Определение оптимального объема раствора золы при массе корма 2 ибг

Реактивы, посуда, оборудование, Реактивы; ОсновHoll эталонный стандартный раствор фосфора (4,393 г химически чистого однозамещенного фосфата калия— КН>РО,, предварительно высушенного в эксикаторе над серной кислотой до постоянного веса, растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе (на 1 a), к готовому раствору прибавляют 5 мл хлороформа. Рабочий стандартный раствор с содержанием 0,01 мг фосфора в 1 мл (основной раствор разводят в 100 раз в день анализа). 5%-ный раствор молибденовокислого аммония (готовят два рас-

i cid

твора: 25 г молибденовокислого аммония растворяют в 300 мл дистиллированной воды и фильтруют; в другой колбе к 125 мл диетиллированной воды приливают 75 мл концентрированной серной кислоты; оба раствора смешивают, охлаждают и доводят объем до 500 мл дистиллированной водой). 20%-ный раствор сульфита натрия (готовят из сухой безводной соли на 7—10 дней, хранят в хорошо закрытой склянке). ной серной14-ныйкислоты).раствор гидрохнюона (водный+1 капля кондентрированСодово-серниетый раствор (для ero приготовления берут 20 мл 20%-ного раствора сульфита иатрия ин соединяют со 100 мл 20%мого раствора углекислого патрия, перед употреблением фильтруют; так как раствор ие стоек, его готовят в небольшом количестве). Сернистокислый натрий и углекислый натрий готовят из сухих безводных солей раздельно. Смешивают перед работой в нужном ко: личестве. 0,50%-ный амидол (на 5%-ном растпоре сульфита натрия). Посуда: мерные колбы na 100 мл; мерные пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл; бюретки па 25 и 50 мл. Оборудование. Фотоэлектроколориметры или визуальный колор иметр.x д определения. Берут мерные колбы na 100 мл. В колбочки, предназначенные для стандартных растворов фосфора, из пипетки’ наливают по 2 мл, Би 10 мл рабочего раствора фосфора (0,02, 0,05, 0,10 мг фосфора); Для приготовления «нулевого раствора» в две колбочки берут по 50 мл дистиллированной воды. В колбочки для испытуемых проб кормов приливают раствор золы (табл. 42). Во все колбы до половины объема добавляют дистиллированную воду и по 2,5 мл раствора молибденовокиелого аммония; раствор в колбах перемешивают. Через 5 мин вносят по 2,5 мл раствора сульфита натрия. Растворы смешивают и через 10 мин добавляют по 2 мл раствора гндрохинона. Снова тщательно перемешивают. Доводят объем в колбах до 100 мл, тщательно перемеоставляют На оч, Проводят колориметрию растворов, окрашенных в синий (голу бой) цвет, Сравнение интенсивности окраски испытуемого и стандартного растворов проводят в колориметре типа Дюбоска или в фотоколориметрах марок ФЭК-М, ФЭК-Ни др. Вместо раствора сульфита натрия можио использовать содовосернистый раствор, который осторожно по стенке приливают в колбочки (по 5 мл) после раствора тидрохинона. Содержимое колбочек перемешивают осторожно несколько раз до прекращения вспенивания раствора. изре и0,5%-ногоВместо сульфитаираствора(понатрияамидола,2,5 мл)и гидрохинонаrataприготовленногиспользоваиинисп о льзуютпа содово-сернисто-5%-помтакжера с месьтвого раствора или амидола колориметрию окрашенных растворов можно проводить через 60 мин). Содержание фосфора в корме при сжигании методом сухого озоления и использовании колориметра тина Дюбоска рассчитывают по формуле С.Ни-У-Р 3 =, Нх.Уга

где х— содержание фосфора в исследуемом корме, мг/г (г/кг); С — количество фосфора в стандартном растворе, мг: Her — высота стояния стандартного раствора в стаканчике колориметра, установленная по шкале; Hx -— высота стояния испытуемого раствора; У — общий объем раствора золы после разведения; У; — объем раствора золы, взятой для колорниметрического’ | определения фосфора; а-— навеска . корма,рии окрашенногог; Р — разведениераствора подготовленного для колоримет-я Разводить подготовленный к колориметрин испытуемый раствор следует только в случае значительной разницы в интенсивности окрамы испытуемым: н стандартным растворами. eee. Fou объем стандартного раствора фосфора 100 ma, а объем испытуемого (окрашенного) раствора золы корма перед КОРНИ 200 мл, то Р равно 2 (200 мл: 100 мл). Чаще всего равняется | (100 мл: 100 мл) Особенности определения фосфора при использовании фотоэлектроколориметра. Для построения калибровочной кривой на фосфор в мерные колбы на 100 мл берут 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 и 15 мл Иa рабочего раствора фосфора (в 1 мл содержится 0,01 мг _flasice добавлют так же, как и при определении фосфора в кормах, растворы молибденовокислого аммония, сульфита патрия и гидрохинона (или амидол и содово-сернистый раствор). р Объем содержимого доводят до 100 мл, оставляют на 16—24 ч и колориметрируют с красным светофильтром. Используют стакан1ики с толщиной просвечивающего слоя 30 мм. sz р Для построения шкалы колориметрическое определение фосфора в стандартных растворах проводят 3—4 раза в разные дни с од: У т теми жереактивами. Затем вычерчивают график. биг о горизонтали располагают данные о концентрации фосфора : мг, или мкг), по вертикали— показатели колориметра. Нуль прибора электрофотоколориметра устанавливают по раствору с водой и реактивами (нулевой раствор без фосфора). °С каждой партией анализируемых проб корма целесообразно готовить три стандартных раствора фосфора (0,02; 0,05 и 0,10 мг) для построения переменной или контрольной шкалы на Ри для вывы ROR DE PO SHOES коэффициента К. олориметрируют раствор и записывают показания шкалы фбме По. калибровочной кривой находят количество фосont (мт), ‚соответствующее показаниям шкалы фотоколориметра asa оли’ несло фосфора в кормах при сухом озолении определяют формуле ВК

ВЫ техИаафа p 1 Via’г корма, мг; С — количество фосhg atria В Ry patraope золы, установленное по као а ‘ ‘P у и = соответствии с показателями фотокоть, 2 ZF — общий объем раствора золы после pasНИ aD: 17 GOREN раствора золы, взятый для колор рического определения фосфора, м; Р— разведение подготовленного к колориметрии окрашенного. раствора’ 40лы (по сравнению со стандартным раствором, объем которого равен 100 мл); «— масса корма, г; К — поправочный 181